przepis do ćwiczenia 4

Transkrypt

przepis do ćwiczenia 4
ĆWICZENIE 4
Cukry - polisacharydy
Rozpuszczalność skrobi
Potrzebne odczynniki na 1 zespół (x5 na 1 grupę ćwiczeniową):
1 g skrobi
100 ml wody destylowanej
1 mL roztworu I2 w KI
Szkło:
2x probówki szklane
1x pipetka plastikowa
2x stojak: na probówki (1x) i odczynniki (1x)
1x zlewka szklana 25 ml
1x zlewka szklana 100 ml
1x bagietka szklana
Wrząca łaźnia wodna
Waga laboratoryjna
Wykonanie
Odważyć 0,5 g skrobi i wsypać do zlewki na 25 ml. Dodać 10 ml wody destylowanej i dokładnie
wymieszać. 5 ml uzyskanego roztworu przesączyć przez bibułę do probówki. Do przesączu dodać 2
krople roztworu I2 w KI. Ponieważ skrobia jest nierozpuszczalne w zimnej wodzie roztwór nie
zabarwi się.
W zlewce na 100 ml zagotować 45 ml wody. W drugiej zlewce sporządzić zawiesinę 0,5 g skrobii
w 5 ml zimnej wody. Wlać zawiesinę do wrzącej wody i stale mieszając doprowadzić do uzyskania
jednolitego opalizującego roztworu skrobi. Pobrać 5 ml roztworu i przesączyć go do probówki.
Dodać 2 krople roztworu I2 w KI. Pojawia się niebieskie zabarwienie świadczące o rozpuszczaniu
się skrobi w gorącej wodzie.
Próba z jodem
Potrzebne odczynniki na 1 zespół (x5 na 1 grupę ćwiczeniową):
1 ml - 1% roztwór kleiku skrobiowego (z pierwszego doświadczenia)
0,5 ml - odczynnik Lugola (I2 w KI)
Szkło:
1x probówka szklana
1x pipetka plastikowa
2x stojak: na probówki (1x) i odczynniki (1x)
Wrząca łaźnia wodna
Wykonanie
Do 1 ml kleiku skrobiowego z poprzedniego doswiadczenia dodać 2 krople odczynnika Lugola.
Roztwór przybiera ciemno niebieskie zabarwienie. Następnie probówkę umieścic we wrzącej łaźni
wodnej – zabarwienie znika. Po oziębieniu probówki (pod bieżącą wodą) - zabarwienie powraca.
12
Kwaśna hydroliza skrobi
Potrzebne odczynniki na 1 zespół (x5 na 1 grupę ćwiczeniową):
12 ml 1% roztworu skrobi (z pierwszego doświadczenia)
6 ml 2M HCl
6 ml 2M NaOH
2 ml roztworu I2 w KI
3 ml roztworu Fehlinga I
3 ml roztworu Fehlinga II
Szkło:
12x probówki szklane
6x pipetki plastikowe
2x stojak: na probówki (1x) i odczynniki (1x)
Wrząca łaźnia wodna
Wykonanie
Przygotować 12 probówek szklanych. Do każdej z nich nalać 1 ml 1% roztworu skrobi i dodać 0,5
ml 2M HCl. Podzielić probówki na dwie serie po 6 probówek każda.
Pierwszą serie wstawić do wrzącej łaźni wodnej. Co trzy min. wyjmować kolejną probówkę i po
schłodzeniu dodawać dwie krople roztworu I2 w KI. Obserwować zmiany zabarwienia w czasie
hydrolizy.
Wstawić do wrzącej łaźni wodnej drugą serię probówek. Co trzy min. wyjmować probówkę i po
schłodzeniu dodawać 0,5 ml 2M NaOH w celu zobojętnienia, a następnie po 0,5 ml roztworu
Fehlinga I i 0,5 ml roztworu Fehlinga II. Umieścić ponownie całą II serię probówek na 5 min. we
wrzącej łaźni wodnej. Obserwować zmiany zabarwienia w czasie hydrolizy.
Wysalanie skrobi
