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٢....................................................................................................................................................šŚǀƬĩ ƹ ƶƯŶƤƯ
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٦...................................................................................................................................................ŻŚĜǀƫ ƽŚƷŵźŝŹŚĩ
۳-۱
٦..................................................................................................................................................... ƾŴƿŹŚţ ƶƴǀƄǀě
۲-۱
٨ .................................................................................... ŢǀƠǀĩ ŚƤţŹř ƹ ŚƷ ƵŶƴƷŵ ƮƘƏ ƶƘſƺţ řŸƛ ƽŹƹōźƟ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ
۱-۳-۱
١٠ ....................................................................................................................................... ƽŚģ ƽŹƹōźƟ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ
۳-۳-۱
٩ ............................................................................................................................. źǀƴě ƽŚƷ ƵŶƴƷŵ ƮƘƏ ƹ ƱŚƳ Ŷǀƫƺţ
١١ ............................................................................................................................. ƩŚĪǀưĩƺŘƫƹř ŢƘƴƇ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ
١٢ ........................................................................................................................ ƶģŹŚě ŢƘƴƇ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ Żř ƵŵŚƠŤſř
١٣ .......................................................................................................................................ƵŶƴƿƺƃ ƖƿŚƴƇ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ
١٤ ................................................................................................................................... ƶƿżŬţ ƪŝŚƣ ƽŚƷźưǀƬě Ŷǀƫƺţ
١٤ .................................................................................................................... ŚƷ Ʃżƿŵƺǀŝ Ŷǀƫƺţ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ Żř ƵŵŚƠŤſř
١٥ ...................................................................................................................... ƽŻŹƹŚƄĩ šřŶǀƫƺţ ƹ ŚƷ Ƃĩ ŢƟō
۲-۳-۱
۴-۳-۱
۵-۳-۱
۶-۳-۱
۷-۳-۱
۸-۳-۱
۹-۳-۱
١٦ ...............................................................................................................................ĨǀưſřŹ ƽŚƸƏƺƬŴƯ ĨǀĪƠţ ۱۰-۳-۱
١٦ ................................................................................................................... ƾƄƿřŹō ƭŻřƺƫ Ŷǀƫƺţ Źŵ ŚƷŻŚĜǀƫ ŵźŝŹŚĩ ۱۱-۳-۱
١٧ ............................................................................................................................................. ĚƫŚě ƹ ŸƛŚĩ ƖƿŚƴƇ ۱۲-۳-۱
١٧ .............................................................................................................................................. ƾƈǀŴƄţ ƽŚƷŹřżŝř ۱۳-۳-۱
١٧ .................................................................................................................................. ŚƷźĮƀůƺǀŝ ƱřƺƴƗ ƶŝ ŚƷŻŚĜǀƫ ۱۴-۳-۱
١٨ ............................................................................................ Bacillus ŻŚĜǀƫ ĨǀŤǀƫŚţŚĩ ƽŚƷ ƾĭĦƿƹ ƹ ƪǀƀƳŚŤě
۴-۱
١٩ ................................................................................................................................. ƽĥƺƫƺǀŝƹźĪǀƯ ƽŶƴŝ ƶŤſŵ
۶-۱
١٩ .............................................................. ŚƷ ƮƀǀƳŚĭŹřƹźĪǀƯ Ǝſƺţ ƵŶƃ Ŷǀƫƺţ ƽŚƷŻŚĜǀƫ ƽźĭ ƩŚŝźƛ ƹ ƽŻŚſřŶū
