Ocena zdolności buforowej śliny oraz flory bakteryjnej jamy ustnej
Transkrypt
Ocena zdolności buforowej śliny oraz flory bakteryjnej jamy ustnej
Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Ocena zdolności buforowej śliny oraz flory bakteryjnej jamy ustnej u pacjentów z oligodoncją uzębienia stałego – doniesienie wstępne Assessment of the buffer capacity of saliva and oral flora in patients with oligodontia of permanent teeth - a preliminary report B C E F Agnieszka Kornet 1 Dorota Maciejak 2 B D E Dorota Olczak-Kowalczyk 3 D E Maria Dąbkowska 4 D Justyna Cieślik 5 D Małgorzata Zadurska 6 A B D E Wkład autorów: A – Plan badań; B – Zbieranie danych; C – Analiza statystyczna; D – Interpretacja danych; E – Redagowanie pracy; F – Wyszukiwanie piśmiennictwa Authors’ Contribution: A – Study design; B – Data Collection; C – Statistical Analysis; D – Data Interpretation; E – Manuscript Preparation; F – Literature Search 1,2,6 3 4 5 Zakład Ortodoncji, Warszawski Uniwersytet Medyczny Department of Orthodontics, Medical University of Warsaw Zakład Stomatologii Dziecięcej, Warszawski Uniwersytet Medyczny Department of Paediatric Dentistry,Medical University of Warsaw Zakład Mikrobiologii, Warszawski Uniwersytet Medyczny Department of Microbiology, Medical University of Warsaw Zakład Mikrobiologii, CSK Banacha Department of Microbiology, Banacha Central Teaching Hospital lek.dent., wolontariusz, DDS, Volunteer, dr n. med., adiunkt; DDS, PhD, Assistant Professor, 3 dr hab. n. med., kierownik Zakładu Stomatologii Dziecięcej, DDS, PhD, Associated Professor, the Head of the Department of Paediatric Dentistry 4 dr n. med., wykładowca, DDS, PhD, Lecturer 5 mgr, asystent, DDS, Assistant, 6 dr hab. n. med., kierownik Zakładu Ortodoncji, DDS, PhD, Associated Professor, the Head of the Department of Orthodontics 1 2 Adres do korespondencji; correspondence adress: Zakład Ortodoncji WUM, Department of Orthodontics, Medical University in Warsaw ul. Nowogrodzka 59, pawilon 11 D1 02-005 Warszawa ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 163 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Streszczenie Abstract Termin oligodoncja dotyczy wrodzonego braku sześciu bądź więcej zawiązków zębów mlecznych, stałych lub obu rodzajów uzębienia, z wyłączeniem trzecich zębów trzonowych. U 57% pacjentów z oligodoncją występują zaburzenia w obrębie włosów, paznokci i/ lub gruczołów potowych oraz zmniejszone wydzielanie śliny. Cel pracy: Zbadanie zdolności buforowej śliny, składu i liczebności flory bakteryjnej oraz kolonii grzybów występujących w jamie ustnej u pacjentów z oligodoncją, wraz z analizą stanu uzębienia wyrażoną wskaźnikiem PUW (puw). Materiał: 29 pacjentów - 15 pacjentów z oligodoncją uzębienia stałego w grupie badanej (9 chłopców, 6 dziewcząt), 14 pacjentów bez wrodzonego braku zawiązków zębów stałych w grupie kontrolnej (10 chłopców, 4 dziewczęta), w wieku od 7 do 16 lat. Metody: Badanie stomatologiczne, analiza zdjęć pantomograficznych, test CRT Buffer zdolności buforowej śliny, CRT Bacteria obecności bakterii Streptococcus mutans i Lactobacillus acidophilus. Wyniki zostały przeanalizowane statystycznie w oparciu o test Fishera dla tablic czteropolowych. Wyniki: Najwyższy wskaźnik PUW w grupie badanej wynosił 6, zaś w grupie kontrolnej wynosił 16. U większości badanych pacjentów (po 10 z obu grup) występowała średnia zdolność buforowa śliny. Połowa pacjentów z grupy badanej i kontrolnej miała wysoki poziom Lactobacillus acidophilus. Liczne kolonie grzybów Candida albicans wyhodowano u 5 pacjentów z grupy badanej, a pojedyncze u 2 pacjentów z grupy kontrolnej. Wnioski: Pacjenci z oligodoncją wykazują niższe wartości wskaźnika PUW niż pacjenci z prawidłową liczbą zębów. Wyhodowanie licznych kolonii Candida albicans u pacjentów z oligodoncją wskazuje na konieczność wdrożenia odpowiedniej terapii oraz wymianę protez i aparatów ortodontycznych. (Forum Ortod. 2012; 8: 163 - 72). Oligodontia is defined as the congenital absence of six or more deciduous teeth, permanent teeth, or both, excluding third molars. 57% of patients with oligodontia display hair, nail and/or sweat gland problems, and decreased saliva secretion. Aim: The aim of the study was to investigate the buffering capacity of the saliva, the composition and the count of bacteria colonies and the fungal contamination present in the oral cavity of patients with oligodontia and to evaluate the dental status using the DMFT index. Material: Fifteen patients (9 boys, 6 girls) with oligodontia of permanent teeth (study group) and fourteen patients (10 boys, 4 girls) without congenital absence of permanent teeth (control group), totally 29 patients aged between 7 and 16 years. Methods: The dental examination, the analysis of panoramic radiographs, the CRT Buffer test and the CRT Bacteria test were used. The results were analysed statistically using the Fisher's