Całkowity Status Antyoksydacyjny – ulotka informacyjna

CAŁKOWITY STATUS
ANTYOKSYDACYJNY
TYLKO DO ZASTOSOWAŃ BADAWCZYCH
Nr Kat.
NX 2332 5 x 10 ml
5 x 10 t
1. Bufor
2. Chromogen
3. Substrat
Standard
1 x 100 ml
5 x 10 ml
2x
5 ml
5x
1 ml
ZASADA OZNACZENIA
ABTS® (2,2'-Azyno-di-[sulfonian 3-etylbenztiazoliny]) jest
inkubowany przy użyciu peroksydazy (metmioglobina)
*+
i H2O2 w celu uzyskania rodniko-kationu ABTS® . Posiada
on względnie stabilny niebiesko-zielony kolor, który mierzy
się przy zastosowaniu długości fali światła wynoszącej 600
nm. Antyoksydanty w dodanej próbce powodują osłabienie
tworzenia się tego koloru w stopniu, który jest proporcjonalny do ich stężenia.
III
HX-Fe + H2O2
ABTS® + .X - [FeIV = 0]
.
IV
X - [Fe = 0] + H2O
ABTS®*+ + HX - FeIII
HX-FeIIIIV = Metmioglobina
X - [Fe = 0] = Ferrylmioglobina
ABTS®= 2,2'-Azyno-di-[sulfonian 3-ethylbenzthiazoline]
ABTS® jest zarejestrowanym znakiem towarowym
należącym do firmy Boehringer Mannheim.
PRÓBKA
Świeżo pobrana surowica lub heparynizowane osocze.
Należy unikać próbek, w których zaszła hemoliza. Próbka
może być przechowywana
przez czas do 36 godzin w temperaturze od +2 do +8oC. Osocze/surowica mogą być
zamrożone na czas do 14 dni. Unikać powtarzania cykli
zamrażania i rozmrażania.
SKŁAD ODCZYNNIKÓW
SKŁADNIKI
Stężenie w teście
1. Bufor
Sól buforowana fosforanem
80 mmol/l, pH 7.4
2. Chromogen
Metmioglobina
6.1 Τmol/l
ABTS®
610 Τmol/l
3. Substrat
Nadtlenek wodoru (w ustabilizowanej formie) 250 Τmol/l
Standard
Kwas 6-hydroksy-2,5,7,8-tetrametylochroman
-2-karboksylowy
specyficzny dla danej serii
PRZYGOTOWANIE ROZTWORÓW
1. Bufor
Zawartość gotowa do użycia. Zachowuje stabilność do
upływu daty ważności pod warunkiem, że jest przechowywany w temperaturze od +2 do +8°C.
2. Chromogen
Zrekonstytuować jedną fiolkę chromogenu 2 przy użyciu
10 ml Bufora 1. Zachowuje stabilność przez 2 dni, pod
warunkiem, że jest przechowywany w temperaturze od
o
+2 do +8 C lub przez 8 godzin w temperaturze od +15
o
do +25 C.
3. Substrat
Rozcieńczyć 1 ml substratu 3 przy użyciu 1.5 ml Bufora
1. Zachowuje stabilność przez 24 godziny, pod warunkiem, że jest przechowywany w temperaturze od +2 do
o
+8 C. Stabilny w stanie nierozcieńczonym do upływu
daty ważności, kiedy jest przechowywany w
temperaturze od +2 do +8oC.
Standard
Zrekonstytuować jedną fiolkę standardu przy użyciu 1
ml podwójnie dejonizowanej wody. Jest on stabilny
o
przez 2 dni w temperaturze od +2 do +8 C lub 1 miesiąc w -20oC.
Uwaga: Jeżeli tego oznaczenia używa się w systemie
automatycznym, prosimy zapoznać się z arkuszem procedury dla danego systemu, ponieważ mogą występować różnice dotyczące sposobu rekonstytucji materiału.