١٩ ........................................................................................................................... ƾƿŚƿźŤĩŚŝ ƽŚƷŻŚĜǀƫ ƽŶƴŝ ƶƤŞƏ
٢٠ ......................................................................................................................................................... Ⅰ ƵŵřƺƳŚų
٢٠ .................................................................................................................................................. ².5 ƵŵřƺƳŚų źƿŻ
۵-۱
۷-۱
۱-۷-۱
۱-۷-۲
٢٠ ................................................................................................................................. ŚƷŻŚĜǀƫ ƽŶƘŝ ƶſ ƱŚưŤųŚſ
۸-۱
٢١ ...........................................................................................................................ŚƷŻŚĜǀƫ ƾĭŵŹƺųŚţ ƾƬĩ ƞǀƇƺţ
۱-۸-۱
٢٣ ................................................................................................................. Bacillus ƽŚƷŻŚĜǀƫ ƾƫŚŤƀƿźĩ ŹŚŤųŚſ
۳-۸-۱
٢١ ......................................................................................................................... ŚƷŻŚĜǀƫ ĨǀŤǀƫŚţŚĩ ƽŚƷ ƶƴǀƯō Ŷǀſř
ŢƄƷ
۲-۸-۱
٢٦ ....................................................................................................................................... ŚƷŻŚĜǀƫ ƾƿŚƯŵ ƽŹřŶƿŚě
۹-۱
٢٧ ............................................................................................................................ ŚƷŻŚĜǀƫ ƽŚƷ ƾĭĦƿƹ ƹ ƅřƺų ۱۰-۱
٢٧ ......................................................................................................................................................... ŚƷ ƩLjů źŧř ۱-۱۰-۱
٢٨ .................................................................................................................................................... ƽżƬƟ ƽŚƷ Ʊƺƿ ۲-۱۰-۱
٢٨ ........................................................................................................................................................... ŚƷŶƳŹřŵŻŚŝ ۳-۱۰-۱
٢٨ .............................................................................................................................................. ƾƿřźŤƀŝƺſ ƾĭĦƿƹ ۴-۱۰-۱
٢٩ ........................................................................................................................................................ ƮƿżƳō ŢǀŞŨţ ۵-۱۰-۱
٢٩ ........................................................................................................................................... ŚƷŻŚĜǀƫ ƽŶƃŹ Ǝƿřźƃ ۶-۱۰-۱
٢٩ .................................................................................................................................... ƽŻŚſ ƆƫŚų ƹ ƽŻŚſřŶū ۷-۱۰-۱
٣٠ ...............................................................................................................................................ƲǀŘţƹźě ƾſŶƴƸƯ ۱۱-۱
٣٠ .................................................................................................................................................... ƾƤƐƴƯ ƾůřźƏ ۱-۱۱-۱
٣١ .............................................................................................................................................. ƵŶƃ ŢƿřŶƷ ƪƯŚĪţ ۲-۱۱-۱
٣٢ .............................................................................................................. ƾţƺƿŹŚĩƺƿ ƽŚƸưŤƀǀſ Źŵ ƲǀŘţƹźě ƱŚǀŝ ۱۲-۱
٣٢ .............................................................................................. E.coli Śŝ Pichia pastoris ƾƳŚǀŝ ƮŤƀǀſ ƶƀƿŚƤƯ ۱-۱۲-۱
٣٣ ........................................................................... Saccharomyces Śŝ Pichia pastoris ƾƳŚǀŝ ƮŤƀǀſ ƶƀƿŚƤƯ ۲-۱۲-۱
