gDNA standard Legionella pneumophila
Transkrypt
gDNA standard Legionella pneumophila
gDNA standard Legionella pneumophila Roztwór wzorcowy genomowego DNA z Legionella pneumophila (ATCC® 13152) Nr kat.: DNA04 Ilość gDNA: 100 µL o stężeniu 1 × 106 genomów/µL Amplicon sp. z o. o. ul. Duńska 9 54-427 Wrocław Polska, NIP: 8943052339, KRS: 0000501830 www.amplicon.pl email: [email protected], tel. +48 71 733 67 06, fax +48 71 733 67 24 ZASTOSOWANIE Roztwór wzorcowy genomowego DNA Legionella pneumophila może być użyty w typowych zastosowaniach biologii molekularnej m.in.: jako matryca w reakcji PCR do namnożenia wybranego fragmentu genomowego DNA; jako kontrola pozytywna w reakcjach PCR/Real Time PCR; do określenia specyficzności reakcji PCR/Real Time PCR; do określenia wydajności i zakresu liniowości reakcji PCR/Real Time PCR; do wyznaczenia limitu detekcji w reakcjach PCR/Real Time PCR; do określenia powtarzalności reakcji PCR/Real Time PCR; do sporządzenia krzywej wzorcowej wykorzystywanej do określenia zawartości gDNA Legionella pneumophila w uzyskanych preparatach DNA. W celu sporządzenia krzywej wzorcowej, określenia wydajności, zakresu liniowości i/lub limitu detekcji reakcji PCR/Real Time PCR należy przygotować szereg seryjnych rozcieńczeń roztworu wzorcowego gDNA w wybranym zakresie (np. w zakresie od 5 x 105 genomów/µL do 5 genomów/µL stosując 10-krotne rozcieńczenia seryjne). SKŁADNIKI ZESTAWU Nazwa Ilość Kolor wieczka Standard gDNA 2 × 50 µL Czerwony Bufor TE, pH 8,0 2 × 1,5 mL Biały W skład buforu TE, pH 8,0 wchodzą: 10 mM Tris-HCl, pH 8,0, 0,1 mM EDTA pH 8,0. TRANSPORT i PRZECHOWYWANIE Transport odbywa się w warunkach obniżonej temperatury (0-8°C). Po otrzymaniu przesyłki należy ją natychmiast rozpakować. Roztwór wzorcowy gDNA przechowywać w 2-8°C (kilka tygodni) lub w -20°C (dłuższy okres przechowywania). Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania roztworu wzorcowego gDNA. 2 OPIS PRODUKTU Roztwór genomowego DNA uzyskano z hodowli bakteryjnej znajdującej się na granicy fazy logarytmicznego wzrostu i fazy stacjonarnej. Genomowy DNA wyizolowano metodą wykorzystującą złoże krzemionkowe. Jakość uzyskanego roztworu gDNA oceniono poprzez wykonanie widma spektrofotometrycznego w zakresie 220-320 nm oraz elektroforezę w żelu agarozowym. Stężenie roztworu oceniono metodą spektrofotometryczną wykorzystując krzywą standardową stworzoną w oparciu o wzorcowe roztwory gDNA ze spermy śledzia, po czym roztwór rozcieńczono do stężenia 1 × 106 genomów/µL. Masę cząsteczkową gDNA obliczono na podstawie wielkości genomu Legionella pneumophila i zawartości par GC. UWAGI DODATKOWE Roztwór wzorcowy genomowego DNA jest przeznaczony do zastosowań typu „Badania i Rozwój” (B+R). Producent nie ponosi odpowiedzialności za wykorzystanie niniejszego produktu do zastosowań niezgodnych z przeznaczeniem, w tym do zastosowań związanych z diagnostyką medyczną i weterynaryjną. Należy dołożyć starań, aby nie dopuścić do kontaminacji roztworem gDNA innych odczynników używanych w laboratorium, w tym innych roztworów gDNA innych gatunków lub odczynników stosowanych w reakcji PCR/Real Time PCR. Zanieczyszczenie krzyżowe może prowadzić do wyników fałszywie pozytywnych i błędnych wniosków w analizach mających na celu określenie specyficzności reakcji PCR/Real Time PCR. W celu zwiększenia stabilności genomowego DNA w długich okresach czasu roztwór wzorcowy gDNA można przechowywać w -80°C podzielony na mniejsze porcje w celu uniknięcia wielokrotnych cykli zamrożenia/rozmrożenia. Roztwór wzorcowy genomowego DNA i roztwór TE pH 8,0 nie zawierają substancji chemicznych i biologicznych niebezpiecznych dla życia i zdrowia personelu laboratoryjnego. 3