1 lp. Ćwiczenia praktyczne

MIKROBIOLOGIA I IMMUNOLOGIA
dla studentów II roku studiów I st.
na kierunku KOSMETOLOGIA
Ćwiczenia 3
Dezynfekcja i sterylizacja. Pojęcia: dezynfekcja, sterylizacja, aseptyka, antyseptyka, sanityzacja,
środki bakteriobójcze i bakteriostatyczne. Metody dezynfekcji i sterylizacji (chemiczne
i fizyczne). Zasady skutecznej dezynfekcji i sterylizacji. Czynniki wpływające na efektywność
środków do dezynfekcji. Dezynfekcja i sterylizacja w gabinecie kosmetycznym. Badanie
skuteczności dezynfekcji rąk. Badanie wrażliwości drobnoustroju na działanie chemicznych
środków do dezynfekcji. Badanie skuteczności wybranych metod sterylizacji i dezynfekcji.
liczba godzin
2
Zagadnienia do zajęć 3.
1. Pojęcia: dezynfekcja, sterylizacja, aseptyka, antyseptyka, sanityzacja
2. Działanie bakteriobójcze i bakteriostatyczne.
3. Pasteryzacja.
4. Dezynfekcja – definicja, metody chemiczne i termiczne.
5. Cechy idealnego środka dezynfekcyjnego.
6. Czynniki wpływające na efektywność środków do dezynfekcji.
7. Podział chemicznych środków do dezynfekcji i mechanizmy działania różnych środków do dezynfekcji.
8. Sterylizacja – definicja, metody chemiczne i fizyczne.
9. Wymagania sanitarno-higieniczne jakim powinny odpowiadać gabinety kosmetyczne.
lp. Ćwiczenia praktyczne
1
Badanie skuteczności dezynfekcji rąk (2 szalki/parę)
- szalkę z agarem odżywczym podzielić na trzy równe części i opisać na dnie (K-kontrola, OH-alkohol, M-mydło)
- delikatnie uchylić wieczko szalki i na części „K” wykonać odcisk opuszka 1 palca przytrzymując palec przez ok.
10 sek., szybko zamknąć szalkę,
- watą nasączoną 70% etanolem dokładnie przetrzeć 2 palec, po czym ponownie lekko uchylić wieczko szalki i na
części „OH” wykonać odcisk drugiego palca, szybko zamknąć szalkę,
- wykonać higieniczne mycie rąk techniką Ayliffe’a, po czym ponownie lekko uchylić wieczko szalki i na części „M”
wykonać odcisk trzeciego palca, szybko zamknąć szalkę,
- szalkę inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji porównać wzrost we wszystkich sektorach szalki i ocenić skuteczność dezynfekcji i mycia rąk.
Badanie skuteczności dezynfekcji rąk - odcisk palców na agarze odżywczym
Odcisk palca przed
Odcisk palca przetartego 70%
Odcisk palca umytej dłoni
dezynfekcją/myciem – K
etanolem – OH
–M
ocena wzrostu:
ocena wzrostu:
ocena wzrostu:
1
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
1
2
Badanie wrażliwości drobnoustroju na działanie chemicznych środków do dezynfekcji (1 szalka/para)
- szalkę Petri’ego z agarem odżywczym podzielić na 4 równe części i opisać na dnie,
- wykonać posiew powierzchniowy (murawkowy, metoda płytek tartych) – za pomocą pipety automatycznej ze
sterylną końcówką przenieść 0,1 ml zawiesiny Escherichia coli na szalkę Petri’ego z agarem odżywczym (lekko
uchylając wieczko),
- wyjałowić szklaną głaszczkę (zanurzając w etanolu i wypalając w płomieniu palnika), ostudzić głaszczkę
i rozprowadzić nią naniesioną zawiesinę bakterii równomiernie po powierzchni podłoża, po czym ponownie
wyjałowić głaszczkę,
- po wykonaniu posiewu powierzchniowego w każdym sektorze położyć po jednym sterylnym papierowym krążku
nasączonym nadtlenkiem wodoru, etanolem 70%, etanolem 96% lub sterinolem,
- nasączanie krążka związkiem dezynfekującym: końcówki pęsety należy zanurzyć w etanolu i opalić w płomieniu
palnika, tak wyjałowioną pęsetą złapać sterylny krążek i zanurzyć w roztworze związku dezynfekującego
(nasączony krążek należy położyć na powierzchni agaru lekko uchylając wieczko płytki),
- płytkę inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji zmierzyć średnicę strefy zahamowania wzrostu wokół krążków w mm i określić wrażliwość
mikroorganizmu na stosowane środki dezynfekujące.
2
Badanie wrażliwości drobnoustroju na działanie chemicznych środków do dezynfekcji,
materiał biologiczny: Escherichia coli, posiew powierzchniowy na 1 szalkę z agarem odżywczym
Związek chemiczny
Średnica strefy zahamowania wzrostu wokół krążków w mm
nadtlenek wodoru 3%
etanol 70%
etanol 96%,
sterinol (chlorek benzalkonionowy)
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
3
Badanie skuteczności działania promieniowania ultrafioletowego na mieszaną kulturę bakterii
- przygotować 2 szalki Petri’ego z agarem odżywczym i opisać na dnie – 1- (+)UV, 2 – (-)UV,
- wykonać posiew powierzchniowy (jak w pkt. 1) – sterylnie przenieść 0,1 ml mieszanej kultury bakterii na szalkę
Petri’ego z agarem odżywczym i rozprowadzić wyjałowioną szklaną głaszczką równomiernie po powierzchni
podłoża,
- z jednej szalki ((+)UV ) zdjąć wieczko i naświetlać przez 15 minut promieniami UV,
- UWAGA: nie przebywać w strefie działania promieni UV!
- obie płytki inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji ocenić skuteczność działania promieniowania UV.
3
Badanie skuteczności działania promieniowania ultrafioletowego (UV) na mieszaną kulturę bakterii,
materiał biologiczny: mieszana kultura bakterii, posiew powierzchniowy na 2 szalki z agarem odżywczym
Szalka kontrolna (nie naświetlana)
Szalka naświetlana UV
ocena wzrostu i opis:
ocena wzrostu i opis:
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
2
4
Badanie skuteczności filtracji membranowej - prezentacja
Pożywka przed filtracją
Pożywka po filtracji
ocena wzrostu:
ocena wzrostu:
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
5
Wykonaj zadanie
Narzędzia wielorazowego użytku stosowane w gabinetach kosmetycznych, zarówno powodujące jak i nie
powodujące naruszenia ciągłości tkanek, wymagają dezynfekcji. Środki chemiczne służące do
zanurzeniowej dezynfekcji narzędzi często są koncentratami, z których przygotowuje się roztwory robocze
poprzez odpowiednie rozcieńczenie wodą wodociągową. Jaką ilość skoncentrowanego środka do
dezynfekcji należy połączyć z wodą aby otrzymać 5 litrów 1,5% roztworu roboczego?
Objętość środka do dezynfekcji:............................................. ml
Objętość wody:....................................................................... ml
6
Co oznaczają następujące litery umieszczone na etykietach środków dezynfekujących?
B
– ...........................................................................................................................................
F
– ...........................................................................................................................................
V
– ...........................................................................................................................................
Tbc – ...........................................................................................................................................
S
– ...........................................................................................................................................
CE – ...........................................................................................................................................
3