Potrzebne odczynniki na 1 zespół (x5 na 1 grupę ćwiczeniową):
4ml - 1% roztworu skrobi (z pierwszego doświadczenia)
4ml - nasycony roztwór siarczanu amonu
Szkło:
2x probówki szklane
2x pipetki plastikowe
2x stojak: na probówki (1x) i odczynniki (1x)
Wrząca łaźnia wodna
Wykonanie
Do dwóch probówek nalac po 2ml roztworu kleiku skrobiowego z doświadczenia pierwszego. Do
pierwszej dodać 2 ml siarczanu amonu, a do drugiej 2 ml wody destylowanej - zamieszać. Odstawić
obie probówki na 30 min. W pierwszej probówce po 10 min. pojawia się zmętnienie, po dłuższym
staniu z roztworu wytrąca się osad skrobi. W drugiej brak zmian.
13
Kwaśna hydroliza celulozy
Potrzebne odczynniki na 1 zespół (x5 na 1 grupę ćwiczeniową):
10ml – woda destylowana
1ml – stężony H2SO4
2ml - 2M NaOH
0,5 ml - roztworu Fehlinga I
0,5 ml - roztworu Fehlinga II
Szkło:
1x probówka szklana duża
1x probówka szklana zwyczajna
5x pipetki plastikowe
2x stojak: na probówki (1x) i odczynniki (1x)
Wrząca łaźnia wodna
Wykonanie
Kilka strzępków bibuły, zalać w dużej probówce 10 ml wody. Ostrożnie po ściankach dodać 1 ml
stężonego H2SO4. Wymieszać lekko i ogrzewać na wrzącej łaźni wodnej 30 min. Po schłodzeniu
dodać ostrożnie wodę destylowaną do uzyskania poprzedniej objętości. Odebrać do zwykłej
probówki 1 ml płynu, zobojętnić 2 ml 2M NaOH, dodać 1 ml zmieszanych ze sobą odczynników
Fehlinga I i II (w stosunku 1:1) i gotować we wrzącej łaźni wodnej. Pomimo bardzo drastycznych
warunków cukry redukujące pojawiają się w bardzo małej ilości lub wcale.
Mobilizacja cukrów w procesie kiełkowania
Przygotowanie przesączu:
W moździerzu rozcieramy 5 g kiełkujących ziarniaków jęczmienia, przenosimy do zlewki i
zalewamy 50 ml wody destylowanej. Do drugiej zlewki wsypujemy 5 g zmielonego suchego ziarna
jęczmienia. Zlewki umieszczamy na 20 min w łaźni wodnej o temp. 65-70°C. Po ochłodzeniu
zawartość zlewek sączymy.
Wykonanie doświadczenia
Przygotowujemy trzy probówki. Do pierwszej w
lewamy 2 ml przesączu ze zmielonego suchego
ziarna, a do drugiej i trzeciej - 2 ml przesączu z kiełkującego jęczmienia. W trzeciej probówce
przeprowadzamy dodatkowo kwaśną hydrolizę przesączu. W tym celu do 2 ml tego przesączu
dodajemy kilka kropel 2 M HCl i ogrzewamy10 min na wrzącej łaźni wodnej. Po ochłodzeniu
zawartość probówki zobojętniamy 2 M NaOH. We wszystkich trzech probówkach przeprowadzamy
reakcję Fehlinga. W tym celu do probówek dodajemy po 2 ml zmieszanych ze sobą odczynników
Fehlinga I i II (w stosunku 1:1), ogrzewamy we wrzącej łaźni wodnej ok 3 min i porównujemy ilość
powstałego Cu20. Efekt mobilizacji cukrów w procesie kiełkowania staje się bardziej widoczny,
jeśli przeprowadzi się kwaśną hydrolizę przesączu z kiełkującego ziarna, w wyniku której zachodzi
rozkład sacharozy do cukrów redukujących.
14

Podobne dokumenty