Poziom spożycia wybranych składników mineralnych, a wrażliwość
Transkrypt
Poziom spożycia wybranych składników mineralnych, a wrażliwość
788 Probl Hig Epidemiol 2011, 92(4): 788-791 Poziom spożycia wybranych składników mineralnych, a wrażliwość na insulinę w grupie otyłych kobiet po menopauzie Intake of selected minerals vs. insulin sensitivity in the group of obese postmenopausal women Bogna Grygiel-Górniak 1/, Juliusz Przysławski 1/, Marta Stelmach-Mardas 1/, Marek Chuchracki 2/, Maria Mosor 3/ Katedra i Zakład Bromatologii Uniwersytetu Medycznego im. Karola Marcinkowskiego w Poznaniu Centralne Laboratorium Ginekologiczno-Położniczego Szpitala Klinicznego Uniwersytetu Medycznego im. Karola Marcinkowskiego w Poznaniu 3/ Zakład Patologii Molekularnej, Instytut Genetyki Człowieka PAN w Poznaniu 1/ 2/ Cel pracy. Ocena wybranych wskaźników wrażliwości na insulinę w badanej grupie otyłych kobiet po menopauzie ze szczególnym uwzględnieniem poziomu spożycia biopierwiastków. Materiał. W grupie 61 kobiet, u których rozpoznano otyłość brzuszną, przeprowadzono ocenę stanu odżywienia i sposobu żywienia oraz oznaczono glukozę, insulinę, kwas moczowy i określono wartości wskaźników HOMAIR i HOMA-b. Wyniki. Przeprowadzone badania wykazały, że pomimo drugiego stopnia otyłości (BMI=36,2±5,23 kg/m2) oraz brzusznego rozmieszczenia tkanki tłuszczowej (WHR=0,87±0,05) nie zaobserwowano istotnych zaburzeń gospodarki węglowodanowej, o czym świadczą prawidłowe stężenia glukozy (94,7±12,4 mg/dl) i insuliny na czczo (10,6±6,62 mU/ml). Wartości wskaźnika HOMA-IR były nieco podwyższone (2,54±1,76 mU/mmol), a wskaźnika HOMA-b osiągnęły wartość 127±85,6 mmol × mU/l2. Stężenie kwasu moczowego oscylowało wokół górnej granicy normy (5,05±1,22 mg/dl). Podaż energii była prawidłowa, jednak całodzienne racje pokarmowe były źle zbilansowane i dostarczały nadmiaru białka (15,5±2,29% energii), tłuszczu (34,2±5,74% energii) i fosforu (1287±290 mg) oraz zaobserwowano stosukowo niski poziom energii pochodzącej z węglowodanów (51,2±5,74% energii) i niedostateczną podaż wapnia (663±227 mg). Poziom spożycia cynku, miedzi i selenu był prawidłowy. Wnioski. Należy dążyć do zmiany sposobu żywienia badanej grupy otyłych kobiet celem uzyskania optymalnych wartości wskaźników HOMA-IR i HOMA-b, a tym samym zmniejszenia ryzyka rozwoju cukrzycy w przyszłości. Aim. The assessment of insulin resistance factors in the group of obese postmenopausal women with the focus on mineral intake. Material & Methods. Nutritional status and dietary habits were assessed in the group of 61 women with diagnosed visceral obesity. Glucose, insulin and uric acid concentrations were measured and the HOMA-IR and HOMAb indices were calculated. Results. The study revealed that despite the second degree of obesity (36.2±5.23 kg/m2) and visceral deposition of fat tissue (WHR = 0.87±0.05) the vital disturbances of carbohydrate metabolism were not observed in the studied group, which was confirmed by proper fasting glucose level (94.7±12.4 mg/dl) and insulin concentrations (10.6±6.62 mU/ml). The value of HOMA-IR index was a bit increased (2.54±1.76 mU/mmol), and HOMA-b reached the value of 127±85.6 mmol x mU/l2. The uric acid concentrations fluctuated near the upper values of normal range (5.05±1.22 mg/dl). The intake of energy was proper; however the daily food rations were improperly balanced and the excess intake of protein (15.5±2.29 % energy), fat (34.2±5.74% energy) and phosphorus (1287±290 mg) were found with a relatively low