PASKI DO TESTU PYR
Transkrypt
PASKI DO TESTU PYR
PASKI DO TESTU PYR MAST ID 181807. Szybki test paskowy do wstępnej identyfikacji Streptococcus pyogenes i Enterococcus spp. TYLKO DO DIAGNOSTYKI IN VITRO ZAWARTOŚĆ 25 pasków w opakowaniu ZASADA TESTU Zarówno Enterococcus spp., jak i Streptococcus pyogenes (paciorkowce z grupy A wg Lancefield) często izoluje się z materiałów klinicznych. W celu rozpoczęcia skutecznej terapii decydująca jest szybka identyfikacja tych drobnoustrojów patogennych. Godsey i wsp. opisali w 1981 kolorymetryczny test na hydrolizę L-pirolidonylo-b-naftylaminy (PYR), pozwalający na wstępną identyfikację paciorkowców i enterokoków. Testy z użyciem chromogennych i fluorogennych substratów są szybsze w porównaniu do testów tradycyjnych. Dlatego MAST opracował ekonomiczny i szybki test na hydrolizę PYR, który daje wynik w ciągu 10 min. Dodatkowe badania wykazały, że hydroliza PYR przez aminopeptydazę pirolidonylową jest swoista dla enterokoków i S. pyogenes. Nieporęczne testy wrażliwości na bacytracynę i tolerancji na 6,5% NaCl do identyfikacji S. pyogenes i enterokoków można zastąpić przez wygodny test PYR. Dalsze różnicowanie S. pyogenes, enterokoków i enterokoków nie należących do grupy D można przeprowadzić przy pomocy pasków identyfikacyjnych z eskuliną MAST ID™ (Nr kat. 181806). Poleca się używanie tych pasków w kombinacji z zestawem lateksowym do typowania paciorkowców. OPIS TESTU Paski bibułowe z nadrukiem identyfikacyjnym, polami dla kontroli dodatniej i kontroli ujemnej. Paski są nasączone L-pirolidonylo-β-naftylamidem. Sposób użycia 1. Używając jałową igiełkę lub pęsetkę umieścić pasek intralaktamowy MAST ID ™ na odpowiedniej powierzchni, tj. na czystym szkiełku podstawowym lub w pustej płytce Petriego. 2. Aseptycznie dodać małą kroplę jałowej dejonizowanej lub destylowanej wody na każdą powierzchnię paska. Bibuła musi być zwilżona, ale nie nasączona. 3. Używając czystą, świeżą hodowlę badanego drobnoustroju, pobrać kilka kolonii używając albo patyczka, albo ezę i wetrzeć w powierzchnię testową paska. 4. Inkubować w 35 - 37°C przez 5 minut. 5. Nanieść ok. 10 µl odczynnika DMACA (przygotowanego jak niżej) na każde pole z badanym szczepem. 6. Rozpuścić 1 g 4-(dwumetyloamino) cynamaldehydu (DMACA), Sigma D4506, w 100 ml 10% v/v roztworu kwasu solnego. Roztwór można przechowywać do 2 miesięcy w temperaturze pokojowej w ciemnym miejscu. Odczynnik DMACA został sklasyfikowany jako drażniący. 7. Obserwować każdą zmianę zabarwienia zachodzącą w ciącu 30 sekund. Interpretacja wyników Dodatni – barwa różowo-fioletowa. Ujemny – brak zmiany barwy. Ograniczenia Zaleca się wykonanie testów biochemicznych i/lub serologicznych dla kolonii z czystej hodowli w celu potwierdzenia identyfikacji (np. test lateksowy). Bakterie inne niż paciorkowce lub enterokoki, np. pewne Klebsiella spp., mogą być PYR – dodatnie. Można badać tym testem tylko katalazo – ujemne, Gram – dodatnie ziarniaki. Pewna część paciorkowców z grupy A nie hydrolizuje PYR. Pewne nie-enterokokowe paciorkowce z grupy D mogą być PYR – dodatnie. Przechowywanie i termin ważności Przechowywać w 2 - 8°C w dostarczonych pojemnikach do daty ważności podanej na etykiecie na opakowaniu. Pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem. Zawartość: 25 pasków, nr katalogowy 181807. Literatura 1. Godsey J.R., Schulman R., Eriquez L. The hydrolysyisof L-pyrrolidonyl-b-naphtylamide as an aid in the rapid identification of Streptococcus pyogenes, S. avium and group D enterococci. Abstracta of the Annual meeting of the ASM 1981; abstract C-84. 2. Kaufholf A., Luttiken R., Schwein U. Few-minutes test for the identification of Group A streptococci and enterococci with chromogenic substrates. Zbl. Bakt. 1989; 272: 191-195. 3. Facklam R.R., Thacker L.G., Fox B., Eriquez L. Presumptive identification of streptococci with a new test system. J. Clin. Microbiol. 1982; 15: 191-195.