Monoklonal Mouse Anti-Human CD2, Klon MT910

Monoklonal Mouse Anti-Human CD2, Klon MT910
Nr kat. F 0767 związane z FITC
Nr kat. R 0807 związane z RPE
Przeznaczenie
Do diagnostyki in vitro.
F 0767 i R 0807 są przeznaczone do stosowania w cytometrii przepływowej. CD2 jest obecny na wszystkich
normalnych limfocytach T i może być uznany za antygen pan-T. CD2 jest przydatnym markerem w ocenie
procesów chłoniakowych, ponieważ ulega ekspresji na większości prekursorowych i pograsiczych chłoniaków i
białaczek. W niektórych nowotworowych populacjach komórek T, np. w obwodowych chłoniakach T
komórkowych CD2 może być nieobecny (1). Interpretacji wyników może dokonywać osoba wykwalifikowana, w
kontekście wywiadu chorobowego i innych badań diagnostycznych.
Synonimy antygenu
CD2R, E-rosette receptor, T11, lymphocyte-function antigen-2 (LFA-2) (2).
Wprowadzenie
CD2 jest transbłonową glikoproteiną, o masie 50 kDa, złożoną z pojedynczego łańcucha białkowego, pierwotnie
określaną jako receptor dla erytrocytów barana. CD2 wiąże przede wszystkim CD58 na komórkach
prezentujących antygen i indukuje sygnały współ-stymulujące w limfocytach T (2). CD2 jest jednym z
najwcześniejszych pojawiających się w czasie różnicowania markerów ograniczonych do linii T, i ulega
ekspresji na większości tymocytów, obwodowych limfocytów T i komórek NK. Niektóre białaczki B nieHodgkinowskie wykazują nieprawidłową ekspresję CD2. Może to być efektem klonalnej ekspansji limfocytów B
CD2+, które normalnie stanowią małą frakcję obwodowych limfocytów B (3). Ponadto nieprawidłową ekspresję
CD2 wykryto w niektórych ostrych białaczkach szpikowych, niemal wyłącznie typu M3 i M4Eo (4).
Odczynnik dostarczony
Koniugaty antyi-CD2, F 0767 i R 0807, zostały wyprodukowane z oczyszczonego monoklonalnego przeciwciała
mysiego. Koniugaty są dostarczane w formie płynnej, w buforze zawierającym 1% albuminy z surowicy wołowej
(BSA) i 15 mmol/L NaN3, o pH 7.2. Każda fiolka zawiera przeciwciało na 100 testów (10 L koniugatu na
maksymalnie 106 leukocytów normalnej ludzkiej krwi obwodowej).
Izotyp: IgG1, kappa. Stężenie koniugatu w mg/L: zobacz etykietka na fiolce.
Przeciwciało
Nr kat.
Fluorochrom
Kontrola
negatywna
Nr kat.
F 0767
FITC (Izotiocyjanian fluoresceiny, izomer 1)
X 0927
R 0807
RPE (R-fikoerytryna)
X 0928
Swoistość
Anty-CD2, klon MT910, zostało zatwierdzone podczas Second, Third and Fourth International Workshop and
Conference on Human Leucocyte Differentiation Antigens, a badania w wielu laboratoriach potwierdziły jego
reaktywność z CD2 (5).
Zastrzeżenia
1. Do stosowania przez osoby przygotowane zawodowo.
2. Produkt zawiera azydek sodowy (NaN3), odczynnik chemiczny silnie toksyczny w czystej postaci. W
stężeniu obecnym w produkcie, chociaż nie klasyfikowanym jako niebezpieczne, azydek sodowy może
reagować z elementami kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, tworząc silnie wybuchowe pochodne lub
azydki tych metali. Przy usuwaniu odpadów przepłukać spływ dużą ilością wody, aby uniknąć tworzenia się
azydków.