intake of carbohydrates (51.2±5.74% energy) and insufficient calcium supply (663±227 mg). The intake of zinc, copper and selenium were proper. Conclusions. The changes of nutritional habits should be implemented in the group of obese women to pursue the optimal values HOMA-IR and HOMA-b indices in the process of decreasing the risk of diabetes mellitus development in the future. Key words: Postmenopausal obesity, insulin resistance, nutritional habits Słowa kluczowe: otyłość pomenopauzalna, insulinooporność, sposób żywienia © Probl Hig Epidemiol 2011, 92(4): 788-791 www.phie.pl Nadesłano: 10.06.2011 Zakwalifikowano do druku: 10.10.2011 Wstęp Dane epidemiologiczne – poparte badaniami obserwacyjnymi oraz klinicznymi – wskazują, że częstość występowania otyłości we współczesnym społeczeństwie wykazuje tendencję wzrostową [1]. Wśród oty- Adres do korespondencji / Address for correspondence dr n. med. Bogna Grygiel-Górniak Katedra i Zakład Bromatologii, Uniwersytet Medyczny, Poznań e-mail: [email protected] łych osób na świecie dominują kobiety, które stanowią 300 milionów populacji ogólnej (dane WHO) [2]. Problem zwiększonej masy ciała dotyczy również kobiet w Polsce, o czym świadczą badania Pol-Monica Bis, w których stwierdzono zwiększoną masę ciała u 50% Grygiel-Górniak B i wsp. Poziom spożycia wybranych składników mineralnych, a wrażliwość na insulinę w grupie otyłych ... ogółu badanych kobiet. Tendencja do wzrostu masy ciała nasila się wraz z wiekiem i dotyczy szczególnie kobiet po 50 roku życia [3]. Stąd w prewencji otyłości podkreśla się rolę prawidłowo zbilansowanej diety oraz odpowiedniej do wieku aktywności fizycznej, zmniejszającej ryzyko nie tylko rozwoju otyłości, ale i osteoporozy [4]. Biorąc pod uwagę powyższe fakty przeprowadzono ocenę sposobu żywienia w grupie otyłych kobiet po menopauzie z uwzględnieniem wskaźników wrażliwości na insulinę. Materiał i metody Badania przeprowadzono w grupie 133 otyłych kobiet po menopauzie nie stosujących hormonalnej terapii zastępczej oraz leczenia hipolipemizującego. Z badanej grupy wybrano 71 kobiet, u których nie stwierdzono cukrzycy, endokrynopatii, dusznicy bolesnej niestabilnej, zaburzeń zakrzepowo-zatorowych oraz choroby nowotworowej. Ocenę sposobu żywienia przeprowadzono metodą wywiadu o spożyciu z ostatnich 24 godzin przez 7 kolejnych dni [5]. Do analizy wyników badań ankietowych dotyczących składu jakościowego i ilościowego całodziennych racji pokarmowych, wykorzystano komputerowe bazy danych przygotowane w programie Microsoft Access 2000 [6] na podstawie tabel składu i wartości odżywczej produktów spożywczych [7]. Ocenę sposobu żywienia dokonano obliczając stopień realizacji norm na poziomie zalecanym, przyjmując jako podstawę obliczeń, należną masę ciała i niską aktywność fizyczną deklarowaną przez badane kobiety [8]. Wyniki wyrażono pod postacią wartości średniej i odchylenia standardowego (X±SD), które uzupełniono wartościami mediany i odchylenia kwartylowego (Me±QD). Dokonano oceny gospodarki węglowodanowej oznaczająć stężenie glukozy i insuliny na czczo oraz obliczając wskaźnik insulinooporności HOMA-IR (homeostatic model assessment of insulin resistance) oraz wskaźnika komórki β HOMA-b (homeostasic model assessment of β-cell function). Badania były prowadzone w ramach projektu finansowanego przez Ministerstwo Nauki i Informatyzacji N 404 504 638. Wyniki Wiek badanych kobiet wynosił 59,5±6,75 lat, wysokość ciała 162±6,15 cm, a masa ciała 95,6±15,7 kg (tab. I). Obwód pasa był równy 104±10,6 