QUANTA Flash® β2GP1 IgG 701248 Reagents

QUANTA Flash® β2GP1 IgG
Reagents
701248
Do diagnostyki In Vitro
Przeznaczenie
W pełni zautomatyzowany test immunologiczny do półilościowego pomiaru przeciwciał IgG przeciwko β2
glikoproteinie-1 (β2GP1) w osoczu ludzkim z cytrynianem i surowicy w urządzeniu BIO-FLASH® jako
pomoc w diagnostyce zaburzeń płytkowych związanych z pierwotnym i wtórnym zespołem
antyfosfolipidowym (APS), w przypadku wspólnego stosowania z innymi wynikami laboratoryjnymi i
klinicznymi.
Podsumowanie i wyjaśnienie testu
Przeciwciała przeciwko β2 glikoproteinie-1 (ß2GP1) należą do heterogenicznej rodziny przeciwciał
antyfosfolipidowych (aPL), które są autoprzeciwciałami skierowanymi przeciwko fosfolipidom anionowym
lub kompleksom białkowo-fosfolipidowym. Długotrwale podniesione poziomy przeciwciał aPL wiążą się z
poniesionym ryzykiem zakrzepicy naczyń oraz komplikacji położniczych. To powiązanie jest znane jako
zespół antyfosfolipidowy (APS) wg klasyfikacji wprowadzonej przez Harrisa w 1987 r.1. Badania mające
na celu określenie przeciwciał IgG i IgM przeciwko ß2GP1, przeciwciał IgG i IgM przeciwko kardiolipinie
(aCL) oraz przeciwciał zwanych antykoagulantem tocznia są badaniami aPL zdefiniowanymi w
zaktualizowanej klasyfikacji przez Międzynarodowy komitet diagnostyki APS na zjeździe, który odbył się
w 2006 r. w Sydney (Australia)2,3. Badania przeciwko β2GP1 oraz aCL zawierają ludzką β2 glikoproteinę1 (β2GP1) w fazie stałej.
β2 glikoproteina-1, również nazywana apolipoproteiną H, jest występującą w osoczu glikoproteiną o
ciężarze 44 kDA o 5 domenach. Piąta domena zawiera zgrupowanie dodatnio naładowanych
aminokwasów, które odpowiadają za wiązanie fosfolipidów anionowych. Mechanizm rozpoznawania
przez przeciwciała antyfosfolipidów i-β2GP1 oraz aCL przeciwciał β2GP1 jest nieznany. Powstały dwie
główne teorie: pierwsza znana jako „teoria dimeryzacji” zakłada, że jedno przeciwciało musi wiązać dwa
molekuły β2GP1, aby uzyskać podwyższoną awidność4, a druga „teoria ukrytych epitopów” zakłada, że
epitop wiążący antyfosfolipid przeciw β2GP1 i aCL jest eksponowany tylko wtedy, gdy β2GP1 wiąże
ujemnie naładowaną powierzchnię lub ujemne molekuły, takie jak kardiolipina5,6. Ten epitop znajduje się
w domenie I7.
Zasada badania
Test QUANTA Flash β2 glikoproteiny-1 IgG jest chemiluminescencyjnym dwustopniowym testem
immunologicznym z zastosowaniem cząstek magnetycznych pokrytych ludzką oczyszczoną β2GP1, która
wychwytuje z próbki przeciwciała antyfosfolipidowe przeciwko β2GP1, jeśli w niej występują. Po inkubacji,
magnetycznej separacji i etapie płukania, środek śledzący składający się z przeciwciała IgG
przeciwludzkiego znakowanego izoluminolem, jest dodawany i może związać się z przechwyconymi
cząstkami IgG przeciwko β2GP1. Po drugiej inkubacji, magnetycznej separacji oraz płukaniu, dodawane
są odczynniki, które inicjują reakcję luminescencji, a wyemitowane światło jest mierzone jako względne
jednostki światła (RLU) za pomocą systemu optycznego BIO-FLASH. Jednostki RLU są bezpośrednio
proporcjonalne do stężenia anty-β2GP1 IgG w próbce.
Test QUANTA Flash β2GP1 IgG wykorzystuje metodę redukcji danych dopasowania 4-parametrowej
krzywej logistycznej (4PLC) w celu wygenerowania krzywej wzorcowej. Krzywa wzorcowa jest wstępnie
zdefiniowana i uzależniona od serii oraz jest przechowywana w urządzeniu, wg kodu kreskowego wkładu.
Dzięki pomiarowi kalibratorów wstępnie zdefiniowana krzywa wzorcowa jest przekształcana w nową,
krzywą roboczą 4PLC zależną od urządzenia. Wartości stężenia kalibratorów są zawarte w kodach
kreskowych probówki z kalibratorem.
1
Odczynniki
Elementy składowe zestawu β2GP1 IgG:
1.
Wkład z odczynnikiem QUANTA Flash β2GP1 IgG zawierający następujące odczynniki.
Odczynniki znajdują się w buforze fosforanowym lub boranowym, zawierającym białko proste
surowicy bydlęcej, ludzkie ß2GP1, mysie przeciwciała monoklonalne IgG, stabilizatory oraz
konserwanty:
a. 1 fiolka zawiesiny cząstki magnetycznej opłaszczonej oczyszczonym ludzkim ß2GP1.
b. 1 fiolka buforu testowego.
c. 1 fiolka środka śledzącego składającego się z ludzkiego przeciwciała IgG oznaczonego
izoluminolem.
d. 1 fiolka rozcieńczalnika do próbek używanego do regularnego wstępnego rozcieńczania
próbki i automatycznego rozcieńczania w ponowieniu testu.
