SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal Nr kat

SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal
Nr kat. Y5405
Przeznaczenie
Do badań diagnostycznych in vitro.
Sonda SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal, jest przeznaczona do wykrywania delecji
obejmujących gen SIL na chromosomie 1p32 przy zastosowaniu techniki fluorescencyjnej hybrydyzacji in situ
(FISH). Podczas stosowania sondy na próbkach cytologicznych zaleca się stosowanie zestawu Dako Cytology
FISH Accessory Kit, nr kat. K5499.
Interpretację wyników powinien przeprowadzić pracownik uprawniony do wykonywania takich badań w oparciu
o historię choroby pacjenta oraz inne testy diagnostyczne.
Wstęp
Ludzki gen TAL1 (1) (równieŜ znany pod nazwą SCL i TCL5) składa się z 6 eksonów obejmujących ~16 kb na
chromosomie 1 pasma p32 (2). Gen TAL1 koduje czynnik transkrypcji z sekwencją heliks-pętla-heliks (HLH)
(3). Gen SIL składa się z 18 eksonów obejmujących ~65 kb (4) i jest ulokowany blisko genu TAL1. Obserwuje
się podmikroskopową delecję eksonu SIL lub translokacji obejmującej gen TAL1 (5). Translokację TAL1
zidentyfikowano z róŜnymi parami chromosomowymi (6). Dwie sondy DNA stosowane do wykrywania za
pomocą techniki FISH sub-delecji obejmującej gen SIL są przeznaczone do hybrydyzacji fragmentów do genu
SIL i genu TAL1. Współlokalizacja sond daje sygnał Ŝółty, natomiast zdarzenia sub-delecji w regionie
powodują usunięcie czerwonego (czerwień teksańska, Texas Red) sygnału i pozostawienie oddzielnego
zielonego (fluoresceina) sygnału.
Cel (czerwony)
Sonda DNA znakowana Texas Red przyłącza się do obszaru 67 kb genu SIL na chromosomie 1p32.
Cel (zielony)
Sonda DNA znakowana fluoresceiną przyłącza się do obszaru telomeru 566 kb do genu TAL1 na chromosomie
1p32.
dstęp próbników:
Odstęp pomiędzy próbnikiem DNA oznakowanym odczynnikiem Texas-Red i próbnikiem DNA oznakowanym
fluoresceiną wynosi 34 kb.
Odczynnik dostarczony
Sonda SIL-TAL1 FISH DNA Probe, Sub-Deletion Signal, stanowi mieszaninę dwóch sond DNA znakowanych
fluorochromem z nieznakowanymi sondami blokującymi PNA. Sondy DNA znajdujące się w mieszaninie
obejmują sondę znakowaną fluoresceiną i sondę znakowaną Texas Red i naleŜy je stosować wraz z zestawem
Dako Cytology FISH Accessory Kit, nr kat. K5499 na próbka cytologicznych. Odczynnik jest dostarczany w
postaci płynnej w roztworze hybrydyzacji zawierającym 45% formamid, 10% siarczan dekstranu, 300 mmol/L
NaCl, 5 mmol/L fosforan i środek blokujący. Jedna fiolka zawiera 200 µL wystarczające na wykonanie 20
testów (10 µL na test).
Swoistość
99,3%. Określona jako średnia z 6 niezaleŜnych zliczeń 1050 komórek z normalnej krwi obwodowej.
Czułość
99,4%. Określona jako średnia z 6 niezaleŜnych zliczeń 1050 komórek w linii komórek o dodatniej subdelecji
SIL-TAL1 CCRF-CEM (7).
Wartość graniczna
Podczas liczenia 50 komórek, próbki z ponad 3 zdarzeniami subdelecji sygnałów naleŜy uwaŜać za dodatnie w
zakresie delecji SIL-TAL1. W oparciu o swoistość i czułość sondy zapewnia to, Ŝe 99% wszystkich próbek
zawierających poniŜej 2% komórek ze zdarzeniami sub-delecji sygnału zostanie scharakteryzowanych jako
ujemne w zakresie sub-delecji, natomiast 99% wszystkich próbek zawierających ponad 10% komórek ze
zdarzeniami sub-delecji sygnału zostanie scharakteryzowanych jako dodatnie w zakresie sub-delecji. W
przypadku wątpliwości naleŜy wykonać ponowne zliczenie próbki.
