SPRAWOZDANIE
Transkrypt
SPRAWOZDANIE
SPRAWOZDANIE ETAPOWE [ROCZNE] Z REALIZOWANEJ PRACY NAUKOWO-BADAWCZEJ w roku 2009 Tytuł: Otrzymywanie populacji homozygotycznych roślin buraka ćwikłowego z zastosowaniem embriogenezy gametycznej Wykonawcy: prof. dr hab. Krystyna Górecka dr Dorota Krzyżanowska mgr Waldemar Kiszczak mgr Urszula Kowalska Celem tegorocznych doświadczeń było zbadanie wpływu wybranych czynników na proces androgenezy i gynogenezy. Pracowano też nad regeneracją roślin z zarodków otrzymanych z mikrospor i zalążków. Badano też stadia rozwojowe woreczka zalążkowego w pąkach różnej długości. Traktowanie pąków kwiatowych 70% etanolem przez 2 min. a potem 0.1% HgCl2 z 0.1 % Tweenem przez 8 min. okazało się dobrym sposobem sterylizacji powierzchniowej dla kultur pylnikowych i kultur zalążków, a dla kultur izolowanych mikrospor oba zastosowane sposoby: 70% etanolem przez 10 min. jak i uprzednie traktowanie pąków płynem Bode Sterillum przez 1,5 min. Efektywność embriogenezy w kulturach pylnikowych i kulturach zalążków zależała od genotypu. Chłodzenie roślin donorowych w ciemnej chłodni wpłynęło na zaindukowanie tworzenia się zarodków w kulturach pylnikowych. Prekultura według Hoekstry i in. (1997) spowodowała bardzo liczne zakażenia. Prekultura według SeguiSimmaro (2007) nie wpłynęła na powstawanie zarodków. Najlepszą pożywką do indukcji androgenezy w kulturach pylnikowych okazała się pożywka N6 ze 100g sacharozy, 0.2mg BA i 0.5mg IAA na litr. W kulturach izolowanych mikrospor wywołano powstawanie struktur wielokomórkowych. Stosowanie amylazy nie spowodowało wytwarzania embrioidów w kulturach pylnikowych, ani podziałów komórek w kulturach izolowanych mikrospor. W kulturach zalążków najwięcej zarodków otrzymano pąków kwiatowych o długości 2,5 mm. Najlepszą pożywką do indukcji gynogenezy była B5 ze 100g sacharozy i 0,1 mg 2.4-D w litrze. Z embrioidów uzyskanych w kulturach pylnikowych jak dotąd nie uzyskano roślin. Zarodki uzyskane w kulturach zalążków wytwarzały bardzo intensywnie pędy na pożywkach do regeneracji. Długość pąka kwiatowego jest dobrym zewnętrznym wskaźnikiem stadium rozwoju zalążka.