2.
Fiolka z kalibratorem 1 ß2GP1 IgG, zawierająca: 1 x probówka 1 ml z kodem kreskowym i
roztworem z przeciwciałami IgG przeciwko ß2GP1 w buforze fosforanowym zawierającym
albuminę surowicy bydlęcej, stabilizatory i konserwanty.
3.
Fiolka z kalibratorem 2 ß2GP1 IgG, zawierającym: 1 x probówka 1 ml z kodem kreskowym i
roztworem z przeciwciałami IgG przeciwko ß2GP1 w buforze fosforanowym zawierającym
albuminę surowicy bydlęcej, stabilizatory i konserwanty.
Kalibratory są uzależnione od serii i nie można ich używać z innymi seriami odczynników.
Ostrzeżenia i środki ostrożności
1.
2.
3.
4.
5.
Materiał pochodzenia ludzkiego w tym produkcie został przetestowany zgodnie z metodami
zatwierdzonymi przez FDA i stwierdzono brak reakcji dla antygenu powierzchniowego zapalenia
wątroby typu B (HBsAg), przeciwciał przeciwko HCV oraz HIV1 i HIV2. Należy obchodzić się jak
z potencjalnie zakaźnym materiałem8.
Wszystkie odczynniki zawierają mniej niż 0,1% azydku sodu, który może tworzyć wybuchowe
azydki w metalowych instalacjach kanalizacyjnych. Stosować odpowiednie procedury utylizacji.
Unikać kontaktu ze skórą i oczami (S 24/25). Nie wylewać do kanalizacji (S 29). Nosić
odpowiednią odzież ochronną (S 36).
Środek szkodliwy w przypadku połknięcia (R 22). W razie połknięcia należy zwrócić się o pomoc
medyczną (S 46).
Ten produkt jest przeznaczonych do zastosowań diagnostycznych in vitro.
Warunki przechowywania
Nieotwarte odczynniki oraz kalibratory są stabilne aż do daty ważności podanej na wkładzie i etykietach
probówki, jeśli produkt jest przechowywany w temperaturze 2–8°C. Nie zamrażać.
1.
Otwarte wkłady z odczynnikami należy przechowywać wewnątrz urządzenia.
Oprogramowanie urządzenia BIO-FLASH monitoruje datę przydatności znajdującego się
wewnątrz urządzenia wkładu oraz serii wkładu z odczynnikiem. System nie pozwala na
użycie wkładu, którego termin ważności upłynął.
Kalibrator ß2GP1 IgG 1 i 2 – stabilność w urządzeniu po otwarciu systemu BIO-FLASH wynosi
2.
3,5 godziny. Aby zapewnić optymalną stabilność, należy wyjąć kalibratory z systemu od razu po
kalibracji i przechowywać je w temperaturze 2–8°C, zamknięte, w oryginalnej fiolce.
2
Pobieranie próbek
Osocze: Dziewięć części świeżo pobranej krwi żylnej jest umieszczanych w jednej części trisodu
cytrynianu. Więcej instrukcji dotyczących pobierania, obsługi i przechowywania próbek można znaleźć w
dokumencie CLSI H21-A59. Rozmrażać próbki szybko w temperaturze 37°C. Po rozmrożeniu badanie
musi być przeprowadzone w ciągu 2 godzin.
Surowica: Po pobraniu surowica powinna być oddzielona od skrzepu. Należy postępować zgodnie z
zaleceniami dokumentacji CLSI H18-A4 w zakresie warunków przechowywania próbek10..
Przed testowaniem wirować próbki zawierające widoczne cząstki.
Badanie
Dostarczone materiały
1
1
1
Wkład z odczynnikiem QUANTA Flash β2GP1 IgG
Kalibrator QUANTA Flash β2GP1 IgG 1
Kalibrator QUANTA Flash β2GP1 IgG 2
Wymagane materiały nie dołączone do zestawu
Urządzenie BIO-FLASH z obsługującym je komputerem
Układ płuczący BIO-FLASH (nr części: 3000-8205)
Wyzwalacze BIO-FLASH (Numer części: 3000-8204)
Kuwetki BIO-FLASH (Numer części: 3000-8206)
Kontrole QUANTA Flash β2GP1 IgG (nr części: 701247)
3
Stosowanie analizatora chemiluminescencyjnego BIO-FLASH
1.
2.
3.
4.
5.
Szczegółowe instrukcje dotyczące pracy z analizatorem chemiluminescencyjnym i
oprogramowaniem BIO-FLASH można znaleźć w podręczniku użytkownika dołączonym do
systemu BIO-FLASH. Dodatkowe informacje i pomoc związaną z wykrywaniem i usuwaniem
usterek w testach można uzyskać, kontaktując się z działem pomocy technicznej firmy INOVA
Diagnostics, Inc. dostępnym pod adresem i numerem telefonu podanym na końcu tej instrukcji.