four-fold contingency table test. Results: The highest registered DMFT score was 6 in the study group and 16 in the control group. The majority of the patients (10 in each of the two groups) had the average salivary buffer capacity. Significant changes in incidence of Lactobacillus acidophilus and Candida albicans have been noticed in certain groups of patients. Conclusions: Patients with oligodontia had lower DMFT scores, than patients with the normal number of teeth present. The high incidence of Candida albicans colonies in patients with oligodontia indicates the need of implementing appropriate treatment therapy. (Orthod. Forum 2012; 8: 163 - 72). Nadesłano: 28.11.2012 Przyjęto do druku: 21.12.2012 Słowa kluczowe: kolonie grzybów, liczebność bakterii, oligodoncja, wskaźnik PUW/puw, zdolność buforowa śliny Received: 28.11.2012 Accepted: 21.12.2012 Key words: oligodontia, buffer capacity of saliva, number of bacteria, fungi colonies, DMFT score Wstęp Introduction Termin oligodoncja odnosi się do wrodzonego braku sześciu bądź więcej zawiązków zębów mlecznych, stałych lub obu rodzajów uzębienia, z wyłączeniem trzecich zębów trzonowych (1,2). Zaburzenie to dotyczy najczęściej górnych i dolnych drugich zębów przedtrzonowych, zębów siecznych bocznych w szczęce oraz siecznych przyśrodkowych w żuchwie (3). Wielu pacjentów z tym zaburzeniem wykazuje także objawy ze strony innych struktur ektodermalnych (włosów, paznokci, skóry, gruczołów potowych). Wyróżnia The term oligodontia refers to the congenital absence of six or more germs of deciduous teeth, permanent teeth, or both, excluding third molars (1,2). This disorder usually affects upper and lower second premolars, upper lateral incisors and lower central incisors (3). Numerous patients with this disorder also display other symptoms in ectodermal structures, that are hair, nails, skin and sweat glands. Two types of oligodontia are distinguished: isolated oligodontia (I non-syndromic ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 164 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 się postać oligodoncji „czystą” (izolowaną, oligodontia/I, non-syndromic oligodontia) oraz współistniejącą z objawami dotyczącymi tkanek i narządów pochodzących z ektodermy i mezodermy (syndromic oligodontia, oligodontia/S) -1,4. Badania Bergendal'a i współ. (5) wykazały, że u 57% pacjentów z oligodoncją występują zaburzenia w obrębie włosów, paznokci i/ lub gruczołów potowych oraz zmniejszone wydzielanie śliny. Oligodoncja jest jednym z objawów dysplazji ektodermalnej. Czystą postać dysplazji ektodermalnej rozpoznaje się w przypadku występowania zaburzeń rozwojowych tkanek pochodzących tylko z zewnętrznego listka zarodkowego. Jeżeli zaburzeniom rozwojowym tkanek pochodzących z ektodermy towarzyszą nieprawidłowości w innych narządach i układach, wówczas rozpoznaje się zespół ektodermalny. W zespołach ektodermalnych występują zaburzenia rozwojowe tkanki mezodermalnej, np. niedorozwoje kości, polidaktylia, syndaktylia, ektrodaktylia, wady układu moczowo-płciowego, niedorozwój gruczołów sutkowych i wady serca (1). Etiopatogeneza choroby ma podłoże wieloczynnikowe. Zidentyfikowano szereg genów, których mutacje powodują nieprawidłowe interakcje ektoderma-mezenchyma na poziomie molekularnymi i są odpowiedzialne za powstanie fenotypu dysplazji ektodermalnej. Należą do nich geny: EDA, EDAR, XEDAR, NEMO, EDARADD, WNT10A (1,6,7,8). Dysplazja ektodermalna może być embriopatią, spowodowaną uszkodzeniem płodu szkodliwymi czynnikami działającymi w czasie ciąży, np. zakażeniem wirusowym, środkami chemicznymi, promieniowaniem jonizującym, chemioterapią, urazami lub zaburzeniami hormonalnymi (1). Typowy obraz kliniczny pacjenta dotkniętego tą chorobą objawia się cienką, aksamitną skórą, pozbawioną pigmentu, suchą, łuszczącą się, z wykwitami egzematycznymi. Pacjenci wykazują nadmierną wrażliwość na temperaturę, zaburzenia termoregulacji, zmniejszone wydzielanie potu, łez i śliny. Owłosienie jest zazwyczaj skąpe, cienkie, koloru blond, a paznokcie łamliwe, nieprawidłowo wykształcone. Częstym objawem współwystępującym jest zaburzenie liczby zębów – hipodoncja, oligodoncja lub anodoncja. oligodontia) and syndromic hypodontia with symptoms relating to tissues and organs from ectoderm and mesoderm (oligodontia/S) - 1,4. Bergendal et al. (5) have shown, that 57% of patients with oligodontia are suffering from problems with hair, nails and/or sweat glands and reduced saliva production. Oligodontia is one of the symptoms of ectodermal dysplasia. The isolated form of ectodermal dysplasia can be recognised in cases with the outer germ layer disturbances only. If developmental disorders of ectodermal tissues are accompanied with abnormalities in other organs and systems, then an ectodermal syndrome is diagnosed. Ectodermal syndromes are usually accompanied with developmental disorders of mesodermal