Alpha-2-Macroglobulin - Serum Application Note

Antytrombina III,
Ogólna nota aplikacyjna
Instrukcja użytkowania
Ogólne wytyczne dla oznaczania
antytrombiny III w osoczu
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Niniejsza instrukcja użytkowania dotyczy ilościowego oznaczania antytrombiny III w materiale pochodzenia ludzkiego z
użyciem urządzeń, dla których nie istnieje żadna specyficzna instrukcja obsługi (1). Urządzenie wybrane przez klienta
powinno mieć stosowne zatwierdzenie do dokonywania oznaczeń.
Zakres pomiaru
Około 0,10-0,50 g/L, zależnie od danej partii kalibratorów. W przypadku dokonania zagęszczenia lub rozcieńczenia
materiału zakres ten może być poszerzony.
Zakres wartości
prawidłowych
0,21-0,30 g/L (2). Zaleca się ustalenie zakresu wartości prawidłowych dla lokalnej populacji.
Ustawienia automatu
Instrukcje dotyczące programowania urządzenia przedstawiono w części “Sugestie ustawień urządzenia...”
znajdującej się na stronie 3.
Odczynniki
Nr kat.
Przeciwciało
Q 0103
S 2007
Bufor do
przeprowadzania reakcji
S 2005
Rozcieńczalnik
OUID
Kalibrator
OWSY
Kontrola
Nazwa
DakoCytomation Polyclonal Rabbit Anti-Human Antithrombin III
DakoCytomation Reaction Buffer 1
DakoCytomation Dilution Buffer 1
Dade Behring N Protein Standard PY
Dade Behring N/T Protein Standard PY
Próbki
Ludzkie osocze z heparyną lub osocze z EDTA. Stężenie w ludzkiej surowicy jest około 10% niższe.
Stabilne przez 7 dni w temperaturze 2-8 oC.
Kalibrator
Rozcieńczenie roztworów standardowych jest automatycznie dokonywane przez urządzenie, zgodnie z jego
wskazaniami lub jest dokonywane ręcznie.
Bufor do
prowadzenia reakcji
Bufor reakcji jest gotowy do użycia. Stabilność po umieszczeniu w urządzeniu wynosi 28 dni w temperaturze 2-12 °C.
Przeciwciało
Wstępnie rozcieńczyć przeciwciało zgodnie z końcowym ustawieniem.
Jeśli w rzadkich przypadkach stwierdza się nieznaczne zmętnienie wstępnie rozcieńczonego przeciwciała, zaleca się
przefiltrowanie roztworu przez filtr membranowy o średnicy porów 0,22 µm.
Stabilność nierozcieńczonego roztworu przeciwciała: Patrz data ważności na etykiecie.
Stabilność wstępnie rozcieńczonego przeciwciała: 28 dni w temperaturze 2-8 °C.
Stabilność po umieszczeniu w urządzeniu: 28 dni w temperaturze 2-12 °C.
Wydajność: 1 mL wstępnie rozcieńczonego roztworu przeciwciała odpowiada około 10 odczytom kuwet z wzorcem lub
badanym materiałem przy użyciu 100 µL rozcieńczonego roztworu przeciwciała na oznaczenie. Przy obliczaniu
wymaganej ilości odczynnika należy wziąć pod uwagę martwą objętość butelki z odczynnikiem.
Stabilność kalibracji
Zaleca się dokonywanie ponownej kalibracji co 28 dni lub gdy zmienia się numer partii używanych odczynników, gdy
przygotuje się nowy roztwór przeciwciała, gdy roztwór przeciwciała podda się filtracji lub wyniki oceny kontroli jakości
oznaczeń znajdują się poza ustalonymi dla danego laboratorium wartościami. Niemniej jednak, stabilność kalibracji
powinna być zatwierdzana dla każdego urządzenia.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli otrzymane wyniki są nie do zaakceptowania należy przeprowadzić ponowną kalibrację aparatu. Należy
sprawdzić odczynniki i procedurę. Jeśli problem nadal występuje, należy skontaktować się z dostawcą aparatury
lub z Działem Pomocy Technicznej firmy DakoCytomation.
(109364-001)
30 134.Q0103.01/PL/AHA/24.03.04 s. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Antytrombina III,
Ogólna nota aplikacyjna
Przykład danych podczas dokonywania oznaczenia z u życiem urządzenia Hitachi 911
Czułość
Wartość OD wynosząca około 0,31 w przypadku urządzenia Hitachi 911 odpowiada stężeniu antytrombiny III
wynoszącemu około 0,5 g/L.
Próg wykrywalności
Próg wykrywalności określa się na 0,025 g/L.