W celu opróżnienia zbiornika na odpady stałe należy otworzyć szufladkę na odpady. Wyjąć
zbiornik na odpady stałe i zutylizować w odpowiedni sposób. Włożyć na powrót zbiornik na
odpady stałe, zamknąć szufladkę na odpady i kliknąć Tak w oknie Opróżnij szufladkę na
odpady.
Aby wymienić wyzwalacze, należy kliknąć przycisk Wykaz materiałów masowych F9 (na górze
po prawej stronie).
a. Na ekranie Materiały masowe – wykaz kliknąć przycisk Wyzwalacze po lewej stronie.
Pokaże się nowe okno zatytułowane Dodaj wyzwalacze – Wyjmij stare butelki.
b. Otworzyć i wyjąć szufladkę na odpady urządzenia BIO-FLASH. Zutylizować wszelkie kuwetki
znajdujące się w szufladce na odpady. Kliknąć opcję Tak w oknie Opróżnij szufladkę na
odpady. Wyjąć butelki z wyzwalaczami z uchwytów i kliknąć przycisk Dalej. Odkręcić stare
butelki z wyzwalaczami i zastąpić je nowymi wyzwalaczami. Czynności należy wykonywać po
kolei i odpowiednio dopasować oznaczone kolorem zakrętki (biały do białego, czerwony do
czerwonego).
c. Należy stosować się do instrukcji podanych w nowym oknie Dodaj wyzwalacze – Dodaj
butelkę z 2 wyzwalaczem. Po zaakceptowaniu kodu kreskowego, należy umieścić
wyzwalacz 2 w uchwycie oznaczonym kolorem białym. Kliknąć przycisk Dalej.
d. Należy stosować się do instrukcji podanych w oknie Dodaj wyzwalacze – Dodaj butelkę z 1
wyzwalaczem. Po zaakceptowaniu kodu kreskowego należy umieścić wyzwalacz 1 w
uchwycie oznaczonym kolorem czerwonym. Kliknąć Koniec. Włożyć z powrotem szufladkę
na odpady i zamknąć ją.
Aby wymienić zbiornik układu płuczącego, należy kliknąć przycisk Wykaz materiałów
masowych F9 (na górze po prawej stronie). Na ekranie Materiały masowe – wykaz kliknąć
przycisk układ płuczący. układ płuczący. W nowym oknie Dodaj układ płuczący – Wyjmij
butelki kliknąć Dalej. Należy stosować się do instrukcji podanych w owym oknie Dodaj układ
płuczący – Dodaj butelkę. Po zaakceptowaniu kodu kreskowego kliknąć Koniec, jeśli będzie to
konieczne.
W celu opróżnienia pojemnika na odpady płynne, na ekranie Materiały masowe – wykaz należy
kliknąć przycisk Odpady płynne. Usunąć i zutylizować odpady płynne. Kliknąć przycisk Dalej. Po
zaakceptowaniu kodu kreskowego należy kliknąć Koniec.
4
Sposób przygotowania
Przygotowanie wkładu z odczynnikiem
Za pierwszym razem, gdy ma być użyty wkład z odczynnikiem, należy wykonać poniższe czynności, aby
prawidłowo zainstalować wkład w urządzeniu BIO-FLASH.Uwaga: Nie używać wkładu z odczynnikiem w
przypadku zauważenia jakichkolwiek oznak uszkodzenia.
Wkład QUANTA Flash β2GP1 IgG: Mikrocząstki osiadają podczas dostawy i przechowywania i wymagają
wymieszania.
1.
Za pierwszym razem, gdy używany jest wkład,
należy delikatnie obrócić wkład 30 razy, unikając
powstania piany. Sprawdzić, czy mikrocząstki
utworzyły zawiesinę. Jeśli mikrocząstki nie
utworzyły
zawiesiny,
należy
kontynuować
odwracanie wkładu, aż powstanie pełna zawiesina
mikrocząstek. Jeśli nie uda się odtworzyć
zawiesiny mikrocząstek, NIE WOLNO UŻYWAĆ
WKŁADU.
2.
Po utworzeniu zawiesiny mikrocząstek, umieścić
wkład z odczynnikiem na stabilnej powierzchni,
aby usunąć czerwony pasek zabezpieczający.
Przytrzymać wkład z odczynnikiem w jednej dłoni.
Drugą ręką zdecydowanym ruchem chwycić
czerwony pasek zabezpieczający z tyłu wkładu z
odczynnikiem i wyciągnąć go do końca.
3.
Nacisnąć dwa paski po bokach przebijającej
zatyczki (część szara) i nacisnąć w dół górną
część wkładu z odczynnikiem, aż zatrzaśnie się
we właściwej pozycji zablokowania. Paski nie
powinny być widoczne. NIE WOLNO ODWRACAĆ
OTWARTEGO WKŁADU..
4.
Umieścić ostrożnie wkład z odczynnikiem w dowolnym wolnym gnieździe karuzeli na odczynniki
urządzenia BIO-FLASH. Po umieszczeniu wkładu w karuzeli na odczynniki w urządzeniu odbywa
się dodatkowe okresowe mieszanie mikrocząsteczek.
Kalibracja badania
1.
2.
3.
Każda nowa seria wkładu z odczynnikiem musi musi byś skalibrowana przed pierwszym użyciem.
Oprogramowanie nie zezwoli na wykorzystanie nowej serii, aż nie zostanie ona skalibrowana.
