Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM/HRP Nr kat. P 0215

Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM/HRP Nr kat. P 0215

Polyclonal Rabbit
Anti-Human IgM/HRP
Nr kat. P 0215
Wydanie 19.06.03
Przeznaczenie
Do diagnostyki in vitro.
Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM/HRP, nr kat. P 0215, jest przeznaczone do oznaczania ludzkiej IgM testem
immunoenzymatycznym ELISA (1) oraz techniką immunoblottingu (2). Dodatkowo koniugat przeznaczony jest
do stosowania w immunocytochemii w przypadku występowania dużych ilości IgM (3). Dla czułej detekcji
mniejszych ilości IgM w tkankach polecane jest Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM, nr kat. A 0425, w
połączeniu z systemen wizualizacji reakcji Dako LSAB™+ lub EnVision™+. Interpretacja wyniku musi być
dokonana przez wykwalifikowaną zawodowo osobę, w kontekście historii choroby pacjenta i innych badań
diagnostycznych.
Odczynnik dostarczony
P 0215 jest oczyszczoną frakcją immunoglobulin króliczej surowicy odpornościowej sprzężonych z peroksydazą
chrzanową (HRP) o bardzo wysokiej swoistej aktywności enzymatycznej. Reakcja sprzęgania jest opracowaną w
Dako modyfikacją dwustopniowej metody glutaraldehydowej Avrameasa i Ternyncka (4). Reakcja jest łagodna,
wydajna, wysoce powtarzalna i daje czasteczki koniugatu Mr głównie od 200 000 do 240 000. Koniugat
dostarczony jest w formie płynnej. Zawiera 0.05 mol/L Tris/HCI, 15 mmol/L NaN3, pH 7.2.
Stężenie immunoglobulin g/L: Patrz etykietka na fiolce.
Immunogen
IgM izolowana z zebranych prawidłowych surowic ludzkich.
Swoistość
Przeciwciało reaguje z łańcuchem  ludzkiej IgM. Śladowe ilości przeciwciał zanieczyszczających zostały
usunięte przez absorbcję na fazie stałej.
Przed sprzęganiem swoistość przeciwciała została stwierdzona jak następuje:
Immunoelektroforeza krzyżowa: Tylko jeden łuk precypitacyjny odpowiadający IgM występował w reakcji
badanego przeciwciała z osoczem ludzkim. Barwienie: Coomassie Brilliant Blue.
ELISA: Nie zaobserwowano istotnej reakcji w pośrednim teście ELISA kiedy jako opłaszczone antygeny użyto
ludzkie IgA i IgG. W metodzie kanapkowej ELISA z użyciem dwóch rodzajów przeciwciał nie zaobserwowano
istotnej reakcji z osoczem ludzkim pozbawionym IgM.
Może występować reakcja krzyżowa z IgM innych gatunków. W immunoelektroforezie rakietkowej wykazano,
że niesprzężone przeciwciało reaguje krzyżowo z odpowiadającymi IgM białkami surowicy kota, krowy, jelenia,
psa, słonia, chomika, konia, norki, myszy, tchórza, szopa, szczura, foki, owcy i świni (5).
Środki ostrożności
1. Do stosowania przez osoby przygotowane zawodowo.
2. Produkt zawiera azydek sodowy (NaN3), odczynnik chemiczny silnie toksyczny w czystej postaci. W stężeniu
obecnym w produkcie, chociaż nie klasyfikowanym jako niebezpieczne, azydek sodowy może reagować z
elementami kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, tworząc silnie wybuchowe pochodne lub azydki tych
metali. Przy usuwaniu odpadów przepłukać spływ dużą ilością wody, aby uniknąć tworzenia się azydków.
3. Jak w przypadku każdego materiału biologicznego należy stosować odpowiednie procedury.
4. Produkt może być stosowany w różnych technikach i w zestawieniu z różnymi typami próbek i materiałów, a
zatem każde laboratorium powinno ustalić własny system kontroli jakości.
Przechowywanie
Przechowywać w temp. 2-8oC. Nie używać po upływie daty ważności wskazanej na opakowaniu. Jeśli produkt
był przechowywany w warunkach innych niż wskazane, użytkownik musi sprawdzić jakość produktu. Nie ma
wyraźnych oznak wskazujących na niestabilność produktu, dlatego równocześnie z próbkami badanymi
powinno się oznaczać wiarygodną kontrolę. Jeżeli uzyskuje się nieoczekiwane wyniki bez zmiany procedur
laboratoryjnych i można podejrzewać, że dzieje się to z winy przeciwciała, należy skontaktować się z serwisem
technicznym firmy Dako.
Zalecane rozcieńczenia
ELISA:
1:(1 000 x F)
Immunoblotting:
1:(1 000 x F)
Immunocytochemia:
1:(100 x F)
Odnośnie wartości współczynnika F, patrz etykietka na fiolce. F zwykle wynosi 1.0.
Dla metody kanapkowej ELISA z użyciem dwóch rodzajów przeciwciał jako instrukcja oznaczania IgM może
służyć Dako “General ELISA Procedure” (Instrukcja Nr 30 023). Procedura opisana poniżej dotyczy oznaczania
IgM w surowicy (zakres pomiaru 2.5 do 100 µg/L).
1.
Przeciwciało opłaszczające fazę stałą: Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM, nr kat. A 0425,
rozcieńczone tak aby stężenie białka wynosiło 10 mg/L.
2.
Wzorzec: Dako Human Serum Protein Calibrator, nr kat. X 0908, rozcieńczony w zakresie od 2.5 µg/L do 100
µg/L IgM. Rozcieńczenie badanych próbek: 1:25 000.
3.
Przeciwciało wykrywające: Dako Polyclonal Rabbit Anti-Human IgM/HRP, nr kat.P 0215 Zalecane
rozcieńczenie: 1:(1 000 x F).
Jeśli nie udowodniono trwałości przeciwciała w danej metodzie, zaleca się rozcieńczanie go tuż przed użyciem.
(110385-002)
P 0215/PL/AI/19.06.03 str. 1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Literatura
1.
Trinick TR, Laker MF. Measurement of urinary immunoglobulins G, A and M by an enzyme linked
immunosorbent assay (ELISA). Clin Chim Acta 1984, 139:113-7.
2.
Naaby-Hansen S, Bjerrum OJ. Auto-and iso-antigens of human spermatozoa detected by immunoblotting
with human sera after SDS-PAGE. J Reprod Immunol 1985;7:41-57.
3.
Rantala I, Helin H. Immunoelectron microscopic localization of immunoglobulins and complement in human
renal glomeruli. J Histochem Cytochem 1982;30:932-7.
4.
Avrameas S, Ternynck T. Peroxidase labelled antibody and Fab conjugates with enhanced intracellular
penetration. Immunochemistry 1971;8:1175-9.
5.
Hau J, Nilsson M, Skovgaard-Jensen H-J, de Souza A, Eriksen E, Wandall LT. Analysis of animal serum
proteins using antisera against human analogous proteins. Scand J Lab Anim Sci 1990;17:3-7.
Objaśnienia symboli
(110385-002)
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdź w instrukcji
stosowania
Zużyć przed
Producent
P 0215/PL/AI/19.06.03 str. 2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17