sabouraud chloramphenicol gentamicin actidione agar - Bio-Rad

SABOURAUD CHLORAMPHENICOL GENTAMICIN ACTIDIONE AGAR
WYBIÓRCZE PODŁOŻE AGAROWE DO IZOLACJI DERMATOFITÓW I INNYCH GRZYBÓW
56596
1- ZASTOSOWANIE
Podłoże agarowe Sabouraud z chloramfenikolem, gentamycyną i aktydionem jest rekomendowane do izolacji
dermatofitów i innych chorobotwórczych grzybów z materiałów klinicznych, zawierających mieszaną florę
grzybiczą i bakteryjną.
2- ZASADA METODY
Mieszanina antybiotyków (chloramfenikol i gentamycyna) hamuje wzrost prawie wszystkich gatunków bakterii.
Aktydion hamuje wzrost grzybów saprofitycznych, a także niektórych drożdżaków (Candida tropicalis, Candida
glabrata, Cryptococcus neoformans) oraz niektórych szczepów Aspergillus i Fusarium.
3- POSTAĆ PODŁOŻA
•
Podłoże gotowe do użycia:
- skosy 25 x 8 ml
nr kat. 56596
4- PODSTAWOWE SKŁADNIKI (g/l wody destylowanej)
Podłoże agarowe przygotowane zgodnie ze składem podłoża C opisanym w Farmakopei Europejskiej (1,
uzupełnione aktydionem, gentamycyną i chloramfenikolem.
Peptony
10
Glukoza
40
Agar
15
5- PRZECHOWYWANIE
•
Podłoże gotowe użycia: w temperaturze +2 do 8°C
Data ważności i numer serii znajduje się na opakowaniu.
6- PROCEDURA
Dostarczony materiał:
•
Podłoże Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione Agar.
Inokulacja:
Na podłoże można wysiać każdy materiał kliniczny. Należy zapoznać się z zaleceniami dotyczącymi
przechowywania materiałów biologicznych. (2).
Inkubacja:
Czas i temperatura inkubacji zależy od charakterystyki i typu badanych gatunków grzybów.
Warunki inkubacji określa użytkownik.
Temperatura:
Optymalną temperaturą do wykrywania grzybów w materiałach klinicznych jest 30-35°C. Inkubacja kilku podłoży
w różnych temperaturach (25-27°C, 30-35°C) jest uzasadniona w przypadku badania w kierunku określonych
gatunków grzybów.
Czas inkubacji:
Zależy głównie od rodzaju wysianego materiału oraz spodziewanych gatunków grzybów.
Najczęściej zaleca się:
•
W przypadku wszystkich materiałów klinicznych, badanych na obecność drożdżaków (z wyjątkiem
C.neoformans): inkubacja 24-72 godziny, codzienne oglądanie hodowli.
•
W przypadku głębokich materiałów klinicznych: inkubacja 1-2 tygodnie, codzienne oglądanie hodowli.
•
Hodowle zaszczepione materiałem pobranym ze skóry lub jej wytworów, badanie w kierunku dermatofitów:
inkubacja 3-4 tygodnie, oglądanie hodowli dwa razy w tygodniu.
•
Przy podejrzeniu zakażenia C.neoformans lub grzybami dimorficznymi, po wysianiu płynu mózgowordzeniowego lub innego materiału inkubacja 1 miesiąc, codzienne oglądanie hodowli.
Odczyt i interpretacja
•
Po inkubacji należy obserwować wzrost kolonii drobnoustrojów.
•
Reprezentatywne, pojedyncze kolonie grzybów należy pobrać do identyfikacji: określić cechy morfologiczne,
wykonać preparat mikroskopowy, testy biochemiczne* i uzupełniające.
*Identyfikację kolonii drożdżaków (białe, matowe, o średnicy 1-2 mm) można wykonać za pomocą testu
AUXACOLORTM 2 (nr kat. 56513).
7- KONTROLA JAKOŚCI
•
Podłoże gotowe do użytku jest bursztynowe.
•
Morfologia kolonii szczepów wzorcowych na podłożu Sabouraud Chloramphenicol Gentamicin Actidione
Agar:
SZCZEP
Candida albicans ATCC 26790
Candida tropicalis ATCC 750
Candida glabrata
Trichophyton rubrum
Trichophyton violaceum
Epidermophyton floccosum
Microsporum canis
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
Pseudomonas aeruginosa
ATCC 27853
WARUNKI INKUBACJI
24-48 godzin w temp. 30-35°C
24-48 godzin w temp. 30-35°C
24-48 godzin w temp. 30-35°C
7 dni w temp. 30-35°C
i 7 dni w temp. 20-25°C
7 dni w temp. 30-35°C
i 7 dni w temp. 20-25°C
7 dni w temp. 30-35°C
i 7 dni w temp. 20-25°C
7 dni w temp. 30-35°C
i 7 dni w temp. 20-25°C
RODZAJ WZROSTU
Wzrost dobry
Brak wzrostu
Brak wzrostu
Kolonie meszkowate, rewers
pigmentowany czerwono-brązowy
Wzrost dobry, pigment fioletowy
24-48 godz. w temp. 35-38°C
Kolonie pudrowane, rewers
pigmentowany czerwono-brązowy
Wzrost dobry, kolonie skórzaste,
rewers pigmentowany
pomarańczowo-żółty
Brak wzrostu
24-48 godz. w temp. 35-38°C
Brak wzrostu
8- KONTROLA JAKOŚCI PRODUCENTA
Każdy produkt Bio-Rad został przygotowany zgodnie z systemem jakości, poczynając od materiałów
wyjściowych, aż do ostatecznego produktu komercyjnego.
Każda seria ostatecznego produktu podlega oznaczeniu kontrolnemu i jest dopuszczona do użytku, jeśli spełnia
wymagane kryteria. Bio-Rad posiada protokoły produkcji i kontroli jakości każdej serii.
9- OGRANICZENIA METODY
•
Ponieważ aktidion może hamować wzrost niektórych grzybów chorobotwórczych, drożdżaków takich, jak
Candida tropicalis, Candida glabrata, Cryptococcus neoformans, i grzybów z rodzaju Aspergillus,
zaleca się równoległy posiew badanego materiału na podłoże bez aktidionu.
10- BIBLIOGRAFIA
1. Pharmacopée Européenne, Addendum 4.2 de la IVe édition, 2002, p. 2841.
2. Basic Laboratory Procedures in Clinical Bacteriology. World Health Organization. Geneva.1991. 1st edition.
Bio-Rad
3, boulevard Raymond Poincaré
92430 Marnes-la-Coquette France
Tel. : +33 (0) 1 47 95 60 00
Fax : +33 (0) 1 47 41 91 33
08/2006
2