MonoMousAnti-Hum HLA-ABC Antigen

Monoclonal Mouse
Anti-Human
HLA-ABC Antigen
Klon W6/32
Nr kat. M0736
Przeznaczenie
Do diagnostyki in vitro.
Monoclonal Mouse Anti-Human HLA-ABC Antigen, Klon W6/32, jest przeznaczone do immunohistochemii.
Zestaw M0736 nie jest przeznaczony do typowania tkanek.
Interpretacji wyników może dokonywać osoba wykwalifikowana, w kontekście wywiadu chorobowego i innych
badań diagnostycznych.
Wprowadzenie
Antygeny HLA klasy I, HLA-A, -B i -C są szeroko rozpowszechnione na większości ludzkich komórek jądrzastych
(1). Jednakże intensywność ekspresji różni się znacznie – niektóre komórki są tyko lekko dodatnie np. tarczyc i
mięśni, podczas gdy inne ujemne, np. komórki wydzielania zewnętrznego trzustki i komórki rzęskowe trofoblastów.
Intensywność HLA-ABC może ulec zmianie również w stanach patologicznych. Na podstawie badań opisano, że
komórki złośliwe mogą tracić HLA-ABC (2), podczas gdy hepatocyty w poalkoholowym zapaleniu wątroby,
marskości żółciowej i przewlekłym, czynnym zapaleniu wątroby wykazują ekspresję HLA-ABC (3) w
przeciwieństwie do zdrowych komórek hepatocytów wątroby w których HLA-ABC nie był wykryty. Wzrost ekspresji
HLA-ABC był obserwowany w włóknach mięśniowych z dystrofią mięśni, miopatii iinnych zaburzeniach mięśniowonerwowych (4).
Odczynnik dostarczony
Monoklonalne przeciwciało mysie w formie płynnej jako nadsącz kultury komórek przedializowane wobec
0,05 mol/L soli fizjologicznej buforowanej Tris-em (TRIS/HCl) o pH 7,2. Zawiera 15 mmol/L NaN3.
Klon: W6/32. Izotyp: IgG2a, kappa.
Stężenie Ig mysich: patrz etykietka na fiolce.
Swoistość
Anti-HLA-ABC Class I Antigen, W6/32 jest skierowany przeciw monomorficznemu epitopowi na polipeptydach o
masie 45 kDa, będących produktami loci HLA-A, -B i -C. Te glikozydowane polipeptydy są połączone
niekowalencyjnie z -2-mikroglobulinami, tworzącymi antygeny HLA-A, -B, i -C lub (czyli) antygeny klasy I
głównego kompleksu zgodności tkankowej (MHC) (5).
Środki ostrożności
1. Do stosowania przez osoby przygotowane zawodowo.
2. Produkt zawiera azydek sodowy (NaN3), odczynnik chemiczny silnie toksyczny w czystej postaci. W stężeniu
obecnym w produkcie, chociaż nie klasyfikowanym jako niebezpieczne, azydek sodowy może reagować z
elementami kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, tworząc silnie wybuchowe pochodne lub azydki tych
metali. Przy usuwaniu odpadów przepłukać odpływ dużą ilością wody, aby uniknąć tworzenia się azydków w
kanalizacji.
3. Jak w przypadku każdego materiału biologicznego należy stosować odpowiednie procedury.
Przechowywanie
Przechowywać w temp. 2-8 °C. Nie używać po upływie daty ważności wskazanej na opakowaniu. Jeśli
odczynniki były przechowywane w warunkach innych niż wskazane, użytkownik musi sprawdzić jakość
produktu. Nie ma wyraźnych oznak wskazujących na niestabilność produktu, dlatego równocześnie z próbkami
badanymi powinno się oznaczać wiarygodną kontrolę dodatnią i ujemną. Jeżeli uzyskuje się nieoczekiwane
wyniki bez zmiany procedur laboratoryjnych i można podejrzewać, że dzieje się to z winy przeciwciała, należy
skontaktować się z serwisem technicznym firmy Dako.
Przygotowanie próbek
Skrawki parafinowe: Przeciwciało nie nadaje się do znakowania skrawków tkanki utrwalonych w formalinie i
zatopionych w parafinie.
Skrawki kriostatowe i preparaty komórkowe: przeciwciało nadaje się do znakowanie skrawków kriostatowych
utrwalonych w acetonie lub utrwalonych rozmazów komórek.
Procedura barwienia
Rozcieńczenie: Monoclonal Mouse Anti-Human HLA-ABC Antigen, nr kat. M0736 może być używane w
zakresie rozcieńczeń 1:50-1:100, gdy stosuje się go na skrawki kriostatowe tkanki utrwalane acetonem lub na
utrwalone rozmazy komórek, po 30 min. inkubacji z pierwotnym przeciwciałem w temperaturze pokojowej.
Optymalne warunki mogą się różnić zależnie od próbki i metod jej przygotowania, i powinny zostać dobrane w
każdym laboratorium. Zalecaną kontrolą ujemną jest Dako Mouse IgG2a, nr kat. X0943, rozcieńczone do
takiego samego stężenia przeciwciał IgG mysich jak roztwór pierwotnego przeciwciała. Jeśli nie udowodniono
trwałości przeciwciała i kontroli ujemnej w danej metodzie, zaleca się rozcieńczanie tych odczynników tuż przed
użyciem lub rozcieńczanie w Antibody Diluent, nr kat. S0809. Dodatnia i ujemna kontrola powinny być
oznaczane razem z materiałem badanym.
Uwidocznienie: Zalecane są zestawy odczynnikowe DAKO LSAB™+/HRP, nr kat. K0679, oraz DAKO
EnVision™+/HRP, nr kat. K4004 i K4006. Do oznaczania skrawków kriostatowych i preparatów komórkowych
w przypadku gdy problemem jest barwienie endogennej peroksydazy, wskazaną alternatywą jest zestaw Dako
APAAP, nr kat. K0670. Procedura wykonania jest opisana w każdym z zestawów.
Opis wyników
(111622-003)
Antygeny HLA klasy I, HLA-A, -B i -C są szeroko rozpowszechnione na większości ludzkich komórek
jądrzastych (1).
M0736/PL/MTH/09.03.05 str. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Piśmiennictwo
1.
Daar AS, Fuggle SV, Fabre JW, Ting A, Morris PJ. The detailed distribution of HLA-A, B, C antigens in
normal human organs. Transplantation 1984;38:287-92.
2.
Fleming KA, McMichael A, Morton JA, Woods J, McGee JO. Distribution of HLA class I antigens in
normal human tissue and mammary cancer. J Clin Pathol 1981;34:779-84.
3.
Barbatis C, Woods J, Morton JA, Fleming KA, McMichael A, McGee JO. Immunohistochemical analysis
of HLA (A,B,C) antigens in liver disease using a monoclonal antibody. Gut 1981;22:985-91.
4.
Appleyard ST, Dunn MJ, Dubowitz V, Rose ML. Increased expression of HLA ABC class I antigens by
muscle fibres in Duchenne muscular dystrophy, inflammatory myopathy, and other neuromuscular
disorders. Lancet 1985;i:361-3.
5.
Barnstable CJ, Bodmer WF, Brown G, Galfre G, Milstein C, Williams AF, et al. Production of monoclonal
antibodies to group A erythrocytes, HLA and other human cell surface antigens - new tools for genetic
analysis. Cell 1978;14:9-20.
Objaśnienia symboli
(111622-003)
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdź w instrukcji
stosowania
Zużyć przed
Producent
M0736/PL/MTH/09.03.05 str. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17