cm (WHR=0,87±0,05), tkanka tłuszczowa osiągnęła 49,9% całkowitej masy ciała, co odpowiadała wartościom bezwzględnym 48±11,5 kg. Wyliczone średnie wartości wskaźnika masy ciała (BMI) były równe 36,2±5,23 kg/m2, a wskaźnika talia-biodra 0,87±0,05. Stężenie glukozy na czczo osiągnęło wartość 94,7±12,4 mg/dl, a insuliny 10,6±6,62 mU/ml. Obliczone wartości wskaźnika HOMA-IR oscylowały wokół 2,54±1,76 mU/mmol, a wskaźnika HOMA-b 127±85,6 mmol × mU/l2. Stężenie kwasu moczowego osiągnęło wartość 5,05±1,22 mg/dl. 789 Tabela I. Charakterystyka antropometryczna oraz wybrane parametry biochemiczne badanej grupy otyłych kobiet po menopauzie Table I. Anthropometric characteristics and selected biochemical parameters in the group of obese postmenopausal women Badana grupa otyłych kobiet Wskaźniki oceny statystycznej, n=71 Analizowany parametr X SD Me QD Wiek [lata] 59,5 6,75 58,0 4 Wzrost [cm] Masa ciała [kg] Obwód pasa [cm] Tkanka tłuszczowa [%] Tkanka tłuszczowa [kg] BMI [kg/m2] WHR Glukoza [mg/dl] Insulina [mU/ml] HOMA-IR [mmol x mU/l2] HOMA-b [mU/mmol] Kwas moczowy [mg/dl] 162 95,6 104 49,9 48,0 36,2 0,87 94,7 10,6 2,54 127 5,05 6,15 15,7 10,6 5,09 11,5 5,23 0,05 12,4 6,62 1,76 85,6 1,22 162 92,5 102 49,0 45,3 35,3 0,88 93,2 8,65 3,20 151 4,80 5 10,5 7 3,35 6,75 3,5 0,035 6,7 3,49 0,87 31,5 0,5 n – liczba kobiet, X - średnia, SD - odchylenie standardowe, Me – mediana, QD – odchylenie kwartylowe BMI – wskaźnik masy ciała, WHR – wskaźnika talia/biodra, HOMA-IR – wskaźnik insulinooporności, HOMA-b – wskaźnik wrażliwości komórki b na insulinę Tabela II. Ocena poziomu spożycia wybranych składników pokarmowych w grupie otyłych kobiet po menopauzie Table II. Assessment of selected nutritional components in the group of obese postmenopausal women Badana grupa otyłych kobiet Analizowany parametr Wskaźniki oceny statystycznej, n=71 X SD Mediana QD Energia [kcal] 2041 399 1951 234 Białko [%en] Tłuszcz [%en] Węglowodany [%en] Wapń [mg] Fosfor [mg] Magnez [mg] Cynk [mg] Mied [mg] Selen [mg] 15,5 34,2 51,2 663 1287 319 10,9 1,39 65,6 2,29 5,74 6,42 227 290 80,4 2,23 0,45 18,8 15,4 34,5 50,5 614 1214 308 10,9 1,31 61,9 1,59 4,27 4,67 134 199 57,9 1,38 0,24 11,7 n – liczba kobiet, X - średnia, SD - odchylenie standardowe, Me – mediana, QD – odchylenie kwartylowe W tabeli II przedstawiono ocenę sposobu żywienia. Wartość energetyczna diety wynosiła 2041±399 kcal, udział energii z białka wynosił 15,5±2,29%, tłuszczu 34,2±5,74%, a węglowodanów 51,2±6,42%. Podaż wapnia była równa 663±227 mg, fosforu 1287±290 mg, a magnezu 319±80,4 mg/dzień. Poziom spożycia cynku wynosił 10,9±2,23 mg, miedzi 1,39±0,45 mg, a selenu 65,6±18,8 µg/dzień. Dyskusja Analizując wyniki zawarte w tabeli I można stwierdzić, że badane kobiety były w okresie pomenopauzalnym, o czym świadczy ich wiek oraz oznaczone stężenia folikulotropiny (FSH). Wysoka masa ciała badanych kobiet oraz duża zawartości tkanki tłuszczowej, zde- 790 cydowanie przekraczająca 30% całkowitej masy ciała, są czynnikami predysponującymi do rozwoju zaburzeń metabolicznych [9]. Występujący w tym okresie hipoestrogenizm prowadzi do zmniejszenia podstawowej przemiany materii [10]. Dodatkowo złe nawyki żywieniowe oraz mała aktywność fizyczna zwiększają ryzyko otyłości i utrudniają jej leczenie [11]. Obwód pasa powyżej 88 cm według kryteriów NCEP ATP III jest czynnikiem zwiększającym ryzyko rozwoju insulinooporności [12]. Wartości rekomendowane przez ekspertów International Diabetes Federation (IDF) są jeszcze bardziej restrykcyjne i wskazują na