Środki ostroŜności
1. Do stosowania przez wyszkolony personel
2. Odczynnik zawiera ≥25-<50% formamid i ≥1-<3% chlorek sodu. Produkt jest oznaczony następującymi
symbolami:
(128820-001)
P04174PL_01_Y540529-2/2015.10 p. 1/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Niebezpieczeństwo
H360D
P201
P280
MoŜe działać szkodliwie na dziecko w łonie matki.
Przed uŜyciem zapoznać się ze specjalnymi środkami ostroŜności..
Stosować rękawice ochronne. Nosić okulary ochronne lub ochronę twarzy. Stosować
odzieŜ ochronną.
W PRZYPADKU naraŜenia lub styczności: Zwrócić się o pomoc lekarską.
Przechowywać pod zamknięciem.
Zawartość i pojemnik usuwać zgodnie z lokalnymi, regionalnymi, krajowymi i
międzynarodowymi przepisami.
P308 + P313
P405
P501
Przechowywanie
Przechowywać w ciemnym miejscu w temp. 2-8 °C. Nie stosować po upływie terminu waŜności podanego na
opakowaniu. JeŜeli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niŜ podane na ulotce dołączanej do
opakowania, UŜytkownik powinien je zweryfikować. Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o
niestabilności tego produktu. Z tego względu jednocześnie z badaniem próbek pochodzących od pacjentów,
naleŜy wykonywać dodatnie i ujemne próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego
nie moŜna wyjaśnić róŜnicami w procedurach laboratoryjnych, gdy podejrzewa się problem z przeciwciałem,
naleŜy się skontaktować z działem wsparcia technicznego firmy Dako.
Piśmiennictwo
1. Finger LR, Kagan J, Christopher G, Kurtzberg J, Hershfield MS, Nowell PC, et al. Involvement of the TCL5
gene on human chromosome 1 in T-cell leukemia and melanoma. Proc Natl Acad Sci USA 1989;86:503943.
2. Göttgens B, Gilbert JGR, Barton LM, Grafham D, Rogers J, Bentley DR, et al. Long-range comparison of
human and mouse SCL loci: Localized regions of sensitivity to restriction endonucleases correspond
precisely with peaks of conserved noncoding sequences. Genome Res 2001;11:87-97.
3. Chen Q, Cheng JT, Tsai LH, Schneider N, Buchanan G, Carroll A, et al. The tal gene undergoes
chromosome translocation in T cell leukemia and potentially encodes a helix-loop-helix protein. EMBO J
1990;9:415-24.
4. Aplan PD, Lombardi DP, Kirsch IR: Structural characterization of SIL, a gene frequently disrupted in T-cell
acute lymphoblastic leukemia. Mol Cell Biol 1991;11:5462-9.
5. Brown L, Cheng, JT, Chen Q, Siciliano MJ, Crist W, Buchanan G, et al. Site-specific recombination of the
tal-1 gene is a common occurrence in human T cell leukemia. EMBO J 1990;9:3343-51.
6. van der Burg M, Poulsen TS, Hunger SP, Beverloo HB, Smit EME, Vang-Nielsen K, et al. Split-signal FISH
for detection of chromosome aberrations in acute lymphoblastic leukemia using a new PNA-based blocking
method. Leukemia 2004;18:895-908.
7. Cell line CCRF-CEM provided by DSMZ-German Collection of Microorganisms and Cell Cultures,
Braunschweig, Germany.
Objaśnienia s ymboli
(128820-001)
Nu mer katalo gow y
Tempe ratura
p rzecho wywan ia
Zu Ŝyć p rzed
Wyrób medyczn y d o
di agn ostyki in vitro
C hron ić przed światłe m
Produ cent
Spra wdzi ć w i nstrukcji
stosow ania
N umer serii
Piktogra m GHS
(dział śro dki stroŜno ści
P04174PL_01_Y540529-2/2015.10 p. 2/2
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17