tissue, such as bone hypoplasia, polydactyly, syndactyly, ectrodactyly, urogenital system disorders, underdeveloped mammary glands and heart disorders (1). Etiopathogenesis of the disease is multifactorial. A number of genes, whose mutations cause abnormal ectoderm-mesenchyme interactions at molecular level and are responsible for the formation of ectodermal dysplasia phenotype, were identified. These include: EDA, EDAR, XEDAR, NEMO, EDARADD, WNT10A genes (1,6,7,8). Ectodermal dysplasia can be an embryopathy caused by a damage to a foetus caused by the harmful factors during pregnancy, such as a viral infection, chemicals, ionising radiation, chemotherapy, trauma or hormonal disorders (1). Typical clinical symptoms include a thin, dry, flaky, pigment-free, velvety skin with the eczemic eruptions. Patients have also hypersensitivity to temperature, impaired thermoregulation, decreased sweat, tears and saliva production. Hair is usually sparse, thin, typically of blond colour, whereas nails tend to be brittle, undeveloped. A common, accompanying, symptom is the reduced number of teeth as hypodontia, oligodontia, anodontia. Cel pracy Purpose of the work Celem pracy było zbadanie zdolności buforowej śliny, składu i liczebności flory bakteryjnej oraz kolonii grzybów występujących w jamie ustnej u pacjentów z oligodoncją, w powiązaniu z analizą stanu uzębienia wyrażoną wskaźnikiem PUW (puw). The aim of the study was to investigate the buffering capacity of the saliva, the composition and the number of colonies of bacteria and fungal contamination, that occur in the oral cavity in patients with oligodontia, and to correlate it with their dental status evaluated using the DMFT index. ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 165 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Materiał i metody Material and methods Grupę badaną stanowiło 15 pacjentów, w tym 9 chłopców i 6 dziewcząt w wieku od 7 do 16 lat z oligodoncją uzębienia stałego. U 7 osób poza oligodoncją stwierdzono inne objawy dysplazji ektodermalnej dotyczące skóry i owłosienia (Tab. 1). Grupę kontrolną stanowiło 14 pacjentów w tym 10 chłopców i 4 dziewczęta w wieku od 7 do 16 lat, z prawidłową liczbą zawiązków zębów stałych (Tab. 2). U każdego pacjenta przeprowadzono standardowe badanie stomatologiczne. Oceniono wskaźnik PUW (puw w przypadku obecności zębów mlecznych). Wskaźnik ten oznacza: P – ząb z jednym lub kilkoma ubytkami próchnicy pierwotnej i/lub wtórnej, bądź opatrunkiem czasowym; U – ząb utracony lub usunięty z powodu próchnicy; W – ząb z jednym lub większą liczbą wypełnień, ale bez próchnicy wtórnej, bądź ząb pokryty koroną protetyczną z powodu próchnicy. Liczbę zawiązków zębów stałych oceniono na podstawie zdjęcia pantomograficznego. The material consisted of 15 patients, 9 boys and 6 girls, aged from 7 to 16 years with oligodontia in the permanent dentition. Seven patients have been diagnosed with other symptoms of ectodermal dysplasia, that affect skin and hair (Tab.1). The control group consisted of 14 patients, 10 boys and 4 girls, aged from 7 to 16 years with the normal number of permanent teeth (Tab.2). Each patient was examined using the standard dental examination. DMFT index was calculated. The index is defined as: D - a decayed tooth with one or more primary caries and/or secondary caries or with a temporary dressing; M - a missing tooth, that is lost or removed due to caries; FT - a filled tooth with one or more fillings, but without secondary caries, or a tooth covered with a prosthetic crown due to caries. The number of permanent tooth germs was calculated using panoramic radiographs. 2. 3. ♂ ♂ 5. 6. 7. ♀ ♀ ♂ 9. ♀ 4. 8. 10. 11. 12. ♂ ♂ ♀ ♀ ♂ 13. ♂ 15. ♂ 14. ♀ 15 13 12 0 4 5 0 4 0 7 12 16 0 2 3 5 3 0 15 6 4 13 + 1 + 3 5 + 10 4 1 12 6 3 12 15 3 9 6 + 4 - 1 2 0 + + + + + + + + + + + + + + + + + + + b.liczne C.albic. nieliczn C.tropic. + poj. C.albic. + + + + + + + + + + liczne C.albic. poj. C.albic. + + + + + + Objawy ED Liczba brak. zaw. z. stałych Grzyby + + + + + CRT Strept >10 5 CRT Strept. <10 5 6 CRT Lactob. >10 5 puw 5 CRT Lactob. <10 5 PUW 11 CRT Buffer niski Wiek ♂ CRT Buffer średni Płeć 1. CRT Buffer wysoki LP Tabela 1. Grupa badana: płeć, wiek, PUW/puw, CRT Buffer, CRT Bacteria, grzyby, liczba brakujących zawiązków zębów stałych, objawy dysplazji ektodermalnej. Table 1. Studied grup: sex, age, PUW/puw, CRT Buffer, CRT Bacteria, mycosis, number of congenital missing teeth, symptoms of ectodermal dysplasia. poj. C.famata 10 + 8 + 16 + 26 11 12 17 12 9 11 + + 16 + 14 + 11 9 12 ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 166 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 6. 7. 8. 9. 10. 11. 12. 13. 