dna03 - Amplicon

gDNA standard
Listeria monocytogenes
Roztwór wzorcowy genomowego DNA
z Listeria monocytogenes (PCM 2191)
Nr kat.: DNA03
Ilość gDNA: 100 µL o stężeniu 1 × 106 genomów/µL
Amplicon sp. z o. o. ul. Duńska 9 54-427 Wrocław Polska, NIP: 8943052339, KRS: 0000501830
www.amplicon.pl email: [email protected], tel. +48 71 733 67 06, fax +48 71 733 67 24
ZASTOSOWANIE
Roztwór wzorcowy genomowego DNA Listeria monocytogenes może być użyty w
typowych zastosowaniach biologii molekularnej m.in.:
 jako matryca w reakcji PCR do namnożenia wybranego fragmentu
genomowego DNA;
 jako kontrola pozytywna w reakcjach PCR/Real Time PCR;
 do określenia specyficzności reakcji PCR/Real Time PCR;
 do określenia wydajności i zakresu liniowości reakcji PCR/Real Time PCR;
 do wyznaczenia limitu detekcji w reakcjach PCR/Real Time PCR;
 do określenia powtarzalności reakcji PCR/Real Time PCR;
 do sporządzenia krzywej wzorcowej wykorzystywanej do określenia
zawartości gDNA Listeria monocytogenes w uzyskanych preparatach DNA.
W celu sporządzenia krzywej wzorcowej, określenia wydajności, zakresu
liniowości i/lub limitu detekcji reakcji PCR/Real Time PCR należy przygotować
szereg seryjnych rozcieńczeń roztworu wzorcowego gDNA w wybranym zakresie
(np. w zakresie od 5 x 105 genomów/µL do 5 genomów/µL stosując 10-krotne
rozcieńczenia seryjne).
SKŁADNIKI ZESTAWU
Nazwa
Ilość
Kolor wieczka
Standard gDNA
2 × 50 µL
Czerwony
Bufor TE, pH 8,0
2 × 1,5 mL
Biały
W skład buforu TE, pH 8,0 wchodzą: 10 mM Tris-HCl, pH 8,0, 0,1 mM EDTA pH 8,0.
TRANSPORT i PRZECHOWYWANIE
 Transport odbywa się w warunkach obniżonej temperatury (0-8°C). Po
otrzymaniu przesyłki należy ją natychmiast rozpakować.
 Roztwór wzorcowy gDNA przechowywać w 2-8°C (kilka tygodni) lub w -20°C
(dłuższy okres przechowywania).
 Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania roztworu wzorcowego gDNA.
2
OPIS PRODUKTU
Roztwór genomowego DNA uzyskano z hodowli bakteryjnej znajdującej się na
granicy fazy logarytmicznego wzrostu i fazy stacjonarnej. Genomowy DNA
wyizolowano metodą wykorzystującą złoże krzemionkowe. Jakość uzyskanego
roztworu gDNA oceniono poprzez wykonanie widma spektrofotometrycznego w
zakresie 220-320 nm oraz elektroforezę w żelu agarozowym. Stężenie roztworu
oceniono metodą spektrofotometryczną wykorzystując krzywą standardową
stworzoną w oparciu o wzorcowe roztwory gDNA ze spermy śledzia, po czym
roztwór rozcieńczono do stężenia 1 × 106 genomów/µL. Masę cząsteczkową
gDNA obliczono na podstawie wielkości genomu Listeria monocytogenes i
zawartości par GC.
UWAGI DODATKOWE
 Roztwór wzorcowy genomowego DNA jest przeznaczony do zastosowań typu
„Badania i Rozwój” (B+R). Producent nie ponosi odpowiedzialności za
wykorzystanie
niniejszego
produktu
do
zastosowań
niezgodnych
z
przeznaczeniem, w tym do zastosowań związanych z diagnostyką medyczną i
weterynaryjną.
 Należy dołożyć starań, aby nie dopuścić do kontaminacji roztworem gDNA
innych odczynników używanych w laboratorium, w tym innych roztworów gDNA
innych gatunków lub odczynników stosowanych w reakcji PCR/Real Time PCR.
Zanieczyszczenie
krzyżowe
może
prowadzić
do
wyników
fałszywie
pozytywnych i błędnych wniosków w analizach mających na celu określenie
specyficzności reakcji PCR/Real Time PCR.
 W celu zwiększenia stabilności genomowego DNA w długich okresach czasu
roztwór wzorcowy gDNA można przechowywać w -80°C podzielony na mniejsze
porcje w celu uniknięcia wielokrotnych cykli zamrożenia/rozmrożenia.
 Roztwór wzorcowy genomowego DNA i roztwór TE pH 8,0 nie zawierają
substancji chemicznych i biologicznych niebezpiecznych dla życia i zdrowia
personelu laboratoryjnego.
3