Pełne instrukcje procedury można znaleźć w podręczniku użytkownika BIO-FLASH.
Kalibratory QUANTA Flash ß2GP1 IgG muszą być wymieszane przez delikatne wielokrotne
odwracanie w celu zapewnienia homogeniczności kalibratora. Należy unikać powstawania piany.
Po zatwierdzeniu kalibracji skalibrowana seria wkładu z odczynnikiem jest gotowa do użycia.
5
Programowanie i badanie próbek
1.
2.
3.
4.
Nacisnąć przycisk Lista działań na górze ekranu i wybrać przycisk Statywy na dole.
Wybrać statyw z próbkami do badania, zaznaczając nazwę tego statywu na ekranie lub skanując
kod kreskowy za pomocą ręcznego skanera kodów kreskowych. Zeskanować lub wpisać nazwę
próbki, wybrać typ próbki, typ pojemnika (probówka/kubeczek) i wybrać IgG_β2GP1 z panelu
testu. Powtórzyć te kroki dla wszystkich próbek.
Umieścić próbki w wybranych pozycjach na stojaku na próbki i umieścić stojak w karuzeli na
próbki urządzenia.
Gdy wszystkie wymagane substancje znajdą się w urządzeniu, na górze ekranu pojawi się
zielona ikona start. Aby rozpocząć badanie, należy nacisnąć ikonę start.
Kontrola jakości
Kontrole testu QUANTA Flash β2GP1 IgG (sprzedawane oddzielnie – INOVA, nr produktu 701247)
obejmują kontrole wysokiego i niskiego poziomu β2GP1 IgG. W broszurze z instrukcjami na temat
QUANTA Flash® β2GP1 IgG Controls znajdują się szczegółowe instrukcje dotyczące sposobu
wprowadzania w oprogramowaniu wartości jednostek oraz standardowego odchylenia każdej kontroli,
oraz informacje na temat procedury przeprowadzenia kontroli. Każde laboratorium powinno opracować
własne średnie i standardowe odchylenie oraz powinno ustalić program kontroli jakości do monitorowania
badań laboratoryjnych. Zaleca się przeprowadzanie kontroli raz na 8-godzinną zmianę, gdy używane jest
badanie. W dokumencie Westgard et al można znaleźć informacje na temat identyfikacji i rozwiązywania
problemów związanych z sytuacjami poza kontrolą12.
Identyfikowalność
Zgłoszone wartości zostały ustalone na podstawie wielu serii badań z systemem BIO-FLASH, przy użyciu
określonych serii odczynników oraz zgodnie z wewnętrznymi standardami. Zgodnie z zaleceniami
Międzynarodowego komitetu diagnostyki APS, na zjeździe, który odbył się w Sydney2, jednostki
wewnętrznego standardu dla przeciwciał IgG przeciwko β2GP1 zostały zestawione z referencyjnym
chimerycznym przeciwciałem HCAL13.
Matryca próbek
Dwadzieścia osiem próbek z cytrynianem/osoczem/surowicą zostało przeanalizowanych za pomocą
badania β2GP1 IgG. Wartości stężenia zostały porównane przy pomocy regresji Passing i Bablok, przy
użyciu wartości próbek osocza jako wartości referencyjnych (oś X) oraz współczynnika korelacji
obliczonego za pomocą korelacji Pearsona. Nachylenie i przecięcie wyniosły odpowiednio 1,00 i 1,25, a
korelacja (r) 0,999.
Obliczanie wyników
Dla każdej nowej serii testu QUANTA Flash β2GP1 IgG tworzona jest nowa 5-punktowa krzywa
wzorcowa. Ta czteroparametryczna krzywa logarytmiczna zakodowana jest w kodzie paskowym każdego
wkładu z odczynnikiem. Po skalibrowaniu wkładu z odczynnikiem do przekształcenia jednostek RLU na
jednostki chemiluminescencji CU zostanie wykorzystana krzywa robocza właściwa dla urządzenia.
Interpretacja wyników
Test QUANTA Flash Assay może wykryć małe różnice w populacjach pacjentów. Każde laboratorium
powinno ustalić własny normalny zakres na podstawie własnych kontroli i populacji pacjentów, zgodnie z
indywidualnymi ustalonymi procedurami.
Zalecane jest, aby wyniki raportowane przez laboratorium zawierały oświadczenie: „Poniższe wyniki
uzyskano przy zastosowaniu immunologicznego testu chemiluminescencji INOVA QUANTA Flash β2GP1
IgG. Nie można stosować zamiennie wartości uzyskanych przy zastosowaniu metod testowych innych
producentów. Rzędu wielkości poziomów raportowanego autoprzeciwciała IgG nie można zawsze
skorelować z mianem punktu końcowego”.
Uwaga: Urządzenie BIO-FLASH automatycznie uwzględnia różnice w roztworze pomiędzy próbkami
osocza i surowicy. Zaraportowane wartości próbek surowicy nie muszą być poprawiane o współczynnik.
Więcej informacji można znaleźć w podręczniku użytkownika BIO-FLASH.
6
Ograniczenia badania
Ostatecznej diagnozy klinicznej nie można przygotować na podstawie pozytywnego wyniku β2GP1IgG.