14. ♂ ♂ ♂ ♂ ♂ ♂ ♂ ♂ ♀ 13 3 - 12 7 11 15 12 11 10 9 1 8 13 8 2 0 7 0 4 10 7 - + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + + Zdolność buforową śliny zbadano testem CRT Buffer firmy Ivoclar Vivadent (Ryc. 1). Badaną ślinę uzyskano od pacjentów po 5 minutach żucia parafiny. Następnie naniesiono ją na paski testowe zawarte w zestawie. Po kolejnych 5 minutach porównano kolor uzyskany na pasku testowym z tabelą barw identyfikującą zakres zdolności buforowej śliny. Wyniki zostały przedstawione w skali trzystopniowej – zdolność buforowa śliny wysoka (kolor niebieski) ; średnia (kolor zielony); niska (kolor żółty). Obecność bakterii Streptococcus mutans i Lactobacillus acidophilus zbadano testem CRT Bacteria firmy Ivoclar Vivadent, które przed użyciem przechowywano w lodówce w temperaturze 3-8 °C (Ryc. 2, 3). Pacjenci zostali poinformowani o konieczności zaniechania stosowania płynów do płukania jamy ustnej na minimum 12 godzin przed badaniem. Ślina stymulowana uzyskana po 5 minutach żucia parafiny została naniesiona po obu stronach nośnika z agarem. Nośnik zamknięto szczelnie w probówce, na dnie której wcześniej umieszczono tabletkę NaHCO3. Probówkę umieszczono w inkubatorze Cultura/Ivoclar Vivadent w temperaturze 37 °C / 99 °F na 48 godzin. Po odpowiednim czasie inkubacji porównano gęstość wyhodowanych na nośnikach kolonii bakterii z graficznie przedstawionymi wynikami na wzorcowej tabeli zawartej w zestawie. Pacjentów, którzy uzyskali wyniki liczebności bakterii wynoszące 105 - CFU lub powyżej, zakwalifikowano do grupy o zwiększonym ryzyku próchnicy. + + + + + + + + + + + + Grzyby CRT Strept >10 5 CRT Strept. <10 5 1 5 - CRT Lactob. >10 5 puw 6 4 12 4 16 CRT Lactob. <10 5 PUW 9 14 16 7 12 CRT Buffer niski Wiek ♂ ♂ ♀ ♀ ♀ CRT Buffer średni Płeć 1. 2. 3. 4. 5. CRT Buffer wysoki LP Tabela 2. Grupa kontrolna: płeć, wiek, PUW/puw, CRT Buffer, CRT Bacteria, grzyby. Table 2. Control grup: sex, age, PUW/puw, CRT Buffer, CRT Bacteria, mycosis. + poj. C.albic. + poj. C.famata + + + + + + + The buffer capacity of saliva was examined using Ivoclar Vivaden tCRT Buffer tests. Saliva samples were obtained after 5 minutes of chewing paraffin and then they were the outer germ layer test strips included in the kit. After following 5 minutes, the obtained colour on the test strips was compared with the table colour to identify buffering capacity of saliva. The results were shown in the threecolour scale: blue for high, green for medium, and yellow for low buffer capacity. The presence of the Streptococcus mutans and Lactobacillus acidophilus bacteria was examined using the Ivoclar Vivadent CRT Bacteria test, that had been stored in a refrigerator at 3-8 °C before the test. The patients were instructed to refrain from usage of any liquid mouthwash at least 12 hours before the test. Stimulated saliva was obtained after 5 minutes of chewing a paraffin stick and then applied on both sides of the agar carrier. The carrier was sealed in a tube with the NaHCO3 tablet. The tube was placed in a Cultura/Ivoclar Vivadent incubator at 37 °C / 99 °F for 48 hours. The density of bacteria colonies on the carrier was compared with the graphic results in the table included in the test. The patients, who had the bacteria level of 105 CFU or above, where qualified to a group with a high risk of caries group. The count of the Candida albicans colony was determined after application of small quantity of the previously stimulated saliva on a plate with a Saburauda agar. After 2 ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 167 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Liczbność kolonii grzybów Candida albicans określano po naniesieniu na płytkę z pożywką z agaru Saburauda niewielkiej ilości uzyskanej wcześniej śliny stymulowanej (Ryc. 4). Po 2–4 dniach inkubacji w temperaturze pokojowej porównywano liczebność wyhodowanych kolonii grzyba. Wyniki zostały przeanalizowane statystycznie w oparciu o test Fishera dla tablic czteropolowych. to 4 days of incubation at the room temperature, the count of the fungus colony was calculated and compared between the groups. The results have been analysed statistically using the four-table arrays Fisher's test. Ryc. 2. Test CRT Bacteria - miano bakterii Streptococcus mutans powyżej 105 CFU. Fig. 2. CRT Bacteria test - the incidence of Streptococcus mutans greater than 105 CFU. Ryc. 1. Test CRT Buffer - średnia zdolność buforowa śliny. Fig. 1. CRT Buffer test - the average buffer capacity of saliva. Ryc. 3. Test CRT Bacteria - miano bakterii Lactobacillus acidophilus powyżej 105 CFU. Fig. 3. CRT Bacteria test - the incidence of Lactobacillus acidophilus colonies greater than 105 CFU. Ryc. 4. Liczne kolonie grzybów Candida albicans na płytce z pożywką z agaru Sabuarda. Fig. 4. Numerous colonies of Candida albicans on a plate with a Saburauda agar. ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 168 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Wyniki Results W grupie badanej najwyższy wskaźnik zarówno PUW, jak i puw w wynosił 6. Najniższy wynik PUW (puw) wynosił 0. W grupie kontrolnej najwyższy PUW wynosił 16, zaś puw 7. Najniższe wartości tych wskaźników wyniosły 0. W grupie kontrolnej u 9 osób nie obliczono puw ze względu na brak zębów mlecznych. Intensywność próchnicy wyrażona wzorem PUW (puw)/ liczbę osób z próchnicą dla zębów stałych w grupie badanej wynosiła 3,27, zaś dla zębów mlecznych 2,47. W grupie kontrolnej uzyskano odpowiednio wynik 6,64 dla zębów stałych oraz 3,40 dla zębów mlecznych. W grupie badanej zdolność buforowa śliny określona testem CRT Buffer była wysoka u 4, a niska u 1 pacjenta. U większości badanych pacjentów z oligodoncją (10 osób) występowała średnia zdolność buforowa śliny. W grupie kontrolnej uzyskano zbliżone wyniki – 10 osób ze średnią zdolnością buforową śliny, 1 z niską i 3 z wysoką. Testy liczebności bakterii CRT Bacteria wykazały liczbę kolonii L. acidophilus powyżej 105 CFU u 7 pacjentów z grupy badanej, podczas gdy liczba kolonii S. mutans powyżej 105 CFU występowała tylko u 1 pacjenta. Wśród osób z grupy kontrolnej wyniki były zbliżone - u 7 osób liczebność kolonii L. acidophilus była powyżej 105 CFU, zaś liczebność kolonii S. mutans poniżej 105 CFU występowała u wszystkich badanych. W grupie badanej wyhodowano liczne kolonie Candida albicans, pojedyncze Candida tropicalis i Candida famata u 5 pacjentów. W grupie kontrolnej jedynie u 2 pacjentów wyhodowano pojedyncze kolonie Candida albicans. Istotny statystycznie związek zaobserwowano tylko między liczebnością L. acidophilus, a występowaniem grzybów w grupie badanej. U wszystkich pacjentów, u których uzyskano wysoką tj. powyżej 105 CFU liczebność bakterii L. acidophilus, wyhodowano także kolonie grzybów. The highest registered DMFT and dmtf score was 6 in the study group and 16 in the control group. The lowest level of the DMFT (dmft) score was 0. In the control group the highest DMFT level was 16, whereas the dmft score was at seven. The lowest rates were 0. Due to the lack of deciduous teeth, the dmft score was not assessed in 9 patients in the control group. The intensity of caries in the study group assessed by the DMFT (dmft) score divided by the number of patients was 3.27 for the permanent teeth and 2.47 for the deciduous teeth. In the control group, the results were 6.64 and 3.40 for the permanent and deciduous teeth respectively. In the study group the buffer capacity of saliva determined by CRT Buffer test was high in 4 patients and low in 1 patient. The majority of the patients with oligodontia (10 patients) had the average buffer capacity of saliva. In the control group, similar results were obtained: 10 patients had the average buffer capacity of saliva, 1 patient had low and 3 had high buffer capacity of saliva. CRT Bacteria Tests in the test group have shown the incidence of L. acidophilus colonies in 7 patients greater than 10 5 CFU, whereas S. mutans remained above 10 5 CFU in only one patient. The results in the control group were similar: 7 patients had the count of L. acidophilus more than 10 5 CFU, whereas the count of S. mutans colonies remained below 10 5 CFU in all patients. Numerous colonies of Candida albicans, single Candida tropicalis and Candida famata colonies were grown in 5 patients from the study group. In the control group single colonies of Candida albicans have been grown only in 2 patients. The only significant association has been observed between the count of L. acidophilus and the presence of fungi in the study group. All patients who had achieved high, i.e. above 10 5 CFU count of L. acidophilus bacteria, also had fungal colonies. Dyskusja Discussion Wysoka liczebność kolonii L. acidophilus w połączeniu ze wzrostem kolonii C. albicans u pacjentów z oligodoncją może wiązać się z użytkowaniem przez nich protez dziecięcych i aparatów ortodontycznych. Kolonizacja paciorkowców próchnicotwórczych w jamie ustnej modyfikowana jest zespołem różnych czynników, m.in. liczbą wyrzniętych zębów u dziecka (9,10,11). Mogłoby to tłumaczyć niski poziom wyhodowanych bakterii w jamie ustnej pacjentów z oligodoncją, stanem ich układu immunologicznego i rodzajem diety (9,12,13). Innym argumentem przemawiającym za niskim poziomem S. mutans w obu grupach pacjentów jest stabilizacja The high number of L. acidophilus colonies in combination with increase of C. albicans colonies in patients with oligodontia may be related to the use of their infant prostheses and orthodontic appliances. Cariogenic streptococci colonisation in the oral cavity is known to be modified by number of various factors, including the number of erupted teeth in infants (9,10,11). The low level of cultured bacteria in the oral cavity of patients with oligodontia could be explained by the state of their immune system and the type of diet (9,12,13). Another factor related to the presence of low level of S. mutans in both groups is the relatively ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 169 Badania kliniczne Tom 8, nr 4, 2012 Clinical research Volume 8, no 4, 2012 poziomu flory bakteryjnej. Badania szwedzkie wykazały, że flora bakteryjna po 10 roku życia może ulegać jedynie niewielkim zmianom, a u osób dorosłych pozostaje względnie stabilna (9,14). Bakterie L. acidophilus odpowiadają za zaawansowanie procesu próchnicowego, podczas gdy bakterie S. mutans są odpowiedzialne za jego zapoczątkowanie. Sprzyjające warunki dla wzrostu tych bakterii stwarzają częste spożywanie węglowodanów oraz występujące ubytki próchnicowe (15,16,17,18,19). Lara-Carillo i wsp. przeprowadzili w 2010 roku badania dotyczące zmiany warunków panujących w jamie ustnej u dzieci po rozpoczęciu leczenia ortodontycznego (20). Wskaźniki PUW w grupie badanej były wyższe u dziewcząt, niż u chłopców, co także stwierdzono w przeprowadzonym badaniu: najwyższe wyniki PUW zaobserwowano u dziewcząt zarówno w grupie kontrolnej, jak i badanej. Użytkowanie aparatów ortodontycznych, stwarza dodatkowe miejsca retencyjne sprzyjające odkładaniu płytki nazębnej, nie zmieniając składu flory bakteryjnej jamy ustnej (20,21). Dlatego tak istotne jest zwrócenie szczególnej uwagi pacjentom użytkującym aparaty ortodontyczne, na utrzymanie właściwej higieny jamy ustnej. W przeprowadzonych badaniach stwierdzono większą intensywność próchnicy wśród pacjentów z grupy kontrolnej, w porównaniu z pacjentami z oligodoncją. Niższy wskaźnik PUW (puw) u pacjentów z grupy badanej ma prawdopodobnie związek z mniejszą liczbą zębów obecnych w jamie ustnej, jednakże ilość wyhodowanych kolonii bakterii L. acidophilus jest znacznie wyższa w tej grupie pacjentów, w porównaniu z grupą kontrolną. Mniejsza frekwencja próchnicy w grupie badanej może też być związana z ułatwionym samooczyszczaniem zębów przez ślinę u pacjentów z oligodoncją – obserwuje się u nich szparowatość spowodowaną zmniejszonymi wymiarami i zmienionym kształtem zębów obecnych w jamie ustnej. Niezbędne są dalsze badania, obejmujące większa grupę pacjentów oraz analiza ilości wydzielanej śliny wśród osób z oligodoncją w celu określenia tej zależności. W 2003 roku Nordgarden i współ. (22) opublikowali wyniki pracy, w której porównywali ilość wydzielanej śliny stymulowanej i niestymulowanej u pacjentów z dysplazją ektodermalną - ze szczególnym uwzględnieniem różnic w funkcjonowaniu ślinianek przyusznych i podżuchwowych. U 33% badanych ilość śliny stymulowanej i niestymulowanej była zmniejszona. Zaburzenia dotyczyły w większym stopniu ślinianki podżuchwowej niż przyusznej. W 1999 r. Almstahl i współ. przedstawili badania, w których udowodnili zależność między liczebnością kolonii bakterii L. acidophlilus, a ilością wydzielanej śliny stymulowanej u dorosłych (23,24). Niska zdolność buforowa śliny wpływa na wzrost liczebności kariogennej mikroflory (23,25). W niniejszych badaniach pacjenci z niską zdolnością buforową wykazywali również liczebność bakterii poniżej 105 CFU. Jednak w przypadku grupy constant level of bacteria. Swedish studies have shown, that the bacterial flora after 10 years of age can undergo only minor changes, whereas it remains relatively stable in adults (9,14). L. acidophilus bacteria are responsible for the progress of caries, while S. mutans are responsible for its initiation. Frequent consumption of carbohydrates and the presence of caries create favourable conditions for the growth of these bacteria (15,16,17,18,19). In 2010 Lara-Carillo et al. (20) were evaluating changes in the oral cavity in infants after the start of their orthodontic treatment. The DMFT level were higher in girls than in boys in the study group, which also refers to the present study: the highest DMFT level have been observed in females in the control group. The use of orthodontic appliances creates additional retention for the plaque accumulation, but without changing the composition of the bacterial flora in the oral cavity (20,21). Therefore, it is important to maintain proper oral hygiene in patients who are using orthodontic appliances. The higher intensity of dental caries was present in the control group than in patients with oligodontia in this study. Lower rates of DMFT (dmft) in patients in the study group are probably related to a lower number of teeth present in the mouth, but at the same time the number of colonies of L. acidophilus was much higher in the study group than in the control group. Lower incidence of caries in patients with oligodontia may be also associated with the facilitated self-cleaning of their teeth with saliva because of the presence of reduced tooth size and tooth malformation. In order to clarify this relationship a more detailed examination should be performed, including increasing number of patients and saliva analysis in patients with oligodontia. In 2003 Nordgarden (22) published the study, in which he compared the amount of stimulated and unstimulated saliva in patients with ectodermal