٣٥ ..................................................................................................................... Pichia pastoris ƾƳŚǀŝ ƮŤƀǀſ ۱۳-۱
٣٧ ........................................................................................ Pichia pastoris źưŴƯ Źŵ ƩƺƳŚŤƯ ƝźƈƯ ƮƀǀƫƺŝŚŤƯ ۱-۱۳-۱
٣٨ ................................................................................................................................................ AOX ŹƺţƺƯƹźě ۲-۱۳-۱
٣٩ ............................................................................................................. ƩƺƳŚŤƯ ƝźƈƯ źƔƳ Żř źưŴƯ ĚǀţƺƴƟ ƲǀǀƘţ ۳-۱۳-۱
٤٠ ...................................................................................................................... Pichia pastoris ƾƳŚǀŝ ƽŚƷŵřĦƳ ۴-۱۳-۱
٤١ ............................................................................................................ Pichia pastoris Żř GS115 ĚǀţƺƳĥ ۵-۱۳-۱
٤١ ............................................................................. Pichia pastoris ƭƺƳĥ ƱƹŹŵ ƶŝ Ʊĥ ƭŚƛŵř ƹ ƱƺǀſŚƯŹƺƠƀƳřźţ ۶-۱۳-۱
٤٣ ...................................................................................................................................... ƱƺǀſŚƯŹƺƠſřźţ ƽŚƸƃƹŹ ۷-۱۳-۱
٤٣ ............................................................................................................................. Pichia źưŴƯ įŶƃŹ Ǝƿřźƃ ۸-۱۳-۱
٤٣ ................................................................................................................................................ ƂƷƹĦě ƝřŶƷř ۱۴-۱
ŚƷƁƹŹ ƹŵřƺƯ:ƭƹŵ ƪƈƟ
٤٦ ...................................................................................................................... ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ƽŚƷ ƵŚĮŤſŵ ƹ ŵřƺƯ
۱-۲
٤٦ ........................................................................................................................................................... ŚƷŶǀưſLjě
۱-۱-۲
٤٩ ........................................................................................... ŚƷ ƮƿżƳō ƲǀŘţƹźě ƹ DNA źĩŹŚƯ ƽŹŚŬţ ƽŚƷ Ţǀĩ
۳-۱-۲
٤٩ .................................................................................................................................................. ƽźŤĩŚŝ ƽŚƷŵřĦƳ
٥٠ .............................................................................................................................................................. ŚƷźưƿřźě
٥١ ................................................................................................................................................. ƾƃźŝ ƽŚƷ ƮƿżƳō
٥١ .......................................................................................................................................................... ŚƷŹřżƟř ƭźƳ
٥٢ ........................................................................................................................................................... ŚƷ ƵŚĮŤſŵ
٥٢ ................................................................................................................................................... ŚƷ ŢƄĩ ƎǀŰƯ
٥٦ ...................................................................................................................... (PCR) ŻřźưǀƬě ƽŚƷźǀŬƳŻ Ƃƴĩřƹ
ƶƳ
۲-۱-۲
۴-۱-۲
۵-۱-۲
۶-۱-۲
۷-۱-۲
۸-۱-۲
۹-۱-۲
٥٨ ........................................................................................................................................................... ŚƷ ƁƹŹ
۲-۲
٥٨ ............................................................................................................................................................ ŚƷ PCR
۱-۲-۲
