Ćwiczenie nr 5

MIKROBIOLOGIA KOSMETOLOGICZNA
dla studentów II roku, studiów I st.
kierunku KOSMETOLOGIA
Ćwiczenie 5
Metody i zasady skutecznej dezynfekcji. Czynniki wpływające na efektywność środków do
dezynfekcji. Dezynfekcja i sterylizacja w gabinecie kosmetycznym. Higiena rąk. Flora stała,
przejściowa, infekcyjna skóry rąk. Badanie czystości mikrobiologicznej rąk i skuteczności
dezynfekcji rąk. Badanie skuteczności wybranych metod dezynfekcji.
liczba godzin
2
Zagadnienia do ćwiczeń 5
1. Dezynfekcja – definicja, podział metod dezynfekcji.
2. Mechanizmy działania chemicznych środków do dezynfekcji.
3. Cechy idealnego środka dezynfekcyjnego.
4. Czynniki wpływające na efektywność środków do dezynfekcji.
5. Flora stała, przejściowa, infekcyjna skóry rąk.
6. Higiena rąk - technika mycia rąk według Ayliffe’a i wsp.
7. Zasady stosowania dezynfekcji i sterylizacji w gabinetach kosmetycznych.
lp. Ćwiczenia praktyczne
1
Badanie wrażliwości mikroorganizmów na działanie wybranych chemicznych środków do dezynfekcji
szczepy: Escherichia coli, Bacillus subtilis
podłoże: agar odżywczy
związki chemiczne: nadtlenek wodoru 3%,
etanol 70%,
sterinol (chlorek benzalkonionowy - czwartorzędowy związek amoniowy)
etanol 96%,
incidur
- szalkę Petri’ego z agarem odżywczym podzielić na 5 równych części i opisać na dnie,
- wykonać posiew powierzchniowy (murawkowy, metoda płytek tartych) – za pomocą pipety automatycznej ze
sterylną końcówką przenieść 0,1 ml zawiesiny Escherichia coli lub Bacillus subtilis na szalkę Petri’ego z agarem
odżywczym (lekko uchylając wieczko),
- wyjałowić szklaną głaszczkę (zanurzając w etanolu i wypalając w płomieniu palnika), ostudzić głaszczkę
i rozprowadzić nią naniesioną zawiesinę bakterii równomiernie po powierzchni podłoża, po czym ponownie
wyjałowić głaszczkę,
- po wykonaniu posiewu powierzchniowego w każdym sektorze położyć po jednym sterylnym papierowym krążku
nasączonym nadtlenkiem wodoru 3%, etanolem 70%, etanolem 96%, sterinolem lub incidurem,
- nasączanie krążka związkiem dezynfekującym: końcówki pęsety należy zanurzyć w etanolu i opalić w płomieniu
palnika, tak wyjałowioną pęsetą przenieść 5 sterylnych krążków na jałową, pustą, opisaną szalkę i nasączyć krążki
20 µl odpowiedniego roztworu związku dezynfekującego (nasączony krążek należy położyć na powierzchni agaru
lekko uchylając wieczko płytki),
- płytkę inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji zmierzyć średnicę strefy zahamowania wzrostu wokół krążków w mm i określić wrażliwość
mikroorganizmu na stosowane środki dezynfekujące.
