Polyclonal Rabbit Anti-Human IgG/AP Nr kat. D 0336

Polyclonal Rabbit
Anti-Human IgG/AP
Nr kat. D 0336
Wydanie z 24.07.2003
Przeznaczenie
Do badań diagnostycznych in vitro.
Przeciwciało Polyclonal Rabbit Anti-Human IgG/AP jest przeznaczone do użytku w badaniach techniką
immunoblottingu i testach ELISA.
Interpretację wyników powinien przeprowadzić pracownik uprawniony do wykonywania takich badań, na podstawie
historii choroby pacjenta oraz innych testów diagnostycznych.
Odczynnik dostarczony
Izolowane drogą powinowactwa królicze przeciwciało dla ludzkiej IgG skoniugowane z fosfatazą alkaliczną jest
dostarczane w postaci płynnej w roztworze 0,05 mol/L Tris-HCl, 0,1 mol/L NaCl, 1 mmol/L MgCl2, 0,1 mmol/L
ZnCl2, 15 mmol/L NaN3, 40% glicerolu o pH 7,2.
Stężenie koniugatu g/L: patrz informacja podana na etykiecie fiolki.
Przygotowanie
1. Aby przeciwciało użyte do koniugacji stało się swoiste dla łańcuchów gamma, poddano je absorpcji w fazie
stałej z użyciem wybranych frakcji białek surowicy ludzkiej.
2. Zaabsorbowane przeciwciało poddano dalszemu oczyszczaniu drogą chromatografii powinowactwa na
kolumnie z ludzkim IgG.
3. Wyizolowane drogą powinowactwa przeciwciało koniugowano następnie z cielęcą jelitową fosfatazą alkaliczną
o wysokiej aktywności swoistej przy użyciu zmodyfikowanej jednostopniowej metody glutaraldehydowej.
4. Na koniec koniugat poddano oczyszczaniu drogą chromatografii z użyciem filtra żelowego, aby usunąć wolne,
nieskoniugowane cząsteczki fosfatazy alkalicznej i nieskoniugowane przeciwciało.
Immunogen
IgG wyizolowana z puli surowicy ludzkiej.
Swoistość
Przeciwciało reaguje z fragmentami Fc łańcuchów gamma ludzkiej IgG. Śladowe zanieczyszczenia innymi
przeciwciałami usunięto drogą absorpcji w fazie stałej.
Przed utworzeniem koniugatu swoistość przeciwciała stwierdzono następującymi metodami:
Immunoelektroforeza krzyżowa: Jedynie w testach z wykorzystaniem 12,5 μL przeciwciała na 1 cm2 żelu z 2 μL
osocza ludzkiego pojawia się łuk immunoprecypitacyjny IgG. Barwienie: barwnik Coomassie Briliant Blue.
ELISA: W testach z wykorzystaniem pośredniej metody ELISA i ludzkiej IgA oraz IgM jako antygenów
pokrywających, nie obserwuje się znaczącej reakcji. W teście ELISA typu „sandwich” z dwoma przeciwciałami
nie obserwuje się istotnych reakcji z ludzkim osoczem pozbawionym IgG.
Może występować reakcja krzyżowa z IgG innych gatunków. Jak wykazano metodą immunoelektroforezy
rakietkowej, przeciwciało wchodzi w reakcje krzyżowe z ekwiwalentem białkowym IgG kotów, krów, jeleni,
psów, kóz, koni, norek, małp, myszy, wołów piżmowych, tchórzy, szopów, szczurów i świń (1).
Środki ostrożności
1. Do stosowania przez wyszkolony personel.
2. Produkt zawiera azydek sodu (NaN3), substancję chemiczną silnie toksyczną w czystej postaci. Azydek sodu,
zastosowany w produkcie w stężeniu, które nie jest sklasyfikowane jako niebezpieczne, może reagować z
elementami kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, powodując nagromadzenie silnie wybuchowych azydków
metali. Po usunięciu spłukać dużą ilością wody, aby zapobiec nagromadzeniu się azydku w kanalizacji.
3. Podobnie jak w przypadku wszelkich materiałów pochodzących ze źródeł biologicznych, należy stosować
właściwe procedury postępowania.
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2–8°C. Nie używać po upływie daty ważności podanej na etykiecie fiolki. Jeśli
odczynniki są przechowywane w warunkach innych niż podane powyżej, użytkownik musi zweryfikować te warunki.
Nie ma oczywistych oznak wskazujących na utratę stabilności produktu. Dlatego jednocześnie z badaniem próbek
pacjenta należy wykonywać odpowiednie kontrole. Jeśli wystąpią nieoczekiwane reakcje, których nie można
wyjaśnić różnicami w procedurach laboratoryjnych, i istnieje podejrzenie, że przyczyną może być problem z
niniejszym produktem, należy niezwłocznie skontaktować się z Działem Pomocy Technicznej naszej firmy.
Wskazówki dotyczące
sporządzania roztworu
Immunoblotting: 1:500–1:2000.
ELISA: 1:500–1:2000.
Rozcieńczenia zalecane dla testów ELISA można stosować w przypadku większości typów oznaczeń z użyciem
100 μL rozcieńczonego koniugatu w dołkach na płytce typu „microwell” i 1 mg/mL p-nitrofenylofosforanu jako
substratu (w roztworze 1 mol/L dwuetanoloaminy, 0,5 mmol/L MgCl2 o pH 9,8) i 30-minutowym cyklem inkubacji w
temperaturze pokojowej.
Jeśli nie wyznaczono trwałości odczynnika w aktualnie stosowanym systemie testowym, zaleca się go
rozcieńczać bezpośrednio przed użyciem.
Piśmiennictwo
1.
Hau J, Nilsson M, Skovgaard-Jensen H-J, de Souza A, Eriksen E, Wandall LT. Analysis of animal serum
proteins using antisera against human analogous proteins. Scand J Lab Anim Sci 1990; 17:3–7.
Objaśnienia symboli
(107762-002)
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdzić w instrukcji
stosowania
Zużyć przed
Producent
D 0336/PL/KB/24.07.03 s. 1/1
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17