٦٢ ..................................................................................................................................................... ƩŚƈţř Ƃƴĩřƹ
۳-۲-۲
٦١ ............................................................................................ PCR ƩƺƈŰƯ ƹ ŻŹŚĭō Ʃĥ Żř DNA ƽŻŚſ ƆƫŚų
٦٣ .................................................................................................................................ƽźŤĩŚŝ ŶƘŤƀƯ ƽŚƸƫƺƬſ ƶǀƸţ
٦٣ .................................................................................................................................................. ƱƺǀſŚƯŹƺƠƀƳřźţ
٦٤ .................................................................................................................................... Ţǀĩ Śŝ ŶǀưſLjě ũřźŴŤſř
٦٤ .......................................................................................................................................... ŻŹŚĭō Ʃĥ ŻŹƺƟƹźŤĪƫř
٦٥ ...................................................................................................................................................... ƾưƿżƳō ƮƌƷ
٦٦ ................................................................................pPICZB ƾƳŚǀŝ ŹƺŤĩƹ ƱƹŹŵ ƶŝ ŻŚĜǀƫ ƶŤƟŚƿ ƂƸū Ʊĥ ƩŚƤŤƳř
۲-۲-۲
۴-۲-۲
۵-۲-۲
۶-۲-۲
۷-۲-۲
۸-۲-۲
۹-۲-۲
٦٧ ...................................................................................................... pPICZ-5 ŜǀĩźţƺƳ ŶǀưſLjě Ʊŵźĩ ƾƐų ۱۰-۲-۲
٦٨ ................................................................................................................................... źưŴƯ ŶƘŤƀƯ ƽŚƸƫƺƬſ ƶǀƸţ ۱۱-۲-۲
٦٨ ........................................................................................................................... źưŴƯ ƽŚƸƫƺƬſ ƱƺǀſŚƯŹƺƠƀƳřźţ ۱۲-۲-۲
٦٩ ........................................................................................................................... SDS-PAGE Ʃĥ ŻŹƺƟƹźŤĪƫř ۱۳-۲-۲
٧٠ ...................................................................................................................................................... ƽŻŚſ ƆƫŚų ۱۴-۲-۲
٧٢ ....................................................................................................................................................... šLjŝ ƱźŤſƹ ۱۵-۲-۲
٧٤ ............................................................................................................... šŚŤǀưƫŚě ƪǀƴƟ ƹźŤǀƳ řŹŚě Śŝ ŻŚĜǀƫ ƱŚǀŝ Ţƀţ ۱۶-۲-۲
٧٤ .......................................................................................................................................................... pH-stat
۱۷-۲-۲
ŦŰŝƹŪƿŚŤƳ :ƭƺſ ƪƈƟ
٧٨ ........................................................................... Bacillus thermocatenulatus ŻŚĜǀƫ á5 Ģǀ쏌Ư ƝŸů
٧٩ .................................................................................................................................... ĨǀţŚƯŹƺƠƳřƺǀŝ šŚƘƫŚƐƯ
۱-۳
۲-۳
٨٠ ...........................................................................................................................ƲǀŘţƹźě ƭƺſƹ ƭƹŵ ŹŚŤųŚſ ƲǀǀƘţ
۱-۲-۳
٨٦ .......................................................................................................... ƮƿżƳō ƶŝ ŶƳŚĮǀƫ ƩŚƈţř ƹ ƲǀŘţƹźě įŻŚſ ƩŶƯ
۳-۲-۳
٨٥ ....................................................................................... ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ İƘǀŞƏ ŻŚĜǀƫ ŹŚŤųŚſ RMSD įźǀĭ ƵŻřŶƳř
۲-۲-۳
٨٧ ........................................................................................................................... ƂƸū ƩŚưƗř ŹƺƔƴƯ ƶŝ PCR
۳-۳
٨٨ ....................................................................................... pKG.Tá5 ŹƺŤĩƹ Źŵ btl2 Ʊĥ Źƺƌů ŶǀƿŚţ ƾſŹźŝ
۵-۳
