Alpha-2-Macroglobulin - Serum Application Note

Cystatyna C
Olympus AU 640
Instrukcja użytkowania
Wskazówki dla oznaczania
Cystatyny C w surowicy/osoczu
z wykorzystaniem Olympus AU 640
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Instrukcja użytkowania opisuje ilościowe oznaczanie cystatyny C w próbce materiału ludzkiego poprzez pomiar
zmętnienia z zastosowaniem aparatu Olympus AU 640 (1, 2).
Zakres pomiaru
Około 0,4-8,0 mg/L, zależnie od danej partii kalibratorów.
Zakres wartości
prawidłowych
Dla osób w wieku 1-50 lat: 0,55-1,15 mg/L.
Dla osób w wieku powyżej 50 lat: 0,63-1,44 mg/L.
Zaleca się ustalenie zakresu wartości prawidłowych dla lokalnej populacji.
Ustawienia automatu
Programowanie automatu odbywa się zgodnie z punktem „Ustawienia automatu” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor do
przeprowadzania reakcji
Kalibrator
Kontrole
Rozcieńczalnik
Nr kat.
LX 002
S 2361
Nazwa
DakoCytomation Cystatin C Immunoparticles
DakoCytomation Reaction Buffer 9
X 0974
X 0973
DakoCytomation Cystatin C Calibrator
DakoCytomation Cystatin C Control Set
Roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9% wag/obj)
Próbki
Ludzka surowica, osocze z heparyną lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 2 dni w temperaturze 2-8 oC.
Stabilne przynajmniej przez 3 miesiące w temperaturze –20 oC.
Zamrożone próbki najlepiej rozmrażać w temperaturze 37 oC oraz dobrze wymieszać przed badaniem.
Kalibrator
DakoCytomation Cystatin C Calibrator, nr kat. X 0974, jest rozcieńczany ręcznie przy zastosowaniu następującej serii
rozcieńczeń.
Wzorzec
Nr (i)
Roz.std. (1)
Roz.std. (2)
Roz.std. (3)
Roz.std. (4)
Roz.std. (5)
Roz.std. (6)
X 0974
µL
[
[
[
[
[
[
25
50
100
150
200
350
NaCl
µL
]
]
]
]
]
]
[
[
[
[
[
[
450
450
300
200
130
0
f(i)
]
]
]
]
]
]
f(1)
f(2)
f(3)
f(4)
f(5)
f(6)
Współczynnik stęż.
0,0526
0,1000
0,2500
0,4286
0,6061
1,0000
Stężenie C(i)
[0,0526 x C(Cal)
[0,1000 x C(Cal)
[0,2500 x C(Cal)
[0,4286 x C(Cal)
[0,6061 x C(Cal)
[1,0000 x C(Cal)
]
]
]
]
]
]
Stężenie cystatyny w standardach (C(i)) (mg/L) jest obliczane na podstawie stężenia cystatyny C (C(Cal)) (mg/L)
podanego dla określonej partii kalibratora (X 0974) i współczynnika stężenia względnego (f(i)) przez ich pomnożenie,
tj. C(i) = f(i) x C(Cal) . Dokładna wartość C(Cal) dla danej partii podana jest w arkuszu wartości analitycznych.
Bufor do
przeprowadzania reakcji
Bufor do przeprowadzania reakcji jest gotowy do użycia. Stabilność po umieszczeniu w urządzeniu wynosi 8 tygodni.
Przeciwciało
Roztwór immunocząsteczek jest gotowy do zastosowania.
Stabilny w temperaturze 2-8°C: Patrz arkusz specyfikacji i data ważności na etykiecie.
Stabilność po umieszczeniu w urządzeniu wynosi 8 tygodni.
Wydajność: 1 mL roztworu immunocząsteczek odpowiada około 18 odczytom kuwet z wzorcem lub próbką. Przy
obliczaniu wymaganej ilości odczynnika należy dodać martwą objętość butelki z odczynnikiem.
Stabilność kalibracji
Zaleca się ponowne wykonywanie kalibracji co 8 tygodni, przy zmianie partii odczynników lub otrzymaniu wyników
kontroli jakości nie mieszczących się w zakresie ustalonym przez dane laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli otrzymane wyniki są nie do zaakceptowania należy przeprowadzić ponowną kalibrację aparatu. Należy
sprawdzić odczynniki i procedurę. Jeśli problem nadal występuje, należy skontaktować się z dostawcą aparatury
lub z Działem Pomocy Technicznej firmy DakoCytomation.
(109361-001)
30 198.LX002.01/PL/SUM/06.04.04 s. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
Olympus AU 640
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) wynosząca około 0,31 w przypadku urządzenia Olympus AU 640 odpowiada stężeniu
cystatyny C wynoszącemu około 8,2 mg/L.
Próg wykrywalności
Próg wykrywalności ocenia się na 0,028 mg/L.
