Badanie zmian ekspresji genów podczas immunoterapii swoistej

Badanie zmian ekspresji genów podczas
immunoterapii swoistej pacjentów uczulonych
na pyłki traw
Jan Romantowski, Karol Kempiński, Anna Maciejewska, Ewa Jassem, Marek Niedoszytko
Klinika Alergologii Gdański Uniwersytet Medyczny
Wprowadzenie
Alergia na pyłki traw jest powszechnie występującą reakcją nadwrażliwości będącą istotnym czynnikiem
wywołującym objawy astmy, alergicznego nieżytu nosa i spojówek i innych chorób alergicznych. Immunoterapia
jest jedyną przyczynową metodą leczenia alergii na pyłki traw. Mechanizm działania tej metody leczenia nie
został jednak w pełni poznany. Badania ekspresji RNA – nowe narzędzie w alergologii mogą przybliżyć do
poznania tych mechanizmów.
Cel
Celem pracy jest określenie genów, których ekspresja ulega zmianie w trakcie immunoterapii alergenowej
pyłkiem traw.
Metodologia
Dotychczas do badania włączono 7 chorych poddawanych swoistej immunoterapii z powodu alergii na pyłki traw.
Pobrano krew żylną celem analizy ekspresji genów przed (próbka A) i po osiągnięciu dawki podtrzymującej (B).
Materiał uzupełniono 7 próbkami grupy kontrolnej z ujemnym wywiadem alergicznym. Wyizolowano RNA,
następnie przeprowadzono RT- PCR z użyciem kart mikrocieczowych z nałożonymi sondami specyficznymi do
wybranych 15 genów. Wyniki znormalizowano do ekspresji 18s rRNA. Porównanie zmiany ekspresji genów w
grupie pacjentów wykonano testem Wilcoxona. W przypadku porównań z grupą kontrolną stosowano test U
Manna-Whitney’a.
Wyniki
Wśród pacjentów 100% stanowili mężczyźni. W grupie kontrolnej 4 mężczyzn i 3 kobiety. Różnica między
pobraniem próbki A i B wynosiła od 59 do 132 dni (średnio 96dni). W ekspresji genów wykazano istotną zmianę
ekspresji genu AFAP1L1 w grupie badanej (p=0,04). W porównaniach pozostałych genów a także z grupą
kontrolną nie wykazano istotnych statystycznie różnic.
Wnioski
Ekspresja genu AFAP1L1 zmienia się istotnie po rozpoczęciu immunoterapii z powodu alergii na pyłki traw.
Konieczne są dalsze badania w większej grupie chorych.