٨٨ ............................................................................pTZ57R/T ŹƺŤĩƹ Źŵ ƶŤƟŚƿ ƂƸū btl2 Ʊĥ įŻŚſ ƶƳŚƀưƷ
٨٩ .....................................................................................................................PCR ƹ İưƿżƳō ƮƌƷ ƁƹŹ Śŝ ŶǀƿŚţ
٨٩ ........................................................................................................... ƾŝŚƿ ƾƫřƺţ ƢƿźƏ Żř á5 Ģǀ쏌Ư ƝŸů ŶǀƿŚţ
۴-۳
۱-۵-۳
۲-۵-۳
٩٠ ........................................................................................................... Pichia pastoris ƾƳŚǀŝ ƮŤƀǀſ śŚŴŤƳř
۶-۳
٩١ ....................................................... pKG.Pá5 ŜǀĩźţƺƳ ŹƺŤĩƹ Źŵ btl2 ƶŤƟŚƿ ƂƸū Ʊĥ Źƺƌů ŶǀƿŚţ ƾſŹźŝ
۸-۳
٩١ ...................................................................... pPICZáB ƾƳŚǀŝ ŹƺŤĩƹ Źŵ btl2 ƶŤƟŚƿ ƂƸū Ʊĥ įŻŚſ ƶƳŚƀưƷ
٩٢ .....................................................................................................................PCR ƹ ƾưƿżƳō ƮƌƷ ƁƹŹ Śŝ ŶǀƿŚţ
۷-۳
۱-۸-۳
٩٣ ........................................................... Pichia pastoris źưŴƯ ƽŚƸƫƺƬſ ƱƹŹŵ ƶŝ pKG.Pá5 ŶǀưſLjě ƩŚƤŤƳř
۹-۳
٩٣ ................................................................................... Pichia pastoris ŜǀĩźţƺƳ ƽŚƷ ƶƳŚƀưƷ ĚǀţƺƴƟ ƲǀǀƘţ ۱۰-۳
٩٤ .................................................................................... PCR Żř ƵŵŚƠŤſř Śŝ ŜǀĩźţƺƳ įŚƷźưŴƯ ĚǀţƺƴƟ ƾſŹźŝ ۱۱-۳
Ƶŵ
٩٥ .......(PNPP) šŚŤǀưƫŚě ƪǀƴƟ ƹźŤǀƳ řŹŚě ƱƺƯŻō Żř ƵŵŚƠŤſř Śŝ ŜǀĩźţƺƳ ŻŚĜǀƫ ƵŶƴƴĩ Ŷǀƫƺţ ƽŚƷ ƶƳŚƀưƷ ƽŻŚſ ƩŚŝźƛ ۱۲-۳
٩٦ ............................................................................................. SDS-PAGE Ʃĥ Żř ƵŵŚƠŤſř Śŝ ŻŚĜǀƫ ƱŚǀŝ ƾſŹźŝ ۱۳-۳
٩٧ ............................................................................................................................................ ŻŚĜǀƫ įŻŚſ ƆƫŚų ۱۴-۳
٩٨ ...................................................................................... ŵŹƺƟŵřźŝ ƁƹŹ Żř ƵŵŚƠŤſř Śŝ ƆƫŚų ƮƿżƳō ŢƔƬƛ ƲǀǀƘţ ۱۵-۳
٩٨ .....................................................................................................ĬƴǀţLjŝ ƱźŤſƹ Śŝ ŜǀĩźţƺƳ ŻŚĜǀƫ ƱŚǀŝ ƾſŹźŝ ۱۶-۳
٩٨ ........................................................................................................................ ŻŚĜǀƫ ŢǀƫŚƘƟ źŝ ƂƸū źŧř ƶƘƫŚƐƯ ۱۷-۳
٩٩ ................................................................................ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ İƘǀŞƏ įŚƷŻŚĜǀƫ ƾƿřźŤƀŝƺſ ƾĭĦƿƹ źŝ ƂƸū źŧř ۱-۱۷-۳
١٠٢........................................................................................ ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ƽŚƷ ŻŚĜǀƫ ŢǀƫŚƘƟ źŝ ŚƯŵ źŧř ƾſŹźŝ ۲-۱۷-۳
١٠٦.......................................................................................... ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ŻŚĜǀƫ źŝ ƾƿŚƯŵ ƽŹřŶƿŚě źŧř ƶƘƫŚƐƯ ۳-۱۷-۳
١١٠........................................................................................................ ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ŻŚĜǀƫ ŢǀƫŚƘƟ źŝ pH źŧř ۴-۱۷-۳
١١٣ ................................................................................................ ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ƽŚƷŻŚĜǀƫ źŝ ƽżƬƟ ƽŚƸƳƺƿ źŧř ۵-۱۷-۳
١١٧..................................................................................... ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ƽŚƷŻŚĜǀƫ ŢǀƫŚƘƟ źŝ ƾƫō ƽŚƸƫLjů źŧř ۶-۱۷-۳
١٢٣............................................................................................ƶŤƟŚƿ ƂƸū ƹ ƾƘǀŞƏ ƽŚƷŻŚĜǀƫ ŢǀƫŚƘƟ źŝ ŚƸŤƴūźţŵ źŧř ۷-۱۷-۳
šřŵŚƸƴƄǀěƹįźǀĭƶŬǀŤƳ:ƭŹŚƸģ ƪƈƟ
