Mgr Weronika Korpysa-Dzirba Zakład Higieny Żywności

Mgr Weronika Korpysa-Dzirba
Zakład Higieny Żywności Pochodzenia Zwierzęcego
Państwowy Instytut Weterynaryjny –
Państwowy Instytut Badawczy
[email protected]
Molekularna charakterystyka enterotoksycznych szczepów
Staphylococcus aureus wyizolowanych z mleka surowego
Opis pracy doktorskiej
Wytwarzanie, ochrona i promocja żywności wysokiej jakości odgrywa
coraz większą rolę w krajach należących do Unii Europejskiej. Na
Lubelszczyźnie – regionie typowo rolniczym, gdzie jedną z głównych gałęzi
gospodarki jest przemysł mleczarski, dbanie o jakość tego typu produktów jest
szczególnie istotna. Zapewnienie wysokiej jakości żywności, w tym również jej
bezpieczeństwa dla konsumentów, w dużej mierze zależy od jakości mleka
surowego, użytego do produkcji. Ze względu na powszechność występowania w
mleku surowym gronkowców Staphylococcus aureus, szczególnie istotne jest
określenie jaki odsetek tych drobnoustrojów ma zdolność do wytwarzania
enterotoksyn, które są przyczyną gronkowcowych zatruć pokarmowych u ludzi.
Celem pracy jest określenie częstości występowania gronkowców
enterotoksycznych
poprzez
oznaczenie
genów
kodujących
klasyczne
enterotoksyny gronkowcowe, zwłaszcza wśród koagulazo-dodatnich szczepów
S. aureus wyizolowanych z mleka surowego oraz genotypowa charakterystyka
takich izolatów bakteryjnych.
W
pracy
zaplanowano
izolację
koagulazo-dodatnich
szczepów
gronkowców (CPS – Coagulase Positive Staphylococci) a następnie
potwierdzenie ich przynależności do gatunku S. aureus wykorzystując do tego
celu opracowany test multiplex PCR. W kolejnym etapie zaplanowano
opracowanie a następnie wykorzystanie testu multiplex PCR do określenia
potencjału enterotoksycznego wyizolowanych szczepów S. aureus. Szczepy
posiadające geny kodujące enterotoksyny gronkowcowe zostaną ponadto
poddane analizom mającym na celu weryfikację ekspresji tych genów, poprzez
określenie wytwarzania enterotoksyn in vitro. Badania te umożliwią określenie
jaki procent koagulazo-dodatnich gronkowców posiada geny kodujące
najważniejsze z punktu widzenia zdrowia konsumentów, enterotoksyny oraz
pozwoli określić rzeczywiste zagrożenie jakie niesie za sobą konsumpcja
surowego mleka oraz produktów wytwarzanych z mleka nie poddanego obróbce
cieplnej. W następnym etapie realizacji projektu, wyizolowane enterotoksyczne
szczepy S. aureus zostaną poddane analizom z zastosowaniem nowoczesnych
metod biologii molekularnej w celu określenia ich pokrewieństwa oraz
wzajemnych powiązań między nimi.
Rozbieżne dane literaturowe dotyczące występowania enterotoksycznych
szczepów S. aureus w mleku surowym uzasadniają potrzeba podjęcia badań
mających
na
celu
określenie
rzeczywistej
sytuacji
epidemiologicznej
w regionach Polski, gdzie występuje największa produkcja mleka, w tym
w województwie lubelskim. Ponadto opracowane podczas realizacji projektu
nowe techniki molekularne usprawnią diagnostykę w kierunku wykrywania
enterotoksycznych szczepów S. aureus i będą mogły być wykorzystywane w
rutynowych badaniach laboratoryjnych, prowadzonych w celu zapewnienia
właściwej ochrony zdrowia konsumentów.