Pobierz opis

Joanna Biegaj-Fic
Katedra i Klinika Położnictwa i Patologii Ciąży Uniwersytetu Medycznego w Lublinie
ul. Staszica 16, 20-081 Lublin
E-mail: [email protected]
Częstość występowania Leptotrichii amnionii sp. nov. oraz wybranych
infekcji wirusowych ( HPV, HSV-2, CMV) u kobiet ciężarnych.
Zakończenie ciąży przed terminem dotyczy 6-15% wszystkich
ciężarnych. Następstwa tego, zarówno krótko- jak i długotrwałe pod
postacią umieralności, zachorowalności oraz trwałego kalectwa dzieci są
jednym z najtrudniejszych problemów w perinatologii. Wśród licznych
przyczyn nieprawidłowego przebiegu ciąży jednym z najmniej zbadanych są
infekcje bakteryjne beztlenowcowe oraz infekcje wirusem brodawczaka
ludzkiego u ciężarnych. Efektem działania wirusów i beztlenowców na
płód mogą być poronienie, obumarcie płodu, wady anatomiczne lub
zaburzenia wzrastania. Do największych uszkodzeń dochodzi w okresie
organogenezy. Zakażenie może wywierać wpływ swoisty zależny od
czynnika wirusowego, bądź nieswoisty. Zazwyczaj w przypadku wiremii u
matki wirus dostaje się do łożyska i osiąga krążenie płodowe. W okresie
płodowym w miarę postępu różnicowania się układów i narządów maleje
wrażliwość płodów na teratogenne działanie wirusów. Czynniki zakaźne
zazwyczaj mają działanie letalne. Wpływają na rozwój płodu tuż po
zapłodnieniu zarówno poprzez hamowanie podziałów mitotycznych (z
następową zmianą wzrostu komórek) jak i oddziałują cytotoksycznie.
Ponadto zapalenie rozwijające się w odpowiedzi na zakażenie może
powodować powstanie blizn lub zwapnień, zaburzając histogenezę, co
wpływa na dalsze uszkodzenie płodu
Pomimo ustalenia udziału czynników zakaźnych w nieprawidłowym
przebiegu ciąży oraz wprowadzeniu nowych technik badawczych (PCR)
wskazania do badań przesiewowych ciężarnych nie są jednoznacznie
określone. Badania prowadzone w latach 70-tych pozwoliły na ustalenie
częstości występowania wad wrodzonych w przebiegu różnych infekcji u
ciężarnych. Nadal jednak częstość infekcji wirusowych, a szczególnie HPV
występujących w określonych patologiach jaja płodowego nie jest znana.
Niewyjaśnionym pozostaje problem skali aktywnego zakażenia wirusami
ocenianego bezpośrednio metodą PCR (a nie pośrednio przez wykrywanie
przeciwciał) i jego znaczenia w przedwczesnym zakończeniu ciąży.
Celem pracy jest ocena obecności beztlenowców Leptotrichia amnioni sp.
nov. oraz wybranych infekcji wirusowych: HPV, CMV, HSV2 u ciężarnych
z ciążą o nieprawidłowym przebiegu lub powikłanych patologią jaja
płodowego (małowodzie, wielowodzie, wada płodu). Cel pracy
realizowany będzie poprzez ocenę występowania DNA Leptorichia
amnioni sp. nov. i DNA HPV, CMV, HSV2 w wymazach z pochwy kobiet
podczas rutynowego badania.
Metodyka przeprowadzania badań, jaka jest użyta w pracy doktorskiej
należy do najnowocześniejszych metod wykrywania ww. wirusów i bakterii.
Jest to w chwili obecnej najbardziej skuteczna metoda wykrywania,
charakteryzująca się największą czułością w identyfikacji występowania
wirusów i bakterii. Dotychczasowa weryfikacja wirusa nie była
wystarczająco skuteczna, dopiero zastosowana w pracy badawczej
innowacja polegająca na analizie materiału genetycznego z DNA pozwala na
znaczne wyeliminowanie ryzyka popełnienia błędu przy ocenie. PCR jest
metodą bardzo specyficzną ze względu na dużą dokładność hybrydyzacji w
wysokiej temperaturze; jedynym DNA, który ulega amplifikacji, jest
odcinek zawarty pomiędzy parą primerów zhybrydyzowanych z
wyjściowym DNA; dzięki tej metodzie stosunkowo łatwa stała się analiza
genów, z których każdy stanowi mniej niż milionową część całkowitego
DNA organizmu wyższego. Stosowana uprzednio metoda wykrywania
wirusów i bakterii nie była wystarczająco czuła. W chwili obecnej nie
istnieją doskonalsze metody identyfikacji drobnoustrojów.
Przedstawiona w pracy metodyka analizy materiału genetycznego należy do
najbardziej zaawansowanych metod badawczych na wykrywanie bakterii i
wirusów powodujących zaburzenia prawidłowego przebiegu ciąży. Bakteria
o nazwie Leptotrichia amnioni sp.nov. została wykryta dopiero w 2002 r.
Obecnie nie ma jeszcze na świecie opublikowanych standardów profilaktyki
oraz leczenia ww. bakterii. Dzięki metodzie PCR przedstawionej w pracy
doktorskiej, wyniki przeprowadzonych badań mogą być wykorzystane jako
najnowsze źródło informacji na temat bakterii, które będą przydatne w
tworzeniu profilaktyki oraz standardów leczenia. Rozwoju badań związany
jest z potrzebą rozbudowy laboratoriów co w znacznym stopniu podniesie
innowacyjność dalszych prac badawczych. Przyczyni się również do
poszerzenia wiedzy o czynnikach infekcyjnych i ich wpływu na
nieprawidłowy przebieg ciąży oraz niepłodność.