Należy również uwzględnić wyniki kliniczne oraz historię pacjenta. Jeśli w przypadku obecności wskazań
klinicznych zostanie stwierdzony wynik negatywny β2GP1 IgG, muszą zostać przeprowadzone inne
badania aPL, zgodnie z zaleceniami wg uaktualnionych kryteriów klasyfikacji Międzynarodowego
komitetu w ramach diagnozy APS, na spotkaniu, które odbyło się w 2006 r2.
Wyniki ß2GP1 IgG w BIO-FLASH nie są modyfikowane przez hemoglobinę do 500 mg/dl, bilirubinę do 18
mg/dl, trójglicerydy do 1250 mg/dl, heparynę (LMW i niefrakcjonowaną) do 2 IU/ml oraz czynnik
reumatoidalny (RF) do 500 IU/ml.
W badaniach reaktywności krzyżowej 10 pozytywnych próbek każdego z następujących przypadków
zostało przeprowadzonych przy użyciu badania QUANTA Flash ß2GP1 IgG: czynnik reumatoidalny,
przeciwciała przeciwjądrowe (ANA) oraz kiła (wyniki pozytywne w przypadku szybkiego testu
reaginowego w osoczu, RPR).
To badanie nie zostało zatwierdzone do stosowania w przypadku populacji dziecięcej.
Grupa pacjentów
RF
ANA
RPR
N
10
10
10
n (pozytywne)
0
2
0
% pozytywnych IgG przeciwko ß2GP1
0.0%
20.0%
0.0%
Spodziewane wartości
Badanie normalnego zakresu zostało przeprowadzone przy użyciu próbek dawców osocza z
cytrynianem z banku krwi, od zdrowych dorosłych osób, które zostały wykonane przy użyciu odczynników
QUANTA Flash ß2GP1 IgG oraz kalibratorów. Na podstawie zaleceń Międzynarodowego komitetu w
Sydney2, próg pozytywnych przeciwciał ß2GP1 IgG został ustanowiony na poziomie 99. percentyla.
Układ
BIO-FLASH
N
262
Normalny zakres górnego limitu (CU)
20.0
W związku z występowaniem wielu zmiennych, które mogą wpływać na wyniki, każde laboratorium
powinno ustanowić własny normalny zakres.
Porównanie metody z zastosowaniem urządzenia–predykatu
Próbki używane w badaniach klinicznych, które mieściły się w porównywanym zakresie testowym metod,
były mierzone w ramach badania Porównanie metody za pomocą dostępnego w handlu badania ELISA
zatwierdzonego przez FDA. Procent pozytywnych, negatywnych i ogólna zgodność:
Porównanie metody (N = 150)
QUANTA
Flash®
ß2GP1 IgG
CIA
Badanie ELISA
Procentowa zgodność (95% ufności)
Pozytywne
Negatywne
Łącznie
Pozytywne
51
19
70
Negatywne
0
80
80
Łącznie
51
99
150
Procentowa zgodność wyników
pozytywnych = 100% (93,0%-100%)
Procentowa zgodność wyników
negatywnych = 80,8% (71,7%-88,0%)
Procentowa zgodność wyników
łącznie = 87,3% (80,9%-92,2%)
Precyzja, korelacja i wyniki badania klinicznego zostały osiągnięte za pomocą swoistych serii
odczynników i kontroli.
7
Swoistość i wrażliwość kliniczna
Badanie wynikowe zostało przeprowadzone na 321 zamrożonych osoczach z cytrynianem. Te osocza
pochodziły z 6 różnych grup, w tym również od wybranych osób zdiagnozowanych jako pierwotne APS
(PAPS), wtórne APS (SAPS), toczeń rumieniowaty układowy (SLE), ale nie od APS ani SLE wg
standardowych obiektywnych testów. Piątą grupą byli pacjenci ze schorzeniami sercowonaczyniowymiale nie zostali sklasyfikowani w poprzednich czterech grupach. Została również
uwzględniona grupa zdrowych osób. Poniżej zsumowane wyniki opierają się na wartości granicznej 20
CU:
Grupa pacjentów
PAPS
SAPS
SLE
Typu SLE
Inne
Normalne
N
23
69
115
5
6
103
n (pozytywne)
14
45
20
0
1
0
% Pozytywne
60.9%
65.2%
17.4%
0.0%
16.7%
0.0%
Uwzględniając pozytywne wyniki w grupach pacjentów PAPS i SAPS jako rzeczywiście pozytywne
czułość kliniczna, swoistość i ogólna zgodność procentowa wynosiły:
Układ
BIO-FLASH
N
321
Czułość (95% CI)
64.1% (53.5%-73.9%)
Swoistość (95% CI)
90.8% (86.3%-94.2%)
% Zgodność (95% CI)
83.2% (78.6%-87.1%)
Precyzja i powtarzalność
Wszystkie przedstawione dane zostały uzyskane przy użyciu próbek osocza z cytrynianem.
W ramach serii i łącznie (od serii do serii i od dnia do dnia) precyzja została ustalona w ramach wielu
serii.
