Monoclonal Mouse Anti-Human CD99, MIC2 Gene Product

Monoclonal Mouse
Anti-Human
CD99, MIC2 Gene Product
Ewing’s Sarcoma Marker
1
Clone 12E7
Code M3601
Cel uŜycia
Tylko dla diagnostyki in vitro
Przeciwciała przeznaczone do zastosowań laboratoryjnych, w celu identyfikacji jakościowej komórek zawierających produkt genu MIC2
CD99 w tkankach prawidłowych i nowotworowych, przy uŜyciu mikroskopii świetlnej i metod immunohistochemicznych (IHC). Dodatni wynik
odczynu ułatwia klasyfikację nowotworów płuc i tarczycy. Interpretację kliniczną kaŜdego wybarwienia dodatniego lub jego braku naleŜy
uzupełnić badaniami morfologicznymi i histologicznymi z uŜyciem stosownych kontroli. Interpretację powinien przeprowadzić
wykwalifikowany patolog, w oparciu o historię kliniczną pacjenta oraz inne testy diagnostyczne.
Synonimy
p30/32mic2, CD99
Krótki opis produktu
Rzekomoautosomalny gen MIC2 zlokalizowany jest na ramieniach krótkich chromosomów X i Y.
Produktami translacji tego genu są glikoproteiny oznaczone symbolami p30 i p32, o podobnych masach cząsteczkowych.4-6 Produkty
białkowe genu MIC2 są wraŜliwe na neuraminidazę i proteazy. W erytrocytach ekspresja genu MIC2 regulowana jest przez gen XG
sprzęŜony z chromosomem X, dając w wyniku ilościowy polimorfizm na róŜnych etapach tworzenia produktu genu MIC2.7
Zobacz dokument „Ogólne instrukcje wykonywania odczynów immunohistochemicznych” firmy Dako lub następujące części instrukcji do
systemu detekcji IHC: 1) Zasady procedury, 2) Niezbędne materiały niedostarczone z zestawem, 3) Przechowywanie, 4) Przygotowanie
preparatu, 5) Wykonanie odczynu, 6) Kontrola jakości, 7) Rozwiązywanie problemów, 8) Interpretacja wyniku odczynu, 9) Ograniczenia
metody.
Odczynniki
Mysie przeciwciała monoklonalne są dostarczane w postaci nadsączu hodowli tkankowej w buforze Tris-HCl o stęŜeniu 0,05 mol/l i pH 7,2,
zawierającym azydek sodu o stęŜeniu 0,015 mol/l. Produkt zawiera białko stabilizujące.
Klon: 12E71
Podklasa: IgG1, kappa
StęŜenie mysich IgG mg/L: Patrz etykietka na fiolce.
Zaleca się rozcieńczenie przeciwciał MIC2, 12E7 w stosunkach 1:50 do 1:75 w przypadku metody LSAB stosowanej na skrawki tkankowe
utrwalone w formalinie i zatopione w parafinie. Informacje te są jedynie wytycznymi, gdyŜ optymalne stęŜenie przeciwciał powinno zostać
ustalone przez kaŜde laboratorium uŜywające danego produktu.
Antygen
Acute lymphocytic leukemia T-cells1
Charakterystyka
Przeciwciało MIC2, 12E7 rozpoznaje produkty genu MIC2, a jego reaktywność jest podobna, jak nie identyczna, jak przeciwciał
monoklonalnych HBA-71 i RFB-1.3,6
Materiały wymagane, lecz niedostarczone
Zobacz „Ogólne instrukcje wykonywania odczynów immunohistochemicznych” firmy Dako i/lub instrukcje do systemu detekcji.
Środki ostroŜności
1. Odczynniki są przeznaczone dla przeszkolonych UŜytkowników.
2. Opisywany produkt zawiera silnie toksyczny związek — azydek sodu (NaN3), w czystej postaci. StęŜenie NaN3 występujące w
produkcie nie jest klasyfikowane jako niebezpieczne. Jednak w wyniku reakcji NaN3 z ołowiem lub miedzią, wchodzącymi w skład
instalacji kanalizacyjnych, mogą powstawać silnie wybuchowe azydki metali. Przy usuwaniu resztek odczynnika uŜywać duŜych ilości
wody do przepłukiwania, aby uniknąć gromadzenia się azydków w instalacji kanalizacyjnej.
3. Podobnie jak w przypadku kaŜdego produktu otrzymywanego z materiału biologicznego, naleŜy stosować odpowiednie procedury
postępowania.