zmniejszenie tego ryzyka przy wartościach poniżej 80 cm [13]. Ponadto w wielu badaniach udowodniono, że wartości wskaźnika WHR powyżej 0,85 silnie zwiększają zachorowalność i umieralność z powodu chorób sercowo-naczyniowych i cukrzycy [1, 2]. Pomimo występowania otyłości brzusznej zarówno stężenie glukozy jak i insuliny na czczo pozostawało w granicach prawidłowych, jednak wartości wskaźnika HOMA-IR były podwyższone, a w zakresie mediany przekroczyły wartość 3,0 mmol × mU/l2 w badanej grupie kobiet. Wartości te mogą sugerować tendencję do zwiększonej oporności na insulinę oraz podwyższone ryzyko rozwoju cukrzycy i zespołu metabolicznego u badanych kobiet w przyszłości [14]. Podobnie wartości wskaźnika HOMA-b, osiągające wartość około 127 mU/mmol, wydają się wskazywać na zmniejszoną wrażliwość komórek β na insulinę [15]. Występująca insulinooporność jest podłożem rozwoju wielu jednostek chorobowych takich jak otyłość, choroby sercowo-naczyniowe oraz metaboliczne. Dodatkowo insulinooporność jest jednym ze wskaźników, które często współistnieją z zaburzeniami lipidowymi oraz zwiększonym ryzykiem rozwoju stresu oksydacyjnego [16]. W ostatnich doniesieniach podkreśla się również rolę kwasu moczowego, jako czynnika proaterogennego jak i prozapalnego nawet w stężeniach pozostających w zakresie wartości prawidłowych [17]. W przeprowadzonych badaniach stężenie tego kwasu osiągnęło górną granicę normy, co może sugerować zwiększone ryzyko aterogenezy oraz powstawania wolnych rodników. Analizując racje pokarmowe badanych kobiet można stwierdzić, że pomimo prawidłowej wartości energetycznej racje te były źle zbilansowane. Konsekwencją nadmiaru białka i tłuszczu był niedobór węglowodanów w diecie [8]. Wysokiemu poziomowi spożycia białka towarzyszy kwasica oraz hiperkalcynuria, co w przypadku kobiet po menopauzie ma szczególnie istotne znaczenie ze względu na zwiększone ryzyko osteoporozy [18]. Z kolei tłuszcz spożywany w nadmiarze jest jedną z głównych przyczyn rozwoju otyłości [2]. W patogenezie tej choroby nie tylko wartość energetyczna czy poziom spożycia składników podstawowych istotnie wpływają na jej rozwój, Probl Hig Epidemiol 2011, 92(4): 788-791 ale coraz częściej podkreśla się rolę biopierwiastków, których zarówno niedobór jak i nadmiar ma istotny wpływ na powstawanie otyłości [19- 30]. Poziom spożycia wapnia przez otyłe pacjentki był dwukrotnie niższy, aniżeli wartości zalecane. Biorąc pod uwagę fakt, że w okresie pomenopauzalnym wzrasta ryzyko rozwoju osteoporozy [22], niska podaż tego pierwiastka może zwiększać zachorowalność na osteoporozę. Warto także podkreślić, że wapń ma również korzystne działanie w przypadku otyłości [19, 20]. Bierze on udział w przemianach lipidów w adipocytach, a wewnątrzkomórkowe stężenia kationów wapniowych (Ca2+) odgrywają kluczową rolę w regulacji metabolizmu lipidowego i magazynowaniu triacylogliceroli [21]. Duże stężenia tych kationów prowadzą do zwiększenia lipogenezy oraz wzrostu syntetazy kwasów tłuszczowych – enzymu, którego działanie jest uzależnione od podaży wapnia z dietą [20]. Udowodniono, że zastosowanie diety niskoenergetycznej, wysoko-wapniowej powoduje zmniejszenie masy ciała o dodatkowe 26% w stosunku do diety nisko-wapniowej [20, 21]. Ponadto istnieją doniesienia wskazujące na odwrotną zależność pomiędzy spożyciem produktów mlecznych, a insulinoopornością [23, 24]. Analizując racje pokarmowe badanych kobiet zauważono również wysoki poziom spożycia fosforu, który powszechnie występuje w wielu produktach