112 kowalczyk aktywnosc1.qxp
Transkrypt
112 kowalczyk aktywnosc1.qxp
Medycyna Sportowa © MEDSPORTPRESS, 2006; 3(6); Vol. 22, 151-155 Katarzyna Kowalczyk1(B,D,E,F), Marcin Andrzejewski2(B,D,E,F), Edyta Michalak1(D,E,F), Jan Chmura3(A,D,E), Tadeusz Rychlewski1(A,E,G) Author’s Contribution A – Study Design B – Data Collection C – Statistical Analysis D – Data Interpretation E – Manuscript Preparation F – Literature Search G – Funds Collection AKTYWNOŒÆ WYBRANYCH ENZYMÓW, STʯENIE OKSYPURYN ORAZ KWASU MOCZOWEGO U M£ODYCH ZAWODNIKÓW PI£KI NO¯NEJ 2 3 Zak³ad Fizjologii, AWF, Poznañ Zak³ad Teorii Czasu Wolnego i Rekreacji, AWF, Poznañ Zak³ad Motorycznoœci Gracza, AWF, Wroc³aw tio np roh ibit 1 ibu SELECTED ENZYMES ACTIVITY, OXYPURINES AND URIC ACID CONCENTRATION IN YOUNG FOOTBALL PLAYERS nly -d istr S³owa kluczowe: dehydrogenaza mleczanowa, kinaza kreatynowa, oksypuryny, hipoksja Key words: lactic dehydrogenase, creatine kinase, oxypurines, hypoxy - eo Summary 1705 1 4 13 op Word count: Tables: Figures: References: y is - for pe rs on al us This copy is for personal use only - distribution prohibited. Background. The purpose of this study was to determine the activity of two main enzymes responsible for ATP gaining in anaerobic conditions: lactic dehydrogenase, creatine kinase also the level of oxypurines, uric acid and other hipoxia markers were measured. Material and methods. 28, 13 years old boys, who trained football were studied. Participants were qualified into two groups accordingly to sport club in which they trained: Lech and Warta. Body mass, height and duration of training were comparable in both groups. Biochemical parameters were determine in venous blood using the diagnostic tests. The level of oxypurines was estimated by HPLC method, with λ=240 nm. Results. It was stated that in Lech players the level of blood CK activity was higher and statistically significant. Values of other parameters were comparable in both groups. Conclusions. Estimation of actual training ability and determination of the enzyme activity in players allows to optimize physical training. On the ground of estimated results trainers should individually select the trainings' load for each player. Th is c Adres do korespondencji / Address for correspondence Katarzyna Kowalczyk Zak³ad Fizjologii AWF Poznañ 61-871 Poznañ, ul. Królowej Jadwigi 27/39, tel. (0-61) 835-51-90, e-mail: [email protected] Otrzymano / Received Zaakceptowano / Accepted 28.10.2005 r. 20.02.2006 r. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. ed . Zaanga¿owanie Autorów A – Przygotowanie projektu badawczego B – Zbieranie danych C – Analiza statystyczna D – Interpretacja danych E – Przygotowanie manuskryptu F – Opracowanie piœmiennictwa G – Pozyskanie funduszy This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - ARTYKU£ ORYGINALNY / ORIGINAL ARTICLE 151 ed . tio np roh ibit ibu -d istr Materia³ i metody eo nly Badaniom poddano 28 ch³opców w wieku 13 lat, uprawiaj¹cych pi³kê no¿n¹ w dwóch poznañskich klubach: w Lechu i w Warcie. Charakterystykê antropometryczn¹ oraz sta¿ treningowy badanych przedstawia Tabela 1. W celu oznaczenia parametrów biochemicznych we krwi, zawodnikom pobrano 5 ml krwi ¿ylnej, któr¹ natychmiast odwirowano w temp. 4°C. W osoczu oznaczono spoczynkowe stê¿enia: oksypuryn hipoksantyny (HX), ksantyny (X), kwasu moczowego oraz aktywnoœæ enzymów – dehydrogenazy mleczanowej (LDH) i kinazy kreatynowej (CK). Aktywnoœæ badanych enzymów oznaczono metod¹ kinetyczn¹, stosuj¹c testy diagnostyczne firmy CORMAY. Stê¿enie hipoksantyny, ksantyny i kwasu moczowego oznaczono metod¹ HPLC z detektorem UV. Pomiarów dokonywano przy d³ugoœci fali 256 nm, for pe rs on al us Proces przygotowania zawodników o wysokich kwalifikacjach we wspó³czesnym sporcie charakteryzuje siê du¿¹ z³o¿onoœci¹. W³aœciwie zaprogramowany trening sportowy wywo³uje okreœlone procesy adaptacyjne, niezbêdne do podnoszenia stopnia wytrenowania. Pi³ka no¿na jest gr¹ zespo³ow¹, której tempo i rytm gry zmieniaj¹ siê w zale¿noœci od sytuacji panuj¹cej na boisku. Na ca³y dystans pokonywany przez zawodników podczas meczu sk³adaj¹ siê: starty z ró¿nych pozycji w zmiennych kierunkach, wielokrotne przyœpieszenia, podbiegi do pi³ki, strza³y, drybling, marsz i trucht. W rzeczywistoœci sprinty nie wystêpuj¹ oddzielnie podczas meczu, wykonywane s¹ w seriach, w po³¹czeniu z krótkimi odpoczynkami, które maksymalnie aktywizuj¹ procesy tlenowej resyntezy ATP [1,2,3]. Ze wzglêdu na Ÿród³o energii wykorzystywanej do pracy miêœniowej w czasie 90-minutowego meczu, pi³kê no¿n¹ zaliczamy do dyscyplin wytrzyma³oœciowych. Jednak¿e podczas meczu wystêpuj¹ fazy o bardzo wysokiej intensywnoœci. Podczas sprintów trwaj¹cych od 1.5 do 3-4 sekund, zrywów na kilkumetrowych odcinkach oraz czynnoœci technicznych (tj. wyskoki, œlizgi, strza³y) ATP pozyskiwane jest z fosfokreatyny zmagazynowanej w miêœniu. Szybkoœæ tego procesu zale¿y od aktywnoœci kinazy kreatynowej (CK). Gdy poziom fosfokreatyny zostanie zu¿yty w 2/3 iloœci, a obci¹¿enie bêdzie kontynuowane, to resynteza ATP oparta jest g³ównie na procesach kwasomlekowych. Szybkoœæ tych mechanizmów oraz iloœæ kwasu mlekowego zale¿¹ od aktywnoœci dehydrogenazy mleczanowej (LDH) [4,5,6]. W niedotlenionym miêœniu, oprócz pojawiaj¹cego siê kwasu mlekowego, dochodzi równie¿ do rozpadu cz¹steczki AMP (Ryc. 1). W wyniku tego procesu wzrasta, pocz¹tkowo w komórce a póŸniej we krwi, stê¿enie oksypuryn (hipoksantyny i ksantyny) oraz kwasu moczowego. Nagromadzona w wyniku rozk³adu AMP hipoksantyna zostaje przekszta³cona w ksantynê przy udzia- y is op is c Th Ryc. 1. Rozk³ad nukleotydów adeninowych Fig. 1. Pathway of adenine nucleotide - This copy is for personal use only - distribution prohibited. le enzymu dehydrogenazy ksantynowej, która w warunkach hipoksji przechodzi w formê oksydazow¹. W tym przypadku akceptorem elektronów jest tlen. Dlatego te¿ w niedotlenionej tkance rozk³adowi AMP towarzyszy produkcja wolnych rodników tlenowych (Ryc. 1) [7,8,9,10]. Powstaj¹cy podczas wysi³ku kwas mlekowy ogranicza zdolnoœci wysi³kowe pi³karza poprzez zmiany przepuszczalnoœci b³on komórkowych, a w konsekwencji zaburzenia sprawnoœci