4. NaleŜy stosować właściwe wyposaŜenie ochronne, zabezpieczające przed kontaktem odczynnika ze skórą bądź oczami.
5. Niewykorzystane odczynniki naleŜy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i ogólnokrajowymi.
(113219-001)
303356PL_001 s. 1/2
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2–8 °C. Nie nale Ŝy uŜywać odczynników po upływie terminu waŜności podanego na fiolce. JeŜeli odczynniki
są przechowywane w warunkach innych niŜ podane na ulotce dołączanej do opakowania, UŜytkownik powinien je zweryfikować. Nie ma
jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego produktu. Dlatego równolegle z odczynami na materiale pochodzącym od
pacjentów naleŜy wykonywać dodatnie i ujemne próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie moŜna wyjaśnić
róŜnicami w procedurach laboratoryjnych, gdy podejrzewa się problem z przeciwciałem, naleŜy się skontaktować z działem wsparcia
technicznego firmy Dako.
Przygotowanie próbek
Skrawki parafinowe
MIC2, 12E7 moŜna uŜywać na skrawkach tkankowych utrwalonych w formalinie, a poźniej zatopionych w parafinie. Nie poleca się
wcześniejszego stosowania enzymów proteolitycznych, poniewaŜ mogą one powodować mniejszą intensywność zabarwienia.
MroŜone skrawki tkankowe i rozmazy komórkowe
MIC2, 12E7 moŜna takŜe uŜywać do barwienia mroŜonych skrawków tkankowych oraz rozmazów komórkowych.
Instrukcja barwienia
Stosować się do instrukcji zawartych w opisach wybranych metod barwienia.
Interpretacja wyników barwienia
Ekspresję anti-MIC2 obserwuje się na błonie komórkowej.
Charakterystyka występowania
Komórki prawidłowe
Produkt genu MIC2 ulega ekspresji na błonie komórkowej niektórych limfocytów ( szpik kostny, węzły chłonne oraz śledziona), tymocytów
rdzeniowych, komórek warstwy ziarnistej jajnika, większości komórek wysp trzustkowych Langerhansa, komórkach Sertoliego jąder oraz
niekiedy na komórkach śródbłonka w pojedynczych naczyniach krwionośnych.6
Komórki nowotworowe
Badania na ponad 70 róŜnych nowotworach wykazały dodanią reakcję immunohistochemiczną tylko w przypadku nowotworów OUN takich
jak: glioblastoma i ependymoma oraz wybranych przypadkach nowotworów trzustki pochodzenia wyspowego.6 Silna ekspresja błonowa
produktów genu MIC2 w Ewing's Sarcoma (ES) i neuroectodermal tumors (pPNET) pozwala na wyodrębnienie tych nowotworów spośród
guzów drobnookrągłokomórkowych wieku dziecięcego i dorosłego.4,6-9
Piśmiennictwo
1. Levy R, Dilley J, Fox RI, Warnke R. A human thymus-leukemia antigen defined by hybridoma monoclonal antibodies. PNAS USA
1979;76(12):6552-6
2. Herron R, Smith GA. Identification and immunochemical characterization of the human erythrocyte membrane glycoproteins that carry
the Xga antigen. Biochem J 1989;262(1):369-71
3. Latron F, Blanchard D, Cartron JP. Immunochemical characterization of the human blood cell membrane glycoprotein recognized by
the monoclonal antibodies 12E7. Biochem J 1987;247(3):757-64
4. Fellinger EJ, Garin-Chesa P, Su SL, DeAngelis P, Lane JM, Rettig WJ. Biochemical and genetic characterization of the HBA71 Ewing's
sarcoma cell surface antigen. Cancer Res 1991;51(1):336-40
5. Goodfellow PN, Tippett P. A human quantitative polymorphism related to the Xg blood groups. Nature 1981;289(5796):404-5
6. Ambros IM, Ambros PF, Strehl S, Kovar H, Gadner H, Salzer-Kuntschik M. MIC2 is a specific marker for Ewing's sarcoma and
peripheral primitive neuroectodermal tumors. Cancer 1991;67(1):1886-93
7. Fellinger EJ, Garin-Chesa P, Triche TJ, Huvos AG, Rettig WJ. Immunohistochemical analysis of Ewing's sarcoma cell surface antigen
p30/32mic2. Amer J Pathol 1991;139(2):317-25
8. Rettig WJ, Garin-Chesa P, Huvos AG. Ewing's sarcoma: new approaches to histogenesis and molecular plasticity. Lab Invest
1992;66(2):133-7
9. Fellinger EJ, Garin-Chesa P, Glasser DB, Huvos AG, Rettig WJ. Comparison of cell surface HBA71 (p30/32mic2), neuron specific
enolase, and vimentin in the immunohistochemical analysis of Ewing's sarcoma of bone. Amer J Surg Pathol 1992;16(8):746-55
Edition 06/07
(113219-001)
303356PL_001 s. 2/2