spożywczych [22, 25]. Konsekwencją tego był wysoki stosunek P:Ca wynoszący około 2,0, który może utrudniać wchłanianie wapnia, a tym samym zwiększać ryzyko rozwoju osteoporozy i utrudniać leczenie otyłości. Uwagę zwraca prawidłowe spożycie magnezu, który bierze udział w wielu procesach metabolicznych oraz ma pozytywny wpływ na przewodnictwo tkanki nerwowej [25]. Udowodniono również, że niska podaż magnezu zwiększa ryzyko rozwoju cukrzycy [26]. Oceniając poziom spożycia mikropierwiastków można zauważyć prawidłową ich podaż. Może to mieć pozytywny wpływ na procesy metaboliczne oraz procesy stresu oksydacyjnego. Brak właściwości oksydoredukcyjnych cynku sprawia, że jest on dobrym antyoksydantem chroniącym organizm przed wolnymi rodnikami [27, 28]. Jako składnik dysmutazy ponadtlenkowej (SOD), która stanowi pierwszą linię obronę przed reaktywnymi formami tlenu, ma istotne znaczenie w prewencji procesów wolnorodnikowych, towarzyszących otyłości. Wykazano, że suplementacja cynkiem może zwiększyć wrażliwość na insulinę u osób chorych na cukrzycę stosujących doustne leki przeciwcukrzycowe [28]. Wydaje się, że prawidłowy poziom spożycia cynku może zmniejszać dalszy rozwój insulinooporności w badanej grupie otyłych kobiet. W skład dysmutazy ponadtlenkowej wchodzi również miedź, która jest składnikiem oksydazy cytochromowej biorącej udział w procesach metabolicznych. Zatem prawidłowa podaż w tego Grygiel-Górniak B i wsp. Poziom spożycia wybranych składników mineralnych, a wrażliwość na insulinę w grupie otyłych ... pierwiastka może mieć korzystny wpływ na przebieg procesów metabolicznych [29]. Dodatkowe zabezpieczenie antyoksydacyjne w przypadku badanych kobiet stanowi selen, który jako składnik peroksydazy glutationu wpływa na szybkość reakcji peroksydacji. Bierze on udział w syntezie glutationu, białek ustrojowych i hormonów tarczycy, a jako składnik selenoprotein zmniejsza toksyczność wielu ksenobiotyków – w tym metali ciężkich [22]. Przypuszcza się, że głównym czynnikiem wiążącym się z rozwojem takich chorób jak: cukrzyca, choroba niedokrwienna serca, nowotwory, udar mózgu są niedobory selenu, które prowadzą do stresu oksydacyjnego. Prawdopodobnie deficyt tego pierwiastka w organizmie powoduje także do wzrost 791 zapadalności na reumatoidalne zapalenie stawów, mukowiscydozę oraz sprzyja obniżeniu odporności [30]. Wnioski W postępowaniu dietetycznym wspomagającym leczenie otyłości i zmniejszającym insulinooporność wśród kobiet otyłych należy: 1. zmniejszyć wartość energetyczną całodziennych racji pokarmowych 2. ograniczyć udział białka i tłuszczu z jednoczesnym zbilansowaniem podaży węglowodanów złożonych 3. zbilansować całodzienne racje pokarmowe biorąc pod uwagę podaż mikro- i makropierwiastków Piśmiennictwo / References 1. Diet, nutrition and the prevention of chronic diseases. Report of the Joint WHO/FAO expert consultation. WHO, Genewa, 2002. 2. Diet, nutrition and the prevention of chronic diseases. Report of a WHO Study Group. Technical Report Series 916, WHO, Geneva, chapter 5, 2003. 3. Rywik S, Pająk A i wsp. Częstość występowania nadwagi i otyłości w wybranych populacjach Polski – Pol-Monica Bis projekt. Med Metabol 2003, 7: 8-15. 4. Milewicz A, Demissie M, et al. Influence of dietary and genetic factors on metabolic status in obese and lean postmenopausal women. Gynecol Endocrinol 2003, 17(4): 333-338. 5. Charzewska J. Instrukcja przeprowadzania wywiadu o spożyciu z 24 godzin. IŻŻ, Warszawa 1997. 