Precyzja
Precyzję oszacowano dokonując analizy ANOVA wyników oznaczenia cystatyny C w 2 różnych stężeniach dokonanych
w czasie 3 cykli oznaczeń, z których dla każdego dokonano nowej kalibracji i w każdym wykonano 3 oznaczenia.
Cystatyna
C
Próbki
Cystatin C Control
1, Nr kat. X 0973
Cystatin C Control
2, Nr kat. X 0973
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Wartość
średnia
(mg/L)
W zakresie
jednego
badania
Między
poszczególnymi
cyklami
oznaczeń
4,53
0,037
1,06
0,013
Łącznie
Łącznie
Współczynnik
Wariancji (%)
n
0,008
0,038
0,8
9
0,011
0,017
1,6
9
Dokładność
Przy zastosowaniu DakoCytomation Cystatin C Control 1, nr kat. X 0973 i DakoCytomation Cystatin C Control 2, nr kat.
X 0973 spodziewany odzysk cystatyny C wynosi 85–115%.
Liniowość
Metoda jest liniowa w zakresie 0,4-8,0 mg/L (najwyższe badane stężenie).
Zakres bezpieczeństwa
Nadmiaru antygenu nie stwierdzono przy stężeniach cystatyny C poniżej 23 mg/L (najwyższe badane stężenie).
Zakłócenie
Nie stwierdzono zakłócenia wyników w warunkach, gdy stężenie hemoglobiny wynosiło do 10 g/L, bilirubiny do
600 mg/L, trójglicerydów do 15 g/L, intralipidu do 10g/L i czynnika reumatoidalnego do 1200 IU/mL.
Wszystkie leki opisane w 3. pozycji piśmiennictwa oceniano zgodnie z zaleceniami z 3. pozycji piśmiennictwa. Nie
odnotowano żadnego ich wpływu na wyniki.
Porównanie metod
Oznaczenie cystatyny C zgodnie z niniejszą Instrukcją obsługi zostało porównane z dostępnymi na rynku metodami
turbidymetrycznymi. Dane są dostępne na żądanie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: method optimization. Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001; 39:1098-109.
2. Podręcznik obsługi Olympus AU 640.
3. Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001 38: 376-85.
(109361-001)
30 198.LX002.01/PL/SUM/06.04.04 s. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
Olympus AU 640
Ustawienia automatu
Specific test parameters
Test no
#
∇
2.5
230
50
Dil. vol
Dil. vol
Dil.vol
Main
540
Sub
Fst
Fst
12
0
Lst
Lst
Sample vol.
Reagent 1 vol
Reagent 2 vol
Wave
Method
Reaction
Point 1
Point 2
Cyst C
Test name
Ser
Sample type
0
0
10
µL
µL
µL
none
FIXED
+
27
0
∇
∇
∇
∇
Max. OD
H
Min. OD
-2
L
Reagent OD limit
#
Fst. L
#
Lst L
Dynamic range
Std. 1
L
Correlation factor
Sample Pre-dil.
Linearity
No lag time
Fst
%
Sec
%
∇
no
1/2
Page
2.5
Fst. H
Lst. H
#
#
H
A
B
Rate
Std. 6
1
0
0
On-board stability period
Select using Space key, or select from list, displayed by Guide key
Test no
#
Cyst C
Test name
Value/flag
Normal range
Sex
#
1
∇
#
2
∇
#
3
∇
#
4
∇
#
5
∇
#
6
∇
7
Non select
8
Out of range
Age
Y
Y
Y
Y
Y
Y
#
#
#
#
#
#
∇
#
∇
#
#
#
#
#
#
M
M
M
M
M
M
Ser
Sample type
L
Age
#
#
#
#
#
#
∇
2/2
Page
Level L
#
Level H
#
#
#
#
#
#
#
#
#
L
#
#
#
#
#
#
#
#
#
H
#
H
Y
Y
Y
Y
Y
Y
#
#
#
#
#
#
M→
M→
M→
M→
M→
M→
Panic value
Select the function using the Function key of the Mouse
Calibration specific
Test no
Cal type
Formula
Selection calibrator
#
Name
15
3
Cal no
#
#
#
#
#
#
Point 1
Point 2
Point 3
Point 4
Point 5
Point 6
Point 7
1-point cal. point
MB type factor
Calibrator stability period
Cyst C
∇
6AB
∇
POLYGONAL
OD
∇
∇
∇
∇
∇
∇
∇
Count
Process
2
Conc
Factor/OD-L
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
0.0000
Factor/OD-H
2.0000
2.0000
2.0000
2.0000
2.0000
2.0000
2.0000
∇
Conc
†
†
†
†
†
†
∇
28
Select the function using the Fucnction key or the Mouse
#
†
(109361-001)
User defined
Conc of the 6 standards obtained by dilution of the DakoCytomation Cystatin C Calibrator, code No. X 0974
30 198.LX002.01/PL/SUM/06.04.04 s. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17