١٢٨ .................................................................................................................................................... ƽźǀĭ ƶŬǀŤƳ
١٣٠ ...................................................................................................................................................... šřŵŚƸƴƄǀě
۱-۴
۲-۴
۱۳۱................................................................................................................................................................ Ţſƺǀě
۱۳۲................................................................................................................................................................... ƖŝŚƴƯ
ƵŵŻŚƿ
ƩŚĪƃřŢſźƸƟ
ƶŰƠƇ
ƱřƺƴƗ
٢٤ ................................................................................................ ŻLJƹŹŶǀƷ á/â ƹ ƾƿŚƿźŤĩŚŝ ŻŚĜǀƫ ŹŚŤųŚſ ƶƀƿŚƤƯ :١-١ ƪĪƃ
٢٥ .................................................................................................................... BTL2 ŻŚŝ ƱƺǀſŚƯŹƺƠƴĩ ŹŚŤųŚſ :٢-١ ƪĪƃ
٤٢ ......................................................... Pichia pastoris ƭƺƳĥ ƱƹŹŵ ƶŝ Ʊĥ ƭŚƛŵř ƹ ƱƺǀſŚƯŹƺƠƀƳřźţ ƽŚƸƃƹŹ :٣-١ ƪĪƃ
٤٧ ......................................................................................................... pTZ57R/T ŹƺŤĩƹ ĨǀţŚưƃ ƱŚưŤųŚſ :۱-۲ƪĪƃ
٤٨ ................................................................................................. pPICZáA,B,C ŹƺŤĩƹ ƪţŚƃ ƾĪǀŤƳĥ ƶƄƤƳ : ۲-۲ƪĪƃ
٥٧ ................................................................................................................ SOE-PCR ƁƹŹ ĨǀţŚưƃ ƪĪƃ :۳-۲ ƪĪƃ
۷۹ ........................................................................................... ..NCBI Ƶŵřŵ ƵŚĮƿŚě Żř ƵŶƃ ƶŤƟźĭ ŻŚĜǀƫ Ʊĥ ƾƫřƺţ :١-٣ ƪĪƃ
۸۱ ................................................. .PSIPREDŢƿŚſŻřƵŵŚƠŤſřŚŝİƘǀŞƏŻŚĜǀƫƮƿżƳōƭƹŵŹŚŤųŚſƾƿƺĭƂǀě۲-۳ƪĪƃ
۸۲ .............................................. .PSIPREDŢƿŚſŻřƵŵŚƠŤſřŚŝŢƳŚţƺƯŻŚĜǀƫƮƿżƳōƭƹŵŹŚŤųŚſƾƿƺĭƂǀě۳-۳ƪĪƃ
۸۳ .................................................... .PSIPREDŢƿŚſŻřƵŵŚƠŤſřŚŝƶŤƟŚƿƂƸūŻŚĜǀƫƮƿżƳōĨǀţŚưƃŹŚŤųŚſ۴-۳ƪĪƃ
۸۴ .................................................... ƾƿƺĭƂǀěŻřžěƶŤƟŚƿƂƸūƹƾƘǀŞƏŻŚĜǀƫƭƺſŹŚŤųŚſƾĪǀƟřźĭƪĪƃ۵-۳ƪĪƃ
۸۵ ......................................................................................... ƾƣŚŞƐƳřƩŶƯŚŝƶŤƟŚƿƂƸūƹƾƘǀŞƏŻŚĜǀƫƂƿŚưƳ۶-۳ƪĪƃ
۸۷ .......................................................................................... ⅢƹⅡƹⅠįŚƷPCRƩƺƈŰƯŻŹƺƟƹźŤĪƫř۷-۳ƪĪƃ
۸۸ .........................................................................................pKG.Tá5ŜǀĩźţƺƳƽŚƷŶǀưſLj쯏ƺƟƹźŤĪƫř۸-۳ƪĪƃ
۸۹ ..................................................................... pKG.Tá5ƽŚƷŶǀưſLjěƾưƿżƳōƮƌƷƩƺƈŰƯŻŹƺƟƹźŤĪƫř۹-۳ƪĪƃ
۹۰ ..................................... NCBIŹŵƵŶƃŢŞŧƱĥŚŝƱōBLASTƹƶŤƟŚƿƂƸūbtl2ƱĥƾƫřƺţƲǀǀƘţŪƿŚŤƳ۱۰-۳ƪĪƃ
۹۱ ..................................................................................................... pKG.Pá5ƽŚƷŶǀưſLj쯏ƺƟƹźŤĪƫř۱۱-۳ƪĪƃ
۹۲ ................................................................................. pKG.Pá5ƽŚƷŶǀưſLjěƾưƿżƳōƮƌƷŻŹƺƟƹźŤĪƫř۱۲-۳ƪĪƃ
۹۳ ........................................................................................................... .pKG.Pá5ŶǀưſLj쯏ƺƟƹźŤĪƫř۱۳-۳ƪĪƃ
۹۴ ............................................................................. ƱƺǀſŚƯŹƺƠƀƳřźţŻřžěŜǀĩźţƺƳźưŴƯƽŚƷƾƴƬĩŶƃŹ۱۴-۳ƪĪƃ
۹۵ .................................................................................... AOX ƽŚƷźưƿřźěŚŝPCRƩƺƈŰƯŻŹƺƟƹźŤĪƫř۱۵-۳ƪĪƃ
۹۶ ....................................................................................... šŚŤǀưƫŚěƪǀƴƟƹźŤǀƳřŹŚěŢƀţŹŵŻŚĜǀƫƱŚǀŝİſŹźŝ۱۶-۳ƪĪƃ
۹۶ ..................................... ŚƤƫřŻřžěPichia pstorisŜǀĩźţƺƳźưŴƯŢƄĩƎǀŰƯƾƿƹŹŻŚƟŻŹƺƟƹźŤĪƫř۱۷-۳ƪĪƃ