BIO-FLASH
Niska kontrola ß2GP1 IgG
Wysoka kontrola ß2GP1 IgG
Próbka osocza A β2GP1 IgG
Próbka osocza B β2GP1 IgG
Próbka osocza C β2GP1 IgG
Próbka osocza D β2GP1 IgG
Próbka osocza E β2GP1 IgG
Próbka osocza F β2GP1 IgG
Średnia (CU)
19.1
429
14.7
20.9
58.1
508
1470
2694
CV% (w ramach serii)
7.8%
3.0%
6.9%
4.7%
3.2%
2.5%
2.5%
3.7%
CV% (razem)
11.2%
3.8%
10.9%
7.3%
5.0%
3.3%
3.7%
3.7%
Granice wykrywania, zakresy liniowe i raportowane
Dolny limit wykrywania:
Układ
BIO-FLASH
6.4 CU
Liniowość:
Układ
BIO-FLASH
6.4 - 6100 CU
Gdy zostanie uruchomiona funkcja ponownego przebiegu, urządzenie wykonuje automatyczne
rozcieńczenie i koryguje końcowy rezultat przy współczynniku rozcieńczenia (20x), w ten sposób
rozszerzając zakres testu do 122 000 CU.
Efekt prozone nie ma wpływu na badanie. Protokół badania obejmuje etap płukania po inkubacji próbki,
który wyklucza efekt prozone. Próbki powyżej 6100 CU przetestowane podczas badania klinicznego
zainicjowały ponowny przebieg.
8
QUANTA Flash® β2GP1 IgG
Controls
701247
Do diagnostyki In Vitro
Przeznaczenie
Kontrole QUANTA Flash β2GP1IgG są przeznaczone do celów kontroli jakości badań QUANTA Flash
β2GP1 IgG przeprowadzanych przy użyciu urządzenia BIO-FLASH®.
Podsumowanie i zasada badania
Przeciwciała przeciwko ß2 glikoproteinie-1 (ß2GP1) należą do heterogenicznej rodziny przeciwciał
antyfosfolipidowych (aPL), które są autoprzeciwciałami skierowanymi przeciwko fosfolipidom anionowym
lub kompleksom białkowo-fosfolipidowym. Długotrwale podniesione poziomy przeciwciał aPL wiążą się z
poniesionym ryzykiem zakrzepicy naczyń oraz komplikacji położniczych. To powiązanie jest znane jako
zespół antyfosfolipidowy (APS) wg klasyfikacji wprowadzonej przez Harrisa w 1987 r.1. Badania mające
na celu określenie przeciwciał IgG i IgM przeciwko ß2GP1, przeciwciał IgG i IgM przeciwko kardiolipinie
(aCL) oraz przeciwciał zwanych antykoagulantem tocznia są badaniami aPL zdefiniowanymi w
zaktualizowanej klasyfikacji przez Międzynarodowy komitet diagnostyki APS na zjeździe, który odbył się
w 2006 r. w Sydney (Australia)2,3. Niska i wysoka kontrola ß2GP1 IgG jest przygotowywana w ramach
dedykowanego procesu i zawiera różne stężenia przeciwciał IgG przeciwko ludzkiej ß2glikoproteinie-1.
Niska kontrola ß2GP1 IgG: Kontrola ma za zadanie posłużyć do oceny precyzji i dokładności testu przy
normalnym poziomie przeciwciał IgG przeciwko ß2glikoproteinie-1 lub poziomie zbliżonym do poziomu
granicznego.
Wysoka kontrola ß2 GP1 IgG: Kontrola ma za zadanie ocenić precyzję i dokładność testu przy
nieprawidłowych poziomach przeciwciał IgG przeciwko ß2GP1. W celu zapewnienia kompletnego
programu kontroli jakości zalecane jest stosowanie obu kontroli.
Odczynniki
1.
2.
iska kontrola przeciwciał IgG przeciwko ß2GP1 testu QUANTA Flash 3 x 1 ml, probówki z kodem
kreskowym z roztworem z przeciwciałami IgG przeciwko ß2GP1 w buforze fosforanowym
zawierającym albuminę surowicy bydlęcej, stabilizatory i konserwanty.
Wysoka kontrola przeciwciał IgG przeciwko ß2GP1 testu QUANTA Flash 3 x 1 ml, probówki z
kodem kreskowym z roztworem z przeciwciałami IgG przeciwko ß2GP1 w buforze fosforanowym
zawierającym albuminę surowicy bydlęcej, stabilizatory i konserwanty.
Ostrzeżenia i środki ostrożności
Materiał pochodzenia ludzkiego w tym produkcie został przetestowany zgodnie z metodami
zatwierdzonymi przez FDA i stwierdzono brak reakcji dla antygenu powierzchniowego zapalenia wątroby
typu B (HBsAg), przeciwciał przeciwko HCV oraz HIV1 i HIV2. Należy obchodzić się jak z potencjalnie
zakaźnym materiałem8.
Unikać kontaktu ze skórą i oczami (S 24/25). Nie wylewać do kanalizacji (S 29). Nosić odpowiednią
odzież ochronną (S 36).
Ten produkt przeznaczony jest do zastosowań diagnostycznych in vitro.
9
Warunki przechowywania
1.
2.
3.
Wszystkie nieotwarte kontrole przechowywać w temperaturze 2–8C. Nie zamrażać. Odczynniki
są stabilne do daty ważności, pod warunkiem, że są przechowywane i używane zgodnie z
instrukcjami.