Związek chemiczny
Średnica strefy zahamowania wzrostu wokół krążków w mm
Escherichia coli
Bacillus subtilis
nadtlenek wodoru 3%
etanol 70%
etanol 96%
sterinol
incidur
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
1
2
Badanie czystości mikrobiologicznej rąk – metoda tamponowa (2 szalki/para)
- jałową pęsetą pobrać wacik i wprowadzić go do płynu płuczącego, odcisnąć z nadmiaru płynu i pobrać wymaz
z wewnętrznej części dłoni – należy dokładnie „omieść” przestrzenie między palcami, opuszki palców i paznokcie,
- wprowadzić wacik do słoika zawierającego 20 ml płynu płuczącego i wytrząsać przez 1 minutę,
- pobrać 1 ml płynu płuczącego jałową pipetą i przenieść do jałowej, opisanej szalki Petriego,
- zalać upłynnionym agarem odżywczym (ok. 15 ml), starannie wymieszać inokulum z agarem, odstawić do
zastygnięcia podłoża agarowego,
- wykonać higieniczne mycie rąk techniką Ayliffe’a i powtórzyć opisane czynności dla drugiej ręki po jej umyciu
(korzystając z nowego jałowego wacika i płynu płuczącego),
- obie szalki inkubować w temp. 37°C, przez 48 godzin,
- po okresie inkubacji zliczyć wszystkie kolonie wyrosłe na agarze odżywczym - obliczyć ogólną liczebność
drobnoustrojów - pamiętając, że wysiewano po 1 ml z objętości 20 ml,
- ocenić stan czystości rąk i porównać wyniki dla rąk nieumytych i czystych.
Obliczenia
Liczba wszystkich wyrosłych
kolonii
Ogólna liczebność
drobnoustrojów
(po uwzględnieniu objętości
posiewanego płynu)
Przed myciem rąk
Po umyciu rąk
Wnioski: ……………………………………………………………………………………………………………
………………………………………………………………………………………………………………………
3
Badanie skuteczności dezynfekcji rąk (1 szalka/para)
- szalkę z agarem odżywczym podzielić na trzy równe części i opisać na dnie (K-kontrola, OH-alkohol, M-mydło),
- delikatnie uchylić wieczko szalki i na części „K” wykonać odcisk opuszka jednego palca przytrzymując palec przez
ok. 10 sek., szybko zamknąć szalkę,
- watą nasączoną 70% etanolem dokładnie przetrzeć drugi (inny) palec, po czym ponownie lekko uchylić wieczko
szalki i na części „OH” wykonać odcisk drugiego palca, szybko zamknąć szalkę,
- wykonać higieniczne mycie rąk techniką Ayliffe’a, po czym ponownie lekko uchylić wieczko szalki i na części „M”
wykonać odcisk trzeciego palca, szybko zamknąć szalkę,
- szalkę inkubować w temperaturze 37ºC, przez 48 godzin, do góry dnem,
- po okresie inkubacji porównać wzrost we wszystkich sektorach szalki i ocenić skuteczność dezynfekcji i mycia rąk.
Badanie skuteczności dezynfekcji rąk - odcisk palców na agarze odżywczym
Odcisk palca przed
Odcisk palca przetartego 70%
Odcisk palca umytej dłoni
dezynfekcją/myciem – K
etanolem – OH
–M
ocena wzrostu:
ocena wzrostu:
ocena wzrostu:
3
Wnioski:.......................................................................................................................................................................
......................................................................................................................................................................................
2
4
Wykonaj zadanie
Narzędzia wielorazowego użytku stosowane w gabinetach kosmetycznych, zarówno powodujące jak i nie
powodujące naruszenia ciągłości tkanek, wymagają dezynfekcji. Środki chemiczne służące do
zanurzeniowej dezynfekcji narzędzi często są koncentratami, z których przygotowuje się roztwory robocze
poprzez odpowiednie rozcieńczenie wodą wodociągową. Jaką ilość skoncentrowanego środka do
dezynfekcji należy połączyć z wodą aby otrzymać 5 litrów 1,5% roztworu roboczego?
Objętość środka do dezynfekcji:............................................. ml
Objętość wody:....................................................................... ml
5
Co oznaczają następujące litery umieszczone na etykietach środków dezynfekujących?
B
– ...........................................................................................................................................
F
– ...........................................................................................................................................
V
– ...........................................................................................................................................
Tbc – ...........................................................................................................................................
S
– ...........................................................................................................................................
CE – ...........................................................................................................................................
3