٩٧ ......................................................................................................... ŻŚĜǀƫįŻŚſƆƫŚųƪůřźƯŻŹƺƟƹźŤĪƫř۱۸-۳ƪĪƃ
٩٨ ................................................................................................................................................ šLjŝƱźŤſƹ۱۹-۳ƪĪƃ
١٠٢ ........................... ƞƬŤŴƯįŚƷřźŤƀŝƺſŹƺƌůŹŵƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏįŚƷŻŚĜǀƫƾưƿżƳōŢǀƫŚƘƟįźǀĭƵŻřŶƳř:۲۰-۳ ƪĪƃ
١٠٥ ............................................................... ƞƬŤŴƯįŚƷŚƯŵŹŵƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏįŚƷƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟİſŹźŝ:۲۱-۳ ƪĪƃ
١٠٨ ................... ƞƬŤŴƯįŚƷƱŚƯŻŹŵƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏƮƿżƳōźŝŵřźĮǀŤƳŚſƶūŹŵ۶۰ƾƿŚƯŵįŹřŶƿŚěİſŹźŝ:۲۲-۳ ƪĪƃ
١١٢ ........................................................................ ƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝƞƬŤŴƯįŚƷpHźǀŧŚţ:۲۳-۳ ƪĪƃ
١١٦ .................................................................. ƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝįżƬƟįŚƷƱƺƿźǀŧŚţİſŹźŝ:۲۴-۳ ƪĪƃ
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١٢٢ ...................................................................... ƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏįŚƷƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝİƫōįŚƷƩLjůźǀŧŚţ:۲۵-۳ ƪĪƃ
١٢٤ ................................................................. ƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝƞƬŤŴƯįŚƷŢƴūźţŵźǀŧŚţ:۲۶-۳ ƪĪƃ
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٥١ ........................................................................................................... ƢǀƤŰţ Ʋƿř Źŵ ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ƽŚƷźưƿřźě :۳-۲ ƩƹŶū
٥١ .................................................................................................. ƢǀƤŰţ Ʋƿř Źŵ ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ƾƃźŝ ƽŚƷ ƮƿżƳō :۴-۲ƩƹŶū
٥٨ ..................................................................................................................... PCRⅠ Źŵ ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ŵřƺƯ :۵-۲ ƩƹŶū
٥٩ ............................................................................... ŻŚĜǀƫ Ʊĥ Żř 5 ƾƫřƺţ ƝŸů ƩŚưƗř ƽřźŝ PCRⅠ ƶƯŚƳźŝ :٦-٢ ƩƹŶū
٥٩ ..................................................................................................................... PCRⅡ Źŵ ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ŵřƺƯ :۷-۲ ƩƹŶū
٦٠ .......................................................................... ŻŚĜǀƫ Ʊĥ Żř 5 ƾƫřƺţ Źŵ ƝŸů ƩŚưƗř ƽřźŝ PCRⅡ ƶƯŚƳźŝ :٨-٢ ƩƹŶū
٦٠ ..................................................................................................................... PCRⅢ Źŵ ƵŵŚƠŤſř ŵŹƺƯ ŵřƺƯ :۹-۲ ƩƹŶū
٦١ ........................................................................ ŻŚĜǀƫ Ʊĥ Żř 5 ƾƫřƺţ Źŵ ƝŸů ƩŚưƗř ƽřźŝ PCRⅢ ƶƯŚƳźŝ :١٠-٢ ƩƹŶū
٦٢ ........................................................................... PCR ƩƺƈŰƯ 3´ ƽŚƸŤƳř ƶŝ ƲǀƳŵō ŶǀţƺŘƬĩƺƳ Ʊŵźĩ ƶƟŚƋř :١١-٢ ƩƹŶū
٦٢ ................................................................. PCR ƩƺƈŰƯ 3´ ƽŚƸŤƳř ƶŝ ƲǀƳŵō ŶǀţƺŘƬĩƺƳ Ʊŵźĩ ƶƟŚƋř ƶƯŚƳźŝ :۱۲-۲ ƩƹŶū
٦٢ ................................................................................................. ƩŚƈţř Ƃƴĩřƹ ƽřźŝ ŻŚǀƳ ŵŹƺƯ źƿŵŚƤƯ ƹ ŵřƺƯ :۱۳-۲ ƩƹŶū
٦٦ .............................................................................................................. XbaⅠ, PstⅠ Śŝ ƾưƿżƳō ƮƌƷ :۱۴-۲ ƩƹŶū