Te kontrole są przeznaczone do przeprowadzenia 15 kalibracji. Na etykiecie każdej probówki z
kontrolą znajduje się szereg 15 pól, które można skreślać, aby śledzić ile razy kontrola została
użyta. Całkowity czas przez jaki probówki z kontrolą mogą pozostawać otwarte w urządzeniu
wynosi 2,5 godz. lub 10 minut na wykorzystanie. Jeśli kontrole pozostaną w urządzeniu otwarte
dłużej niż 2,5 godz., wówczas należy je wyrzucić. Użytkowanie tej samej probówki z kontrolą
ponad 15 razy i/lub przez czas dłuższy niż 2,5 godz. łącznie może doprowadzić do uzyskania
błędnych wyników.
Aby zapewnić odpowiednią stabilność, należy usunąć kontrole z systemu natychmiast po
zbadaniu próbki i należy przechowywać je w temperaturze 2-8oC w zamkniętej oryginalnej fiolce.
Badanie
Tworzenie nowych materiałów QC do badania ß2GP1 IgG
1.
Przed pierwszym użyciem kontroli QUANTA Flash badania ß2GP1 IgG w urządzeniu, do
oprogramowania należy wprowadzić nazwę, serię, liczbę powieleń, datę przydatności do użycia,
wartość (lub dawkę) oraz informację o docelowym odchyleniu standardowym.
2.
Na ekranie Rejestr stanu urządzenia kliknąć przycisk strzałki Wybierz więcej opcji –
Ctrl-M () . Kliknąć przycisk Nowy materiał QC.
3.
Do każdego zestawu kontroli dołączony jest arkusz z danymi dotyczącymi tej właśnie serii. W
pierwszej kolejności należy wprowadzić do oprogramowania nazwę, numer serii i datę ważności.
Następnie kliknąć przycisk Dodaj badanie. W nowym oknie należy zaznaczyć opcję Pokaż
wszystkie badania. Wybrać badanie ß2GP1 IgG z listy i kliknąć opcję Dodaj. Na końcu należy
wprowadzić docelową dawkę i docelowe odchylenie SD. Kliknąć opcję Zapisz. Procedurę tę
należy przeprowadzić dla obu kontroli.
Tworzenie nowej serii dla istniejących materiałów QC
1.
2.
3.
4.
5.
Przed pierwszym użyciem nowej serii kontroli QUANTA Flash ß2GP1 IgG do oprogramowania
należy wprowadzić imię, nazwisko, serię, datę przydatności do użycia, wartość (lub dawkę) oraz
informację o docelowym odchyleniu standardowym.
Na ekranie Rejestr stanu urządzenia kliknąć przycisk strzałki Wybierz więcej opcji –
Ctrl-M () . Wybrać opcję QC Ctrl-F2. Zaznaczyć test IgG_ß2GP1 w kolumnie po lewej stronie.
Następnie zaznaczyć odpowiedni materiał kontroli po prawej stronie („ß2GP1GL”, który
odpowiada niskiej kontroli lub „ß2GP1GH”, który odpowiada wysokiej kontroli). Kliknąć przycisk
Nowa seria QC.
Do każdego zestawu kontroli dołączony jest arkusz z danymi dotyczącymi tej właśnie serii.
Wprowadzić informacje z tego arkusza do oprogramowania. Powinno to obejmować nazwę,
numer serii, datę przydatności do użycia, docelową stężenie oraz docelowe odchylenie
standardowe. W razie potrzeby kliknąć przycisk Dodaj badanie. W nowym oknie należy
zaznaczyć opcję Pokaż wszystkie badania. Wybrać badanie ß2GP1 IgG z listy i kliknąć opcję
Dodaj. Kliknąć opcję Zapisz. Procedurę tę należy przeprowadzić dla obu kontroli.
Zalecane jest, aby kontrole QUANTA Flash ß2GP1 IgG wykorzystywać jeden raz na każdą 8godzinną zmianę, kiedy ma zostać użyty test.
Aby upewnić się, że kontrole są homogeniczne, należy każdą z nich wymieszać. Należy unikać
powstawania piany, jako że pęcherzyki mogą zaburzać wykrywanie poziomu płynu przez
urządzenie. Zdjąć zatyczkę z każdej probówki zawierającej kontrolę i umieścić obie z nich w
stojaku na próbki, przy czym kody kreskowe muszą skierowane być przodem do szczelin w
stojaku. Umieścić stojak na próbki w karuzeli na próbki urządzenia BIO-FLASH i zamknąć drzwi.
Urządzenie odczyta kody kreskowe na probówkach zawierających kontrole i zidentyfikuje
potrzebny wkład z odczynnikiem. Szczegółowe instrukcje dotyczące pracy z analizatorem
chemiluminescencyjnym i oprogramowaniem BIO-FLASH można znaleźć w podręczniku
użytkownika dołączonym do systemu BIO-FLASH.
10
Identyfikowalność
Zgłoszone wartości zostały ustalone na podstawie wielu serii badań z systemem BIO-FLASH, przy użyciu
określonych serii odczynników oraz zgodnie z wewnętrznymi standardami. Wyniki przeciwciał IgG
przeciwko ß2GP1 są raportowane w jednostkach chemiluminescencji (CU). Te jednostki zostały
określone przez przypisanie 20 CU do reakcji górnego limitu zakresu prawidłowości (ULNR) dla262
osoczy z dodatkiem cytrynianu z banku krwi (99. percentyl). Zgodnie z zaleceniami Międzynarodowego
komitetu diagnostyki APS, na zjeździe, który odbył się w Sydney2, jednostki wewnętrznego standardu dla
przeciwciał IgG przeciwko ß2GP1 zostały zestawione z referencyjnym monoklonalnym przeciwciałem
HCAL13.