PROCEDURA
Długość fali światła:
Kuweta:
Temperatura:
Pomiar:
600 nm
droga światła 1 cm
o
37 C
względem powietrza
Pipetować do kuwety:
DDH2O
Standard
Próbka
Chromogen
Ślepa
próba
Standard
Próbka
20 Τl
1 ml
20 Τl
1 ml
20 Τl
1 ml
Dobrze wymieszać, przeprowadzić inkubację w celu uzyskania odpowiedniej temperatury i zmierzyć początkową
wartość absorbancji (A1).
RANDOX Laboratories Ltd., Ardmore, Diamond Road, Crumlin, Co. Antrim, United Kingdom, BT29 4QY
Tel:CRUMLIN (028)94422413 Fax.No.INT.44 (028)94452912 UK (028)94452912
Email: [email protected] Website: www.randox.com
Dodać:
Substrat
200 Τl
200 Τl
200 Τl
Wymieszać i jednocześnie uruchomić czasomierz.
Zmierzyć absorbancję po upływie dokładnie 3 minut (A2)
A2 - A1 = -A próbki/standardu/ślepa próba (blank)
OBLICZENIA
Całkowity Status Antyoksydacyjny:
Współczynnik =
stężenie standardowe
(-A blank - -A standard)
mmol/l = Współczynnik x (-A Ślepa próba - -A Próbki)
UWAGA
Ważne jest to, aby możliwie jak najdokładniej przestrzegać
czasów przeprowadzania określonych czynności w czasie
trwania reakcji. Jeżeli objętości, czasy inkubacji lub temperatury ulegną zmianie, wpłynie to na wynik oznaczenia.
KONTROLA JAKOŚCI
W celu zapewnienia kontroli dokładności i powtarzalności:Test kontrolny Randox Total Antioxidant Control Nr Kat.
NX 2331
LINIOWOŚĆ
Próbki o stężeniach większych niż 2.5 mmol/l powinny być
rozcieńczone przy użyciu 0.9% NaCl i oznaczenie powinno
zostać ponownie przeprowadzone. Rozcieńczenie próbki
powoduje przyrost wartości do 20% i jest to zalecane tylko
w przypadku, gdy jest absolutnie konieczne. Większość
próbek nie będzie wymagała rozcieńczenia, ponieważ
uzyskiwane wyniki będą niższe niż 2.5 mmol/l.
ZAKRESY REFERENCYJNE
Zakres: 1.30 - 1.77 mmol/l Osocze
Zakres ten został zmierzony dla europejskiej populacji roboczej. Zaleca się, aby każde laboratorium określiło swój
własny zakres wartości prawidłowych, ponieważ mogą
występować lokalne różnice spowodowane na przykład
przez czynniki genetyczne.
OSTRZEŻENIA DOTYCZĄCE BEZPIECZEŃSTWA
Tylko do prowadzenia badań diagnostycznych w warunkach in vitro. Nie pipetować przy użyciu ust. Zachować
typowe środki ostrożności obowiązujące przy kontakcie
z odczynnikami stosowanymi w warunkach laboratoryjnych.
Na żądanie dostępne są arkusze danych dotyczących
zdrowia i bezpieczeństwa Health and Safety Data Sheets.
PATENTY
Produkt ten jest objęty patentem UK Patent 2250819 i
patentami i aplikacjami wywodzącymi się z PCT Patent
Application PCT/GB91/02228.
Α αβχδ ΑΒΧ
INSTRUKCJA-CAŁKOWITY STATUS
ANTYOKSYDACYJNY- NX2332
LITERATURA
Miller, N.J., Rice-Evans, C., Davies, M.J., Gopinathan, V.
and Milner, A., Clinical Science (1993) 84, 407-412
Dostępne są aplikacje dla szeregu różnych analizatorów. W sprawie wymagań wynikających z indywidulanych potrzeb prosimy kontaktować się z firmą
Randox lub jej autoryzowanym przedstawicielem.
Wersja zweryfikowana 11/01/00am
RANDOX Laboratories Ltd., Ardmore, Diamond Road, Crumlin, Co. Antrim, United Kingdom, BT29 4QY
Tel:CRUMLIN (028)94422413 Fax.No.INT.44 (028)94452912 UK (028)94452912
Email: [email protected] Website: www.randox.com
Α αβχδ ΑΒΧ