Precyzja
Precyzję podczas badania oceniono na 1,3% przy stężeniu 0,23 g/L antytrombiny III.
Dokładność
Przy zastosowaniu Dade Behring N/T Protein Control PY, nr kat. OWSY, można oczekiwać odzysku antytrombiny III
wynoszącego 90-110%.
Liniowość
Metoda jest liniowa w zakresie 0,10-0,60 g/L.
Zakres bezpieczeństwa
Nadmiaru antygenu nie stwierdzono przy stężeniach antytrombiny III do 1,9 g/L (najwyższe badane stężenie).
Zakłócenie
Nie stwierdzono zakłócenia przy stężeniach hemoglobiny do 5 g/L i bilirubiny do 600 mg/L. Trójglicerydy powodują
zakłócenia.
Wszystkie leki opisane w 3. pozycji piśmiennictwa oceniano zgodnie z zaleceniami z 3. pozycji piśmiennictwa. Nie
odnotowano żadnego ich wpływu na wyniki, poza intralipidem.
Porównanie metod
Oznaczenie antytrombiny III zgodnie z niniejszą Instrukcją obsługi zostało porównane z dostępnymi na rynku
metodami turbidymetrycznymi. Dane są dostępne na żądanie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001; 39:1098–1109.
2. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1995 p. 64-7.
3.
(109364-001)
Sonntag O, Scholer A. Drug interference in clinical chemistry: recommendation of drugs and their
concentrations to be used in drug interference studies. Ann Clin Biochem 2001; 38:376–85.
30 134.Q0103.01/PL/AHA/24.03.04 s. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Antytrombina III,
Ogólna nota aplikacyjna
Sugestie ustawień automatu dla antytrombiny III w ludzkiej surowicy
* Wskaźnik
Sugestia
Ścieżka światła (mm)
Czas inkubacji (s)
Rozcieńczenie próbki (współczynnik rozcieńczenia)
Objętość próbki rozcieńczonej wstępnie (µL)
Objętość próbki (µL) (=bez rozcieńczania)
Rozcieńczalnik+roztwór płuczący (dla: próbka+odczynnik)
(Objętość
L)
buforu reakcji (µL)
Stężenie glikolu polietylenowego (PEG) w buforze reakcji (%)
Stężenie PEG w objętości inkubacji (%)
Objętośc inkubacji (µL)
Rozcieńczenie przeciwciała (współczynnik rozcieńczenia
przeciwciała)
Objętość rozcieńczonego przeciwciała (µL)
Objętość przeciwciała (µL) (=bez rozcieńczania)
Rozcieńczalnik+roztwór płuczący (dla: przeciwciało) (µL)
Objętość całkowita (µL)
Czas reakcji (s)
Całkowity czas analizy (s)
10
120
5
100
20
50
600
5
4,0
750
4,5
100
44
150
1000
300
420
Współczynnik
Objetośbjpróbki (czysta)
Objetośbjprzeciwciała (czysta)
0,45
[0,44 – 0,45]
Zależność
PEG - stętę objębjink.(%) * Objębjpróbki(czysta)
Objębjętoink.
Objębjętoprzeciwcia ła (czysta)
Łączna objębjęt
0,11
[0,08 – 0,12]
Stężenie PEG w objętości całkowitej (%)
3,0
Współczynnik
Roztwory standardowe
Roz. std. 1 (największe stężenie)
Roz. std. 2
Roz. std. 3
Roz. std. 4
Roz. std. 5
Roz. std. 6 (najmniejsze stężenie)
*
0,020
Współczynnik
rozcieńczenia:
2,50
3,33
5,00
6,67
10,00
20,00
[0,020 – 0,024]
[2,8 – 3,4]
fi względny
współczynnik stężenia
2,00
1,50
1,00
0,75
0,50
0,25
Dalsze informacje dotyczące poszczególnych wskaźników można znaleźć w dokumencie „Wprowadzenie do ogólnych instrukcji obsługi dla
produktów DakoCytomation”, zamówienie nr 30134.Intro, który jest dostępny na żądanie lub na stronie internetowej:
www.DakoCytomation.com.
[ ] Oznacza zakres wartości możliwych do przyjęcia, uzyskany na różnych urządzeniach.
fi
jest współczynnikiem stężenia względnego, używanym do obliczania stężenia względnego antytrombiny III (RC(i)) w roztworach standardowych
pochodzących z poszczególnych partii kalibratora (C(Cal)); RC(i) = fi x C(Cal) .
(109364-001)
30 134.Q0103.01/PL/AHA/24.03.04 s. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17