centralnego uk³adu nerwowego. Zmiany te obserwujemy podczas meczu w postaci niecelnych podañ, niew³aœciwej oceny sytuacji panuj¹cej na boisku, czêstych fauli oraz licznych kontuzji [11]. Dlatego te¿ wa¿ne jest budowanie, na bazie wytrzyma³oœci tlenowej zawodników, przydatnej podczas gry wytrzyma³oœci beztlenowej, w której to organizm wykorzystuje energiê zgromadzon¹ w postaci fosfagenów. Celem naszych badañ by³a ocena aktywnoœci CK, LDH oraz stê¿enia oksypuryn w osoczu krwi m³odych pi³karzy no¿nych graj¹cych w dwóch poznañskich klubach sportowych. Wstêp - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - Kowalczyk K. i wsp., Aktywnoœæ wybranych markerów w osoczu krwi m³odych pi³karzy no¿nych 152 tio np roh ibit ed . Tab. 1. Charakterystyka antropometryczna i sta¿ treningowy badanych grup Tab. 1. Anthropometric characteristic of groups and duration of training ibu -d istr nly wej. W pi³ce no¿nej do hipoksji dochodzi podczas zrywów, w przed³u¿onych sprintach miêdzy 30-50 m, szybkich zwrotów oraz startów do pi³ki. Wy¿sz¹ aktywnoœæ CK odnotowano u zawodników Lecha, u których obserwuje siê ni¿sze stê¿enia LA. Kwas mlekowy ulegaj¹c dysocjacji, powoduje zakwaszenie miêœni i uszkodzenie komórek miêœniowych oraz jest przyczyn¹ rozwijaj¹cego siê zmêczenia oœrodkowego. Obserwujemy to na boisku w postaci spowolnionej, ma³o dynamicznej i widowiskowej gry, z licznymi niecelnymi podaniami [11]. W dotychczasowym piœmiennictwie nie znaleziono badañ z zakresu aktywnoœci enzymu kinazy kreatynowej, dehydrogenazy mleczanowej czy stê¿enia oksypuryn i kwasu moczowego prowadzonych na m³odych pi³karzach no¿nych. Z danych literaturowych wynika, ¿e takie badania wykonywano u starszych zawodników, m.in. p³ywaków, zapaœników, kajakarzy. W naszych badaniach obserwowana aktywnoœæ CK nie jest wysoka, bo w dolnych granicach normy. Zaznaczyæ trzeba, ¿e s¹ to dzieci z ma³¹ mas¹ miêœniow¹. Podobne wartoœci odnotowali K³apciñska i wsp. [12] u 13-letnich p³ywaczek o zbli¿onej masie cia³a. Odnotowana aktywnoœæ CK to 143,31±56,03 U/l, natomiast LDH 211,59±68.61 U/l. Poprzêcki i wsp., prowadz¹c swoje badania na biegaczach w wieku 18-20 lat, biegaj¹cych ró¿ne dystanse (100 m, 400 m), odnotowali wy¿sz¹ aktywnoœæ CK 477,61 U/l i ni¿sz¹ LDH 230,9 U/l. Na tak¹ aktywnoœæ wp³ywa nie tylko rozwijana z wiekiem masa miêœniowa zawodników, ale równie¿ lata treningu [13]. al us w buforze fosforanowym o pH 5.8. Wyniki badañ przedstawiono jako œrednie arytmetyczne odchylenie standardowe. Analizê statystyczn¹ przeprowadzono za pomoc¹ testu U Manna-Whitney’a. eo Ryc. 2. Stê¿enie hipoksantyny i ksantyny u zawodników Lecha i Warty Fig. 2. Lech and Warta soccer`s hypoxantine and xantine concentration on Wyniki y is for pe rs Pomiêdzy badanymi grupami nie stwierdzono istotnych ró¿nic w stê¿eniach hipoksantyny (12,38± 3,340 vs 12,26±3,15 mol/l), ksantyny (3,39±1,226 vs 2,99±1,068 mol/l) oraz kwasu moczowego (347,16± 95,378 vs 322,60±97,775 mol/l) (Ryc. 2 i 3). U zawodników Lecha zaobserwowano statystycznie istotn¹, wy¿sz¹ w porównaniu z zawodnikami Warty, aktywnoœæ kinazy kreatynowej (60,01