3. Jak w przypadku każdego materiału biologicznego należy stosować odpowiednie procedury.
Przechowywanie
Przechowywać w temp. 2-8oC. Nie używać po upływie daty ważności wskazanej na opakowaniu. Jeśli produkt
był przechowywany w warunkach innych niż wskazane, użytkownik musi sprawdzić jakość produktu. Nie ma
wyraźnych oznak wskazujących na niestabilność produktu, dlatego równocześnie z próbkami badanymi
powinno się oznaczać wiarygodną kontrolę. Jeżeli uzyskuje się nieoczekiwane wyniki bez zmiany procedur
laboratoryjnych i można podejrzewać, że dzieje się to z winy produktu, należy skontaktować się z serwisem
technicznym firmy Dako
Procedura barwienia
1.
Pobrać krew żylną do probówki z antykoagulantem.
2.
Wyizolować komórki jednojądrzaste przez wirowanie na gradiencie, lub zlizować erytrocyty po punkcie 6.
3.
Przemyć komórki jednojądrzaste dwukrotnie RPMI 1640 lub PBS, o pH 7.2-7.4.
4.
Zmieszać 100 L zawiesiny komórek z 10 L koniugatu anty-CD2.
5.
Użyć niereagującego przeciwciała monoklonalnego o tym samym izotypie i skoniugowanego z tym samym
fluorochromem jako kontroli negatywnej (patrz tabela).
6.
Inkubować w ciemności w temperaturze 4 C przez 30 minut.
7.
Przemyć dwukrotnie PBS zawierającym 2% BSA. Zawiesić ponownie w płynie odpowiednim do pomiarów
cytometrycznych, np. w 0,3 mL 0,01 mol/L PBS, o pH 7,4, zawierającego 1% paraformaldehydu (jako
utrwalacza).
8.
Zanalizować na cytometrze.
(108585-002)
F 0767/R 0807/PL/KIM/01.07.02 str. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Zaleca się badać każdorazowo pozytywną i negatywną kontrolę dla oceny odczynnika i procedury barwienia.
Proszę zwrócić uwagę, że przeciwciała koniugowane fluorochromami są wrażliwe na światło i próbki
powinny być chronione przed światłem podczas całego barwienia aż do pomiaru
Piśmiennictwo
1.
Leong A, Cooper K, Leong F. Manual of diagnostic antibodies for immunohistology; London: Oxford
University Press; 1999. p. 45-6.
2.
Kato K. CD Guide CD2. In: Mason D, André P, Bensussan A, Buckley C, Civin C, Clark E, et al., editors.
Leucocyte typing VII. White cell differentiation antigens. Proceedings of the 7th International Workshop
and Conference; 2000 Jun 19-23; Harrogate, United Kingdom. New York: Oxford University Press Inc.;
2002. p. 748-9.
3.
Kaleem Z, White G, Zutter MM. Aberrant expression of T-cell-associated antigens on B-cell non-Hodgkin
lymphomas. Am J Clin Pathol 2001;115:396-403.
4.
Thalhammer-Scherrer R, Mitterbauer G, Simonitsch I, Jaeger U, Lechner K, Schneider B, et al. The
immunophenotype of 325 adult acute leukemias: relationship to morphologic and molecular classification
and proposal for a minimal screening program highly predictive for lineage discrimination. Am J Clin
Pathol 2002;117:380-9.
5.
Bernard A, Brown MH, Yang SY, Wallace DL. T2.0. Summary of the CD2 workshop. In: McMichael AJ,
Beverley PCL, Cobbold S, Crumpton MJ, Gilks W, Gotch FM, et al., editors. Leucocyte typing III. White
cell differentiation antigens. Proceedings of the 3rd International Workshop and Conference; 1986 Sept
21-26; Oxford, England. Oxford, New York, Tokyo: Oxford University Press; 1987. p. 106.
Objaśnienia symboli
(108585-002)
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Zużyć przed
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Chronić od światła (sprawdź
rozdział przechowywanie)
Producent
Sprawdź w instrukcji
stosowania
Numer serii
F 0767/R 0807/PL/KIM/01.07.02 str. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17