Reveal Q+ for Zearalenone

Reveal Q+ for Zearalenone
Paskowy test ilościowy do wykrywania
Zearalenonu
NEO 8185
Stosowany z czytnikiem Reveal AccuScan III
wersja 4.21 lub nowsza
o
Przechowywać w temperaturze 18-30 C
Nie zamrażać
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Toksyna
Zearalenon jest wytwarzany przez szczepy pleśni Fusarium graminearum, które wytwarzają także
toksynę
deoksynivalenol.
Wykrywając
zearalenon
w
próbce,
można
być
pewnym,
że
w badanym materiale są także inne mykotoksyny wytwarzane przez szczepy fusarium.
Zearalenon jest klasyfikowany jako mykotoksyna estrogenna, ponieważ często powoduje zakłócenia
w układzie rozrodczym zwierząt.
Skarmianie pasz zanieczyszczonych zearalenonem powoduje szereg problemów związanych
z reprodukcją zwierząt. U świń, Zearalenon powoduje zapalenie sromu i pochwy, niską masę miotu
prosiąt, reabsorbcję płodu i poronienia, zmniejszenie liczebności miotu i niewłaściwy rozwój
osobników męskich w miocie. Zearalenon może także opóźniać ruję, narażając producenta na straty.
Producenci zwierząt zaczynają w coraz większym stopniu mieć świadomość odnośnie problemów
z
zearalenonem,
i
zaczynają
szukać
sposobów
zredukowania
ryzyka
związanego
z zanieczyszczoną paszą.
Najlepszym zabezpieczeniem przed mykotoksynami jest monitoring ich obecności w paszach
i żywności.
Oznacza to badanie wszystkiego wzdłuż drogi od początkowej uprawy zbóż do
końcowego produktu.
FDA nie ustaliła zaleceń odnośnie poziomu Zearalenonu.
Regulacje UE dla Zearalenonu są następujące:
Żywność
Nieprzetworzona kukurydza
Nieprzetworzone zboża i kukurydza przeznaczona do bezpośredniego
spożycia przez ludzi
Inne nieprzetworzone zboża przeznaczone do bezpośredniego spożycia
przez ludzi
Chleb, Makarony, ciastka, płatki zbożowe, płatki kukurydziane i śniadaniowe
Przetworzona żywność zbożowa dla niemowląt i dzieci oraz żywność dla
dzieci
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Poziomy
Maksymalne (ppb)
200
100
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
75
50
20
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Zastosowanie testu
Test Reveal Q+ Zearalenone jest stosowany do szybkiej ilościowej analizy pszenicy i kukurydzy.
Kierowany jest do osób zajmujących się kontrolą Jakości produktów możliwie zanieczyszczonych
Zearalenonem.
Zasada działania testu
Test jest jednostopniowym paskowym testem immunochromatograficznym działającym na zasadzie
konkurencyjnej techniki immunologicznej.
Ekstrakt przenika do strefy z reagentami zawierającymi przeciwciała specyficzne dla Zearalenonu
skoniugowane z cząsteczkami złota. Jeżeli w badanej próbce obecny jest Zearalenon to w tej strefie
wychwytywany jest przez kompleks przeciwciało-barwnik na skutek czego tworzy się nowy kompleks:
Zearalenon + przeciwciało + barwnik. Z kolei ten kompleks przenika dalej do strefy membranowej,
w której Zearalenon skonjugowany jest z nośnikiem białkowym. W tej strefie wszystkie nie związane
przeciwciała specyficzne dla Zearalenonu są wychwytywane, a cząstki barwne koncentrują się
tworząc widoczną poprzeczną linię na pasku. Jeżeli w badanej próbce jest więcej Zearalenonu to
w większym stopniu będzie tworzył kompleksy ze specyficznymi przeciwciałami i cząsteczkami
barwnymi, skutkiem czego mniej przeciwciał Zearalenonu będzie wychwytywanych w strefie testowej
paska. Z tego względu przy wyższej koncentracji Zearalenonu w badanej próbce intensywność koloru
na poprzecznej linii tworzącej się na pasku jest słabsza.
Alogorytmy zaprogramowane w czytniku Reveal AccuScan™ III przeliczają intensywność tej linii na
ilościowy wynik wyrażany w częściach na bilion ppb (parts per billion = ppb).
Membrana zawiera także strefę kontrolną, w której immuno kompleks znajdujący się w strefie
reagentowej jest wychwytywany przez przeciwciała tworząc widoczną poprzeczną linię kontrolną.
Kontrolna linia formuje się zawsze, niezależnie od poziomu zawartości Zearalenonu w badanej próbce
i wskazuje na prawidłowe działanie testu.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Przechowywanie
Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Paski testowe należy
przechowywać w oryginalnych zamkniętych pojemnikach, w celu zachowania ich optymalnych
właściwości.
Skład zestawu

25 pasków testowych Reveal Q+

25 czerwonych probówek do rozcieńczeń

25 probówek na próbki

2 butelki z rozcieńczalnikiem do próbek

Instrukcja użycia
Materiały zalecane, nie znajdujące się w zestawie

65% etanol

Pojemniki do pobierania próbek z nakrywkami (Neogen nr kat. 9428)

