ZAGADNIENIA na konwersatorium – III rok I stopień Analityka

ZAGADNIENIA na konwersatorium – III rok I stopień Analityka
Przedmiot: Techniki elektromigracyjne w analizie chemicznej
1.
Techniki separacyjne, podstawowy podział i zastosowanie.
2.
Mechanizm rozdzielania elektroforetycznego (ruchliwość elektroforetyczna, przepływ elektroosmotyczny,
przepływ laminarny, współczynnik retencji).
3.
Podstawowe parametry rozdzielania elektroforetycznego (czas migracji, sprawność, selektywność, rozdzielczość
– porównanie z technikami chromatograficznymi).
4.
Optymalizacja warunków rozdzielania elektroforetycznego (polaryzacja elektrod, napięcia stosowane w czasie
rozdzielania, dobór temperatury, średnicy i długości kapilary, pH, siły jonowej, substancji modyfikujących
bufor).
5.
Detekcja w technikach elektromigracyjnych – spektrofotometria, fluorescencja, laserowo wzbudzona
fluorescencja, detekcja
refraktometryczna,
konduktometryczna,
amperometryczna,
spektrometria mas,
spektroskopia magnetycznego rezonansu jądrowego, detekcja bezpośrednia i pośrednia.
6.
Aparatura do rozdzielania elektroforetycznego i jej automatyzacja.
7.
Micelarna chromatografia elektrokinetyczna – czynniki wpływające na proces rozdzielania (surfaktanty pH
buforu rozdzielającego, sprawność, selektywność, współczynnik retencji, kolejność elucji).
8.
Izotachoforeza – warunki rozdzielania, kolumna rozdzielająca, stosowane detektory i substancje rozdzielające.
9.
Zastosowanie izotachoforezy z innymi technikami analitycznymi.
10. Kapilarne ogniskowanie izoelektryczne – mechanizm rozdzielania, etapy postępowania badawczego.
11. Dwuetapowe i jednoetapowe ogniskowanie izoelektryczne – podobieństwa i różnice.
12. Elektroforeza żelowa, żel agarozowy.
13. Elektroforeza żelowa w warunkach natywnych i denaturujących – podobieństwa i różnice.
14. Dwuwymiarowa elektroforeza żelowa – procedura przygotowania i wprowadzania próbki, etapy rozdzielania.
15. Elektroforeza żelowa – barwienie białek, identyfikacja białek za pomocą spektrometrii mas, dokumentacja.
16. Elektrochromatografia kapilarna, mechanizm rozdzielania, określenie zależności ruchliwości elektroosmotycznej
od powierzchni własnej fazy stacjonarnej, porównanie z chromatografią cieczowa.
17. Elektrochromatografia kapilarna – charakterystyka aparatury i kolumn.
18. Elektrochromatografia planarna – rozwój metody, stosowana aparatura, najważniejsze wady i zalety.
19. Elektroforeza w układach niewodnych – stosowane rozpuszczalniki i kapilary, rozdzielanie cząsteczek
nierozpuszczalnych w wodzie, związków nieposiadających ładunku i związków optycznie czynnych.
20. Metody zatężania analitów w kapilarze – spiętrzanie ze wzmocnieniem pola, spiętrzanie w wyniku
wprowadzenia próbki ze wzmocnieniem pola, spiętrzanie z dużą strefą próbki, spiętrzanie ze wzmocnieniem
pola w wyniku manipulacji pH.
21. Metody zatężania analitów w kapilarze, wg mechanizmu przejściowej izotachoforezy, wg pseudoprzejściowej
izotachoforezy, w wyniku dynamicznego skrzyżowania pH, zatężanie poprzez przeciwprądowe ogniskowanie.
22. Metody zatężania próbki micelarnej elektrokinetycznej chromatografii – spiętrzanie ze wzmocnieniem pola,
zmiatanie, spiętrzanie z wysokim stężeniem soli, elektrokinetyczne wprowadzanie próbki, spiętrzanie w wyniku
wprowadzenia próbki ze wzmocnieniem pola.
23. Metody rozdzielania stereoizomerów – mechanizm rozdzielania, chiralne selektor, etery koronowe, surfaktanty,
kompleksy metali, makrocykliczne antybiotyki, naturalne i syntetyczne polimery.
24. Miniaturyzacja technik elektroforetycznych.
25. Metabolomika – zastosowanie technik elektromigracyjnych w poszukiwaniu biomarkerów.
26. Zastosowanie technik elektromigracyjnych w analizie żywności (polifenole, barwniki, witaminy, dodatków do
żywności, aminokwasy, peptydy, białka).
27. Zastosowanie technik elektromigracyjnych w analizie żywności (węglowodany, kwasy nukleinowe, aminy
biogenne, naturalne toksyny, pestycydy, antybiotyki).
28. Zastosowanie technik elektromigracyjnych w analizie środowiskowej.
29. Etapy przygotowania próbki do analizy technikami elektromigracyjnymi.
30. Elektroforeza chipowa - „lab-on-a-chip” - dedykowana inżynierii komórkowej.
31. Interpretacja elektroferogramów w analizie ilościowej i jakościowej.
32. Derywatyzacja w elektroforezie kapilarnej.
33. Techniki elektromigracyjne w oznaczaniu mikroorganizmów.
34. Podobieństwa i różnice w chromatografii cieczowej i elektrochromatografii kapilarnej.