przechowywanych w temperaturze +20oC. Dwadzieścia siedem białek

CHARAKTERYSTYKA l PROFIL B|AŁEK W NASIONACH ŁUBINU ŻOŁTEGO
PRZECHOVVYWANYCH PRZEZ 30 LAT
MALW|NA DoBlESZl, BARBARA ADoMAS2,
AGNlESZKA l. PloTRoWlcZ-ClEŚLAK1
1Katedra Fizjologii,
Genetyki i Biotechnologii Rostin, Wydział Biologii i Biotechnologii,
Uniwersytet Warmińsko-Mazurski w Olsztynie
ul. Oczapowskiego 1A, 10- 718 Olsztyn
' Katedra Ch emii, Wydzi ał Rol n ictw a i Ksztaftow an i a Środow i ska, IJ n iwe rsytet
Warmi ńsko-Mazurski w Olsztynie
ul. Prawocheńskiego 17, 10- 720 Olsztyn
W wyniku długotnvałego przechowywania nasiona ulegają starzeniu, tracą potencjał
biologiczny (wigor, zywotnośó) i ekonomiczny, ostatecznie zamierają. Biorąc pod uwagę
długowiecznośónasion i fizjologię spoczynku nasiona można podzielió na trzy grupy: 1.)
ortodoksyjne, 2.) oporne, 3.) pośrednie. Nasiona łubinu zółtego (Lupinus luteus L.) odmiany
lryd były przechowywane w hermetycznie zamkniętych szklanych słojach w temperaturze 14'C i OoC oraz w warunkach laboratoryjnych (temp. ok. 20oC, worki lniane) przez 30 lat. Po
30 latach przechowywania określonowigor i zywotnośćnasion oraz profil i zawartość białek.
Nasiona przechowywane w temperaturze -14oC kiełkowały w 92o/o, przechowywane w OoC w
91%, zaśprzechowywane w temperaturze 20oC nie kiełkowaĘ. Rozdział białek nasion
techniką elektroforezy dwukierunkowej (2 DE) przechowywanych w niskich temperaturach
(-14'C i 0"C) był podobny. Mapa elektroforetyczna wygenerowana dla nasion
przechowywanych w temperaturze +20" C wykazała znaczne róznice, poniewaz nie
występowały białka w zakresie masy 23 i 20 kDa i Pl 5 i 6,5. Analiza ilościowa
wykonana/oceniona programem PDQuest wykazałalpozwoliła zidentyfikować 343
polipeptydowe podjednostki obecne w nasionach przechowywanych w temperaturze -1 oC,
327 w nasionach przechowywanych w temperaturze 0'C i 29a w nasionach
przechowywanych
w
temperaturze +20oC. Dwadzieściasiedem
białek
zanalizowanolprzeanalizowano za pomocą spektrometrii masowej. Dziesięć białek
wykazywało podobieństwo do ó-konglutyn. Trzy białka zostały wskazane jako B-konglutyny.
Zidentyfikowanymi białkami o charakterze enzymatycznym był dehydrogenaza
jabłczanowa, dysmutaza ponadtlenkowej i dysmutaza ponadtlenkowa miedżlcynk. Ponadto
zidentyfikowano trzy białka zaliczane di LEA i dwa powiązane z patogenezą (białka PR).
Akumulacja białek poddanych identyfikacji rózniła się istotnie w zalezności do temperatury
ich przechowywania. Wykazano, że akumulacja białek zapasowych tj. P - konglutyn i ó konglutyn w nasionach przechowywanych w +2OoC zmniejszyła się. Nasze badania
wykazały, ze prawdopodobnie B - konglutyna odpowiada za wigor i zywotność nasion
przechowywanych.
45