Protein Block Serum-Free Gotowy do uŜycia Nr kat. X0909

Protein Block Serum-Free
Gotowy do uŜycia
Nr kat. X0909
Przeznaczenie
Do stosowania w diagnostyce in vitro.
Niniejszy odczynnik blokujący jest przeznaczony do stosowania w zestawach do
immunoenzymatycznych, takich jak LSAB™2, LSAB™+, systemów EnVision™ i EnVision™+.
Streszczenie i
informacje ogólne
odczynów
Niniejszy produkt ogranicza nieswoisty odczyn podczas wykrywania antygenów metodami
immunohistochemicznymi (IHC). Odczynnik cechuje się szczególną przydatnością do odczynów na tkance
łącznej, nabłonkowej, komórkach tłuszczowych lub innych typach tkanek, w przypadku których występuje
znaczny odczyn tła.
Patrz dokument „Ogólne instrukcje wykonywania odczynów immunohistochemicznych” firmy Dako lub
następujące instrukcje obsługi systemu detekcji IHC: 1) Zasada przeprowadzania odczynu, 2) Niezbędne
materiały niedostarczane z zestawem, 3) Przechowywanie, 4) Przygotowanie preparatu, 5) Wykonanie barwienia,
6) Kontrola jakości, 7) Rozwiązywanie problemów, 8) Interpretacja wyniku barwienia, 9) Ograniczenia metody.
Dostarczony
odczynnik
Protein Block Serum-Free: 0,25% kazeiny w buforze PBS zawierającym białko stabilizujące i azydek sodu
o stęŜeniu 0,015 mol/L.
Środki ostroŜności
1.
Do stosowania przez wyszkolony personel.
2.
Produkt zawiera azydek sodu (NaN3), silnie toksyczną substancję chemiczną w czystej postaci. StęŜenie
NaN3 występujące w produkcie nie jest klasyfikowane jako niebezpieczne. Jednak w wyniku reakcji NaN3
z ołowiem lub miedzią, wchodzącymi w skład instalacji kanalizacyjnych, mogą powstawać silnie
wybuchowe azydki metali. Po usunięciu spłukać duŜą ilością wody, aby zapobiec nagromadzeniu się
azydku metalu w kanalizacji.
3.
Jak w przypadku kaŜdego materiału biologicznego, naleŜy stosować odpowiednie procedury obchodzenia
się z nim.
4.
W celu uniknięcia kontaktu z oczami i skórą, naleŜy nosić odpowiednie osobiste wyposaŜenie ochronne.
5.
Niewykorzystany odczynnik naleŜy usuwać zgodnie ze stosownymi przepisami lokalnymi i krajowymi.
6.
Dodatkowe informacje znajdują się w Karcie Charakterystyki Bezpieczeństwa Materiału (MSDS).
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2-8 °C. Nie zamra Ŝać. Nie naleŜy uŜywać odczynników po upływie terminu
waŜności podanego na fiolce. Jeśli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niŜ podane powyŜej,
uŜytkownik musi zweryfikować takie warunki. Nie ma jednoznacznych oznak niestabilności produktu. Dlatego,
równolegle z odczynami na materiale pochodzącym od pacjentów, naleŜy wykonywać dodatnie i ujemne
próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie moŜna wyjaśnić róŜnicami
w procedurach laboratoryjnych, oraz gdy podejrzewany jest problem z produktem, naleŜy się skontaktować
z działem wsparcia technicznego firmy Dako.
Charakterystyka
wyników
Podczas wykrywania antygenów w tkankach przy uŜyciu metod IHC, ocena swoistego odczynu jest często
utrudniona przez odczyn nieswoisty (tła). MoŜe to prowadzić do błędnej interpretacji lub wystąpienia wyników
fałszywie dodatnich.
Najczęściej rozlany odczyn tła powstaje na skutek reakcji hydrofobowych lub jonowych, zachodzących między
przeciwciałami pierwotnymi lub odczynnikami wtórnymi a strukturami tkankowymi, innymi niŜ antygen
docelowy.1,2
Tradycyjna metoda redukcji interakcji przeciwciał wtórnych z białkami badanych tkanek polega na nałoŜeniu na
skrawki przed inkubacją z przeciwciałami pierwotnymi surowicy blokującej, pochodzącej od
nieimmunizowanych zwierząt.1,2 Jednak dla uniknięcia reaktywności krzyŜowej, konieczne jest staranne
dobranie surowicy blokującej pod względem zgodności z przeciwciałami pierwotnymi i wtórnymi.1,2
Produkt Protein Block Serum-Free nie wymaga dopasowania do przeciwciał pierwotnych i wtórnych, jest
zgodny z dowolnym systemem odczynników wtórnych, pozwala wyeliminować moŜliwość nieprzewidzianej
reaktywności krzyŜowej i nie zawiera potencjalnie zakaźnych substancji.
Produkt Protein Block Serum-Free zawiera kazeinę, hydrofilne białko powodujące zmniejszenie nieswoistego
wiązania przeciwciał pierwotnych i wtórnych odczynników podczas wykonywania odczynów techniką IHC
i immunoenzymatycznych.2
Próbki
(121977-001)
Odczynnik moŜna stosować do badania skrawków tkankowych utrwalanych w formalinie i zatapianych
w parafinie, zamroŜonych skrawków tkankowych i rozmazów krwi.
301227PL_001 str. 1/2
Procedura
Preparaty tkanek są inkubowane z roztworem blokującym przez 5-10 minut w temperaturze pokojowej.
Roztwór blokujący jest następnie usuwany a szkiełko przed naniesieniem przeciwciała pierwotnego jest wokół
skrawka tkanki wycierane do sucha.
Ograniczenia metody
Wybarwienie tkanek jest uzaleŜnione od obróbki i przetworzenia tkanki przed wykonaniem odczynu.
Utrwalacze zawierające aldehydy, np. formalinę lub aldehyd glutarowy, często powodują wzmoŜony odczyn
tła.1 Nieprawidłowe utrwalanie, zamraŜanie, rozmraŜanie, przemywanie, suszenie, ogrzewanie lub
wykonywanie skrawków moŜe powodować artefakty, wiązanie przeciwciał lub wyniki fałszywie ujemne. Wyniki
fałszywie dodatnie mogą być równieŜ wywołane przez reaktywność krzyŜową wywołaną obecnością innych
odczynników IHC, endogennej fosfatazy zasadowej, endogennej peroksydazy, enzymów o aktywności
peroksydazy, endogenej aktywności wiązania awidyny lub nieswoistą reakcję z komórkami ze zmianami
martwiczymi lub zwyrodnieniowymi.
Piśmiennictwo
1. Key M (ed). Education Guide: Immunohistochemical Staining Methods. 4th ed. Dako 2006.
2. Ramos-Vara JA. Review Article: Technical aspects of Immunohistochemistry. Vet Pathol 2005;42:405-426.
Wydanie 09/09
(121977-001)
301227PL_001 str. 2/2