٦٦ .................................................................................................... pPICZáB ŹƺŤĩƹ ƱƹŹŵ ƩŚƈţř Ƃƴĩřƹ :۱۵-۲ ƩƹŶū
٦٧ ..........................................................................................................................................AOX Śŝ PCR :۱۶-۲ ƩƹŶū
٦٧ ............................................................................................................. AOX ƽŚƷźưƿřźě Śŝ PCR Ǝƿřźƃ :۱۷-۲ ƩƹŶū
٦٧ ............................................................................................................................... SacⅠŚŝ ƾưƿżƳō ƮƌƷ :۱۸-۲ ƩƹŶū
٧٠ ....................................................................................................... ƆŴƄƯ ŶƇŹŵ Śŝ ƾƳŚŤŰţ Ʃĥ šŚƈŴƄƯ :۱۹-۲ ƩƹŶū
٧٢ ................................................................................................ ŵŹƺƟŵřźŝ ƁƹŹ ƶŝ ƲǀŘţƹźě ŹřŶƤƯ ƽźǀĭ ƵŻřŶƳř ٢٠-٢ ƩƹŶū
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١٠٣ ............................................................................................. ŚƯŵźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۸-۳ ƩƹŶū
١٠٤ ......................................................İƘǀŞƏƹƶŤƟŚƿƂƸūįŚƷƮƿżƳōźŝƞƬŤŴƯįŚƷŚƯŵźŧřįŚƷƲǀĮƳŚǀƯƶƀƿŚƤƯ :۹-۳ ƩƹŶū
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١٠٦ ..........................................................................ƾƿŚƯŵįŹřŶƿŚěźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۱۱-۳ ƩƹŶū
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١١٠ ......................................................................................... (pHźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۱۴-۳ ƩƹŶū
١١١ ....................................................................................... ƮƿżƳōźŝƞƬŤŴƯįŚƷpHźŧřįŚƷƲǀĮƳŚǀƯƶƀƿŚƤƯ :۱۵-۳ ƩƹŶū
١١٤ ....................ƶŤƟŚƿƂƸūƹİƘǀŞƏįŚƷƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝįżƬƟįŚƷƱƺƿźŧřƶŝƍƺŝźƯįŹŚƯōİƠǀƇƺţįŚƷƵŵřŵ:۱۶-۳ ƩƹŶū
١١٤ ................................................................................. įżƬƟƱƺƿźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۱۷-۳ ƩƹŶū
١١٥ ...............................................................................ƮƿżƳōźŝƞƬŤŴƯįżƬƟįŚƷƱƺƿźŧřįŚƷƲǀĮƳŚǀƯƶƀƿŚƤƯ :۱۸-۳ ƩƹŶū
١١٨ .................................. ƮƿżƳōįŚƷƾĭĦƿƹƹŢǀƫŚƘƟźŝİƫōįŚƷƩLjůźŧřƶŝƍƺŝźƯįŹŚƯōİƠǀƇƺţįŚƷƵŵřŵ:۱۹-۳ ƩƹŶū
١١٨ .......................................................................... İƫōįŚƷƩLjůźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۲۰-۳ ƩƹŶū
١١٩ .............................................................................. ƮƿżƳōźŝƞƬŤŴƯİƫōįŚƷƩLjůźŧřįŚƷƲǀĮƳŚǀƯƶƀƿŚƤƯ :۲۱-۳ ƩƹŶū
١٢٣ ............... ƮƿżƳōŢǀƫŚƘƟźŝƞƬŤŴƯįŚƷŢƴūźţŵźŧřƶŝƍƺŝźƯKolmogrov-smirnovƱƺƯŻōƽŚƷƵŵřŵ :۲۲-۳ ƩƹŶū
١٢٣ ................................................................................ŚƷŢƴūźţŵźŧřİſŹźŝžƳŚƿŹřƹżǀƫŚƳōŻřƪƇŚůŪƿŚŤƳ:۲۳-۳ ƩƹŶū
١٢٤ ................................................................................ ƮƿżƳōźŝƞƬŤŴƯįŚƷŢƴūźţŵźŧřįŚƷƲǀĮƳŚǀƯƶƀƿŚƤƯ :۲۴-۳ ƩƹŶū
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R1COOR2+H2O R1COOH+R2OH
R1COOH+R2OHR1COOR2+H2
R1COOR2+R3COOHR3COOR2+R1COOH
R1COOR2+R3COOR4R3COOR2+R1COOR4
R1COOH+R2OHR1COOR2+H2O
R1COOR2+R3OHR1COOR3+R2O
R1COOR2+R3NH2R1CONHR3+R2OH
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٤
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.[۳۷]
1. Michaelis- Menten
2. Interfacial activation
3. Regioselective
4. Ester synthesis
٤
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1. Biocatalyst
2. Convenient
3. Safer
4. Site directed mutagenesis
٥
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٦
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1. Claude Bernard