Młynek Agri Grind lub równorzędny (Neogen nr kat. 0401)

Waga o możliwości odważenia 5-50 g  0,1g (Neogen nr kat. 9427)

Stoper (Neogen nr kat.0426)

Statyw na probówki Reveal Sample Cup Rack (Neogen nr kat. 9475)

Czytnik Reveal AccuSan III (Neogen nr kat. 9590)

Cylinder miarowy o pojemności 100 ml (Neogen nr kat.9447,9448)

Strzykawka filtrująca lub filtr Whatman Nr.1 (Neogen nr kat. 9420)

Pojemniki do zbierania ekstraktu z korkami (Neogen nr kat. 9421, 9421B)

Pipeta 100l (Neogen nr kat. 9272, 9278)

Końcówki do pipety 20-200l (Neogen nr kat.9407, 9410 lub 9417)

Pipeta 200l (Neogen nr kat. 9488)
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Uwagi i zalecenia
1. Paski testowe muszą być przetrzymywane wewnątrz suchego oryginalnego opakowania.
2. Etanol jest łatwopalny. Przechowywać opakowanie szczelnie zamknięte, z dala od ciepła
ognia i iskier oraz osób palących. Jest toksyczny po połknięciu lub po wchłonięciu oparów.
Unikać kontaktu ze skórą.
3. Zestaw należy przechowywać w temperaturze pokojowej (18 – 30C). Nie zamrażać.
4. Nie stosować testu po upływie jego terminu ważności.
5. Wszystkie stosowane w teście płyny, w tym ekstrakty próbek, jak również sprzęt laboratoryjny
należy traktować, jako zanieczyszczone Zearalenonem. W czasie wykonywania testu należy
stosować rękawiczki i odzież ochronną
6. W celu uniknięcia zanieczyszczenia krzyżowego, do każdej próbki należy stosować czysty
sprzęt laboratoryjny i dokładnie myć szkło przed użyciem go do następnej próbki.
Ustawienia czytnika AccuScan III
Czytnik AccuScan III musi mieć wersję oprogramowania 4.21 lub nowszą.
W celu uzyskania informacji na temat odpowiednich ustawień krzywej wzorcowej należy odnieść się
do opakowania testu lub certyfikatu Jakości testu. Krzywe wzorcowe zależą od testowanego produktu.
Curve 1 set: kukurydza
Curve 2 set: pszenica
1. Uruchomić program AccuScan III w czytniku.
2. Wybrać kategorię: Mycotoxin Q+ i rodzaj testu Zearalenone.
3. Wprowadzić numer próbki ID (opcjonalne).
4. Wprowadzić numer serii testu (lot number), wartości A,B,C,D, z opakowania testu lub wybrać
z historii (History) wcześniej wprowadzone dane.
Przygotowanie i ekstrakcja próbek KUKURYDZA
Badane próbki powinny być pobrane zgodnie z zasadami przy pobieraniu próbek reprezentatywnych.
1. Jeżeli nie stosuje się gotowego roztworu Neogen, przygotować 65% roztwór etanolu poprzez
zmieszanie 6,5 części etanolu z 3,5 części wody destylowanej lub dejonizowanej.
2. Uzyskać próbkę reprezentatywną. Zmielić pobraną próbkę do takiego stopnia, aby
co najmniej 75% zmielonego materiału przechodziło przez sito o 20 mesh, tj. miało wygląd
dobrze zmielonej kawy instant.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
3. Ekstrakcję prowadzić w stosunku: 1 część próbki do 3 części 65% roztworu etanolu. Na
przykład, do 10 gramów próbki dodać 30 ml 65% roztworu etanolu. Energicznie wytrząsać
przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym przez 1 minutę.
ALTERNATYWNIE: (W metodzie USDA/GIPSA) Zmieszać 50 gramów próbki ze 150 ml 65%
roztworu etanolu
i wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym
przez 1 minutę.
4. Pozostawić próbkę do odstania, a następnie przefiltrować co najmniej 5ml przez strzykawę
filtrującą lub przez filtr papierowy Whatman Nr.1 i zebrać filtrat.
Przygotowanie i ekstrakcja próbek PSZENICA
Badane próbki powinny być pobrane zgodnie z zasadami przy pobieraniu próbek reprezentatywnych.
1. Jeżeli nie stosuje się gotowego roztworu Neogen, przygotować 65% roztwór etanolu poprzez
zmieszanie 6,5 części etanolu z 3,5 części wody destylowanej lub dejonizowanej.
2. Uzyskać próbkę reprezentatywną. Zmielić pobraną próbkę do takiego stopnia, aby
co najmniej 75% zmielonego materiału przechodziło przez sito o 20 mesh, tj. miało wygląd
dobrze zmielonej kawy instant.
3. Ekstrakcję prowadzić w stosunku: 1 część próbki do 5 części 65% roztworu etanolu. Na
przykład, do 10 gramów próbki dodać 50 ml 65% roztworu etanolu. Energicznie wytrząsać
przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym przez 1 minutę.
ALTERNATYWNIE: (W metodzie USDA/GIPSA) Zmieszać 50 gramów próbki ze 250 ml 65%
roztworu etanolu
i wytrząsać przez 3 minuty lub mieszać w mieszalniku szybkoobrotowym
przez 1 minutę.
4. Pozostawić próbkę do odstania, a następnie przefiltrować co najmniej 5ml przez strzykawę
filtrującą lub przez filtr papierowy Whatman Nr.1 i zebrać filtrat.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Procedura wykonania testu
1. Wyjąć niezbędną ilość czerwonych probówek do rozcieńczeń i przezroczystych probówek na
próbki. Umieścić je w stojaku.
2. Przy użyciu pipety i nowej końcówki wprowadzić po 200l rozcieńczalnika do próbek do
każdej probówki oznaczonej na czerwono.
3. Stosując nową końcówkę pipety do każdej próbki wprowadzić po 100l przefiltrowanych
ekstraktów badanych próbek do każdej czerwonej probówki z rozcieńczalnikiem. Mieszać
poprzez 5 krotne pipetowanie w górę i w dół.
4. Przenieść po 100l rozcieńczonego ekstraktu próbek do czystych przezroczystych probówek.
5. W każdej probówce umieścić pasek testowy Reveal Q+ Zearalenon, końcówką oznakowaną
„sample” do dołu. Pozostawić pasek testowy w próbce przez 6 minut.
6. Wyjąć pasek z próbówki po upływie czasu 6 minut.
Odczyt wyników na czytniku Reveal AccuScan
Testy powinny być odczytane w ciągu 1 minuty od zakończenia 6 minutowej inkubacji.
Aby uzyskać dodatkowe informacje na temat ustawień należy udać się do Reveal AccuScan III Set
Up.
1. Umieścić dokładnie pasek testowy Reveal Q+ w czarnym adapterze, najpierw strona
„sample”, stroną z rezultatami skierowanymi na zewnątrz.
2. Umieścić adapter z testem, górną stroną skierowany w dół, w czytniku (linie testowe będą
skierowane w dół czytnika). Po włożeniu adaptera zaświeci się zielone światełko czytnik
rozpocznie automatycznie analizę testu. UWAGA: usunięcie adaptera z czytnika w trakcie
odczytu może prowadzić do niewłaściwych odczytów.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
3. Czytnik AccuScan III przeanalizuje pasek testowy a uzyskane rezultaty zostaną wyświetlone
na ekranie oraz zapisane w pamięci czytnika.
Uwagi
1. Należy upewnić się, że pasek testowy jest właściwie (całkowicie) umieszczony w adapterze.
2. Odczyty powinny być wykonane pomiędzy 6 a 7 minutą. Odczyty dokonane po czasie
przekraczającym 7 minut mogą być niedokładne z powodu nadmiernego rozwinięcia paska
testowego.
3. Pasek testowy musi być odczytywany w czytniku Reveal AccuScan III Reader.
Charakterystyka testu
1. Limit detekcji:

Krzywa kukurydzy: 50 ppb

Krzywa przenicy: 25 ppb
2. Zakres pomiarowy krzywa kukurydzy i pszenicy: 50-1200 ppb
UWAGA: aby oznaczyć zawartość Zearalenonu na poziomie przekraczającym 1200 ppb należy
skontaktować się z serwisem technicznym.
Zwalidowane matryce
Curve 1 set: kukurydza
Curve 2 set: pszenica
UWAGA: Neogen stale prowadzi walidację dla kolejnych produktów. W celu uzyskania aktualizacji
prosimy o kontakt z firmą Noack Polen Sp. z o.o.
Serwis klienta
Noack Polen Sp. z o.o., ul. Królowej Marysieńki 50, 02-954 Warszawa, Tel. 22 853 45 80, fax. 22 853
77 26, [email protected]
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]
Reveal Q+ for Zearalenone
Dostępne informacje MSDS
Materiały dotyczące bezpieczeństwa dla tego testu i wszystkich testów Neogenu są dostępne na
stronie www.neogen.com/msds.html.
Gwarancja
Neogen nie daje żadnych gwarancji na żaden sposób, również wykorzystania lub wprowadzania, z
wyjątkiem materiału, z którego produkty są wykonane, które mają standardową jakość. Jeżeli
jakiekolwiek materiały są wadliwe, Neogen dostarczy produkt zastępczy. Kupujący ponosi całkowite
ryzyko i odpowiedzialność za wyniki wynikające z użycia tego produktu. Nie ma gwarancji
sprzedawalności tego produktu, zdolności użytkowej do różnych celów. Neogen nie powinien być
odpowiedzialny za żadne uszkodzenia, włączając specjalne lub wynikające, lub koszty wynikające
bezpośrednio lub pośrednio ze stosowania produktu.
Diagnostyka Rolno-Spożywcza
Sprzedaż i Serwis : +48 22 853 45 80/76
[email protected]