6. Przysławski J, Walkowiak J i wsp. Wartość odżywcza całodziennych racji pokarmowych dzieci chorych na mukowiscydozę. Pediatr Pol 1998, 5: 399-403. 7. Kunachowicz H, Nadolna I i wsp. Tabele wartości odżywczej produktów spożywczych. IŻŻ, Warszawa 1998. 8. Jarosz M, Bułhak-Jachymczyk B. Normy żywienia człowieka. PZWL, Warszawa 2008. 9. Norgan NG. Laboratory and field measurements of body composition. Publ Health Nutr 2005, 8: 1108‑1122. 10. Pertyński T, Łukaszek M i wsp. Specyfika otyłości w wieku menopauzalnym. Med po Dypl 2000, 3/4: 105-108. 11. Kirchengast S, Gruber D i wsp. The impact of nutritional status on body fat distribution patterns in pre- and postmenopausal females. J Biosoc Sci 1998, 30(2): 145‑154. 12. Executive Summary of The Third Report of The National Cholesterol Education Program (NCEP) Expert Panel on Detection, Evaluation, and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), JAMA 2001, 285: 2486-2497. 13. International Diabetes Federation: The IDF consensus worldwide definition of the metabolic syndrome. [article online], 2005. http: //www.idf.org/webdata/docs/metac_ syndrome_def.pdf (28.03.2011). 14. Matthews DR, Hosker JP, et al. Homeostasis model assessment: insulin esistance and Bcell function from fasting plasma glucose and insulin concentrations in man. Diabetologia 1985, 28: 412-419. 15. Cobelli C, Toffolo GM, et al. Assessment of b-cell function in humans, simultaneously with insulin sensitivity and hepatic extraction, from intravenous and oral glucose tests. Am J Physiol Endocrinol Metab 2007, 293: E1-E15. 16. Levy JC, Matthews DR, et al. Correct Homeostasis Model Assessment (HOMA) Evaluation uses the computer program. Diabetes Care 1998, 21, 2191-2192. 17. Hayden M, Tyagi S. Uric acid: a new look at an old risk marker for cardiovascular disease, metabolic syndrome, and type 2 diabetes mellitus: the urate redox shuttle. Nutr Metab 2004, 19: 10-25. 18. Metges CC, Barth C. Metabolic consequences of a high dietary-protein intake in adulthood: Assessment of the available evidence. J Nutr 2000, 130: 86-889. 19. Zemel M. Mechanisms of dairy modulation of adiposity. J Nutr 2003, 133(1): 252-256. 20. Zemel M, Thompson W, et al. Calcium and dairy acceleration of weight and fat loss during energy restriction in obese adults. Obes Res 2004, 12(4): 582-590. 21. Zemel M. Role of dietary calcium and dairy products in modulating adiposity. Lipids 2003, 38(2): 139-146. 22. Sanchez A, Maffei L, et al. Nutrients and bone. Rev Arg Endocrinol Metab 2001, 38(4): 205-221. 23. Mennen LI, Lafay L, et al. Possible protective effect of bread and dairy products on the risk of the metabolic syndrome. Nutr Res 2000, 20: 335-347. 24. Pereira MA, Jacobs DR, et al. Dairy consumption, obesity, and the insulin resistance syndrome in young adults: The CARDIA study. JAMA 2002, 287: 2081-2089. 25. Ciborowska H, Rudnicka A. Dietetyka. PZWL, Warszawa 2000. 26. Song Y, Manson JE, et al. Dietary magnesium intake in relation to plasma insulin levels and risk of type 2 diabetes in women. Diabetes Care 2004, 27: 59-65. 27. Ho E. Zinc deficiency, DNA damage and cancer risk. J Nutr Biochem 2004, 15: 572-578. 28. Hughes S, Samman S. The Effect of Zinc Supplementation in Humans on Plasma Lipids, Antioxidant Status and Thrombogenesis. J Am Coll Nutr 2006, 25: 285-291. 29. Wlaźlak E, Dunicz-Sokolowska A, Radomska K i wsp. Analiza stężenia miedzi we włosach kobiet w okresie około menopauzalnym. Prz Menopauzal 2007, 5: 303‑305. 30. Gertig H, Przysławski J. Bromatologia. Zarys nauki o żywności i żywieniu. PZWL, Warszawa 2006.