dysplasia in relation to differences in the functioning of submandibular and parotid glands. In 33 per cent of the patients the amount of stimulated and unstimulated saliva was reduced. The submandibular gland was more affected than parotid gland. In 1999 Almstahl et al. published the study in which they evaluated the relationships between the count of L. acidophilus and the amount of stimulated saliva in adults (23,24). Low buffer capacity of saliva affects growth of the cariogenic microflora (23,25). In the presented study, the patients with the low buffer capacity had also smaller bacterial count of less than 105 CFU. However, in the study group it concerned a patient lacking the tooth 26 with 0 DMFT(dmft) ratio. LaraCarillo et al. (20) had shown, that the use of orthodontic appliances increases both the salivary flow and its buffer ability. In particular, this relationship applies to male ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 170 Badania kliniczne Clinical research Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 badanej dotyczyło to pacjenta z brakiem 26 zawiązków zębów stałych i wskaźnikami PUW (puw) równymi 0. Lara-Carillo i współ. (20) udowodnili, że użytkowanie aparatów ortodontycznych zwiększa zarówno ilość wydzielanej śliny, jak i podwyższa jej zdolność buforową. Szczególnie zależność ta odnosi się do mężczyzn, którzy według światowych doniesień, fizjologicznie wydzielają więcej śliny o wyższej niż u kobiet zdolności buforowej (20,26,27,28,29). Powyższe spostrzeżenia pokrywają się także z opisywanym badaniem; wśród pacjentów z oligodoncją 3 z 4 pacjentów z wysoką zdolnością buforową to chłopcy, w grupie kontrolnej wszyscy pacjenci są płci męskiej. Interesujący jest fakt, iż tylko u 1 osoby zarówno w grupie badanej, jak i kontrolnej wysoka zdolność buforowa śliny współwystępuje z niską zawartością kolonii L. acidophilus i S. mutans. Bergendal i współ. (5) potwierdzili związek między ilością wydzielanej śliny, a oligodoncją. Według autorów połowa pacjentów dotkniętych tym zaburzeniem wykazywała jeden lub więcej symptomów z tkanek pochodzenia ektodermalnego, a jedna trzecia niskie wydzielanie śliny. Ze względu na konieczność objęcia szczególną opieką pacjentów z oligodoncją oraz zmianę warunków panujących w jamie ustnej w trakcie leczenia ortodontycznego, należy zwrócić uwagę na dokładną analizę czynników ryzyka występowania próchnicy w tej grupie osób (30). patients, who secrete more saliva with higher buffering capacity than females (20,26,27,28,29). Those findings are similar the results of the present study, because three of four patients with oligodontia with high buffering capacity were boys whereas in the study group all those patients were males. It is interesting, that only in one patient in both groups, the high buffer capacity of saliva occurs simultaneously with the low count of L. acidophilus and S. mutans colonies. Bergendal et al. (5) had confirmed the relationship between the amount of saliva and oligodontia. According to the authors, half of the patients suffering from this disorder presented one or more symptoms of ectodermal tissue involvement and one third had low salivary secretion. The emphasis should be put on a detailed analysis of cariogenic risk factors in the population of patients with oligodontia, due to the need for good dental care and changing conditions in their oral cavity during orthodontic treatment (30). Podsumowanie Conclusions Pacjenci z oligodoncją stanowią grupę chorych wymagających opieki wielospecjalistycznej od najmłodszych lat. Ze względu na niewielką liczbę zębów stałych u tych pacjentów, należy zwrócić szczególną uwagę na higienę jamy ustnej oraz zabiegi profilaktyczne i lecznicze mające na celu jak najdłuższe utrzymanie naturalnego uzębienia. Wydaje się także wskazane wykonywanie badań mykologicznych u tych pacjentów. Wyhodowanie kolonii Candida albicans wskazuje na konieczność wdrożenia odpowiedniej terapii oraz wymianę protez i aparatów ortodontycznych. Uzyskane w wyniki, ze względu na stosunkowo niewielką grupę pacjentów, wymagają kontynuacji i poszerzenia zakresu badań o ilość wydzielanej śliny oraz dokładną analizę stanu higieny jamy ustnej dotyczącą akumulacji płytki nazębnej. Patients with oligodontia represent a group of patients, who need multidisciplinary care from an early age. Due to the small number of permanent teeth in these individuals, it seems crucial to pay special attention to oral hygiene and preventive meausures aimed at preserving natural teeth as long as possible. It seems important to perform the mycological tests in those patients. Detection of Candida albicans colonies in patients with oligodontia indicates the need to implement appropriate treatment and replace dentures and orthodontic appliances. The present study should be continued on the larger number of patients with oligodontia to assess the saliva secretion and more detailed analysis of plaque accumulation. ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 171 Badania kliniczne Tom 8, nr 4, 2012 Volume 8, no 4, 2012 Piśmiennictwo / References 1. 2. 3. 4. 5. 6. 7. 8. 9. Clinical research 19. Zero DT. Dental caries process. Dent Clin North Am 1999; 43: 635-40. Zadurska M. Oligodoncja w aspekcie wybranych objawów dysplazji ektodermalnej. Rozprawa habilitacyjna, Warszawski Uniwersytet Medyczny, Warszawa 2011: 5-137. Nordgarden H, Jensen JL, Storhaug K. Oligodontia is associated with extra-oral ectodermal symptoms and low whole salivary flow rates. Oral Diseases 2001; 7: 226–32. Proffit WR, Sarver DM. Ortodoncja współczesna. Elsevier Urban & Partner, Wrocław 2009; tom I: 132. Parkin N, Elcock C, Smith RN, Griffin RC, Brook AH. The aetiology of hypodontia: The prevalence, severity and location of hypodontia within families. Arch Oral Biol 2009; 54s: 552-6. Bergendal B, Norderyd J, Bagesund M, Holst A. Signs and symptoms from ectodermal organs in young Swedish individuals with oligodontia. Int J Paediatr Dent 2006; 16: 320–6. 20. Lara-Carillo E, Montiel-Bastida NM, Sánchez-Pérez L, AlanísTavira J. Effect of orthodontic treatment on saliva, plaque and the levels of Streptococcus mutans and Lactobacillus. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 2010; 15: e924-9. 21. Gwinnett AJ, Ceen RF. Plaque distribution on bonded brackets: a scanning microscope study. Am J Orthod 1979; 75: 667-77. 22. Nordgarden H, Storhaug K, Lyngstadaas SP, Jensen JL. Salivary gland function in persons with ectodermal dysplasias. Eur J Oral Sci 2003; 111: 371-6. 23. G udkina J, Brinkmane A. Caries experience in relation to oral hygiene, salivary cariogenic microflora, buffer capacity and secretion rate in 6-year olds and 12 year olds in Riga. Stomatologija, Baltic Dent Maxillofac J 2008; 10: 76-80. 24. Almstahl A, Wikstrom M. Oral microflora in subjects with reduced salivary secretion. J Dent Res 1999, 78: 1410-6. Adaimy L, Chourey E, Mégarbané H, Mroueh S, Delague V, Nicolas E, et al. Mutation in WNT10A Is Associated with Autosomal Recessive Ectodermal Dysplasia: The Odontoonycho-dermal Dysplasia. Am J Hum Genet 2007, 81: 821-8. 25. Axelsson P. An introduction to risk prediction and preventive dentistry. Quintessence Publ Co 1999: 24-7. Gaide O. New Developments in the History of Hypohidrotic Ectodermal Dysplasia. Dermatology 2003, 207: 123-4. 26. Chang HS, Walsh LJ, Freer TJ. The effect of orthodontic treatment on salivary flow, pH, buffer capacity, and levels of mutans streptococci and lactobacilli. Aust Orthod J 1999; 15: 229-34. Strużycka I, Aleksiński M. Możliwości transmisji drobnoustrojów próchnicotwórczych. Nowa Stomatol 2006; 1: 34-7. 28. De Almeida Pdel V, Grégio AM, Machado MA, De Lima AA, Azevedo LR. Saliva composition and functions: a comprehensive review. J Contemp Dent Pract 2008, 9: 72-80. Lind LK, Lejon K, Schmitt-Egenolf M. EDAR mutation in autosomal dominant hypohidrotic ectodermal dysplasia in two Swedish families. BMC Med Genet 2006, 7: 80-7. 10. Caufield PW, Cutter GR, Dasanayake AP. Initial acquisition of mutans streptococci by infants: evidence for a discreete window of infectivity. J Dent Res 1993; 72: 37-45. 27. Bretz WA, Do Valle EV, Jacobson JJ, Marchi F, Mendes S, Nor JE, et al. Unstimulated salivary flow rates of young children. Oral Surg Oral Med Oral Pathol Oral Radiol Endod 2001; 91: 541-5. 29. Elishoov H, Wolff A, Kravel LS, Shiperman A, Gorsky M. Association between season and temperature and unstimulated parotid and submandibular/sublingual secretion rates. Arch Oral Biol 2008; 53: 75-8. 11. Berkowitz RJ, Turner J, Green P. Primary oral infection of infants with Streptococcus mutans. Arch Oral Biol 1980, 25: 221-4. 30. Glans R, Larsson E, Ogaard B. Longitudinal changes in gingival condition in crowded and noncrowded dentitions subjected to fixed orthodontic treatment. Am J Orthod Dentofac Orthop 2003; 124: 679-82. 12. Smith DJ, King WF, Akita H, Taubman MA. Association of salivary immunoglobulin A antibody and initial mutant streptococcal infection. Oral Microbiol Immunol 1998, 13: 178-285. 13. Kreulen CM, de Soet HJ, Hogeveen R, Veerkamp JS. Streptococcus mutans in children using nursing bottles. J Dent Child 1997; 64: 107-11. 14. Brathall D. Mutans streptococci- dental oral and global aspects. J Indian Soc Pedo Prev Dent 1991; 9: 4-12. 15. S trużycka I. Biofilm - współczesne spojrzenie na etiologię próchnicy. Dental Forum 2010; 38: 73-9. 16. Alaluusua S, Renkonen O. Streptococcus mutans establishment and dental caries experience in children from 2 to 4 years old. Scand. J Dent Res 1983; 91: 453-7. 17. Reich E, Lussi A, Newbrun E. Caries risk assessment. Inter Dent J 1999; 49: 15-9. 18. Scannapieco F. Saliva - bacterium interactions in oral microbial ecology. Crit Rev Oral Biol Med 1994; 5: 203-9. ForumOrthodontic Ortodontyczneforum 172