Ograniczenia
Te produkty są opracowywane jako kontrole do monitorowania działania badania QUANTA Flash
przeciwciał IgG przeciwko ß2GP1. Te kontrole podlegają ograniczeniom systemu badań. Odchylenia
mogą wskazywać na możliwe problemy z jednym lub kilkoma elementami w systemie testowym.
11
Piśmiennictwo
1. Harris EN: Syndrome in the black swan. Br.J. Rheumatol 1987, 26:324-326.
2. Miyakis S, Lockshin MD, Atsumi T, Branch DW, Brey RL, Cervera R, Derksen RH, de Groot PG,
Koike T, Meroni PL, Reber G, Shoenfeld Y, Tincani A, Vlachoyiannopoulos PG, Krilis SA :
International consensus statement on an update of the classification criteria for definite
antiphospholipid syndrome (APS). J Thromb Haemost 2006, 4:295-306.
3. Swadźba J, Iwaniec T, Szczeklik A, Musiał J: Revised classification criteria for
antiphospholipid syndrome and the thrombotic risk in patients with autoimmune diseases.
J Thromb Haemost 2007, 5:1883-1889.
4. Lutters BC, Meijers JC, Derksen RH, Arnout J, de Groot PG: Dimers of beta 2-glycoprotein I
mimic the in vitro effects of beta 2-glycoprotein-anti-beta 2-glycoprotein antibody
complexes. J Biol Chem 2001, 276:3060-3067.
5. Kuwana M, Matsuura E, Kobayashi K, Okazaki Y, Kaburaki J, Ikeda Y, Kawakami Y: Binding of
ß2- glycoprotein-I to anionic phospholipids facilitates processing and presentation of a
cryptic epitope that activates pathogenic autoreactive T-cells. Blood 2005, 105:1552-1557.
6. Wang SX, Sun YT, Sui SF: Membrane-induced conformational change in human
apolipoprotein H. Biochem J 2000, 348:103-106.
7. de Laat B, Derksen RHWM, van Lummel M, Pennings MTT, de Groot PG: Pathogenic anti-ß2glycoprotein-I antibodies recognize domain I of ß2-glycoprotein-I only after a
conformational change. Blood 2006, 107:1916-1924.
8. Richmond JY, McKinney RW eds.: Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories. U.S.
Dept. of Health and Human Services, Public Health Service, 4th Edition; 1999.
9. CLSI: Collection, Transport and Processing of Blood Specimens for Testing Plasma-Based
Coagulation and Molecular Hemostasis Assays; Approved Guideline-Fifth Edition. CLSI
Document H21-A5. Clinical and Laboratory Standards Institute, 940 West Valley Road, Suite
1400, Wayne, PA 19087, USA, 2008.
10. CLSI: Procedures for the Handling and Processing of Blood Specimens; Approved GuidelineThird Edition. CLSI Document H18-A4. Clinical and Laboratory Standards Institute, 940 West
Valley Road, Suite 1400, Wayne, PA 19087, USA, 2010.
11. Zucker S, Cathey MH, West B: Preparation of Quality Control Specimens for Coagulation.
Am J Clin Pathol 1970, 53:924-927.
12. Westgard JO, Barry PL: Cost-Effective Quality Control: Managing the Quality and Productivity of
Analytical Process. AACC Press; 1986.
13. Ichicawa K, Khamashta MA, Koike T, Matsuura E, Hughes GR: ß2 Glycoprotein-I reactivity of
monoclonal anticardiolipin antibodies from patients with the antiphospholipid syndrome.
Arthritis and Rheumatism 1994, 37:1453-1461.
12
Zastosowane symbole
Diagnostyczne urządzenia medyczne In vitro
Przed użyciem należy zapoznać się z instrukcją
Ograniczenia temperaturowe
Nie wykorzystywać ponownie
Zagrożenia biologiczne
Kod serii
Numer katalogowy
Użyć do
Producent
Autoryzowany przedstawiciel
Zawiera ilość wystarczającą do przeprowadzenia < n > testów
Kontrola
Kalibrator 1
Kalibrator 2
Papierowe pudełko nadaje się recyklingu
Tą stroną do góry
QUANTA Flash jest znakiem handlowym firmy INOVA Diagnostics Inc. BIO-FLASH jest zastrzeżonym
znakiem handlowym firmy Biokit S.A. © 2014
13
Wyprodukowano dla:
INOVA Diagnostics, Inc.
9900 Old Grove Road
San Diego, CA 92131
Stany Zjednoczone Ameryki
Pomoc techniczna (tylko na terenie Stanów Zjednoczonych i Kanady) : 877-829-4745
Pomoc techniczna (poza terenem Stanów Zjednoczonych) : 1 858-805-7950
[email protected]
Autoryzowani przedstawiciele na terenie Unii Europejskiej:
Medical Technology Promedt Consulting GmbH
Altenhofstrasse 80
D-66386 St. Ingbert, Niemcy
Tel.: +49-6894-581020
Faks.: +49-6894-581021
www.mt-procons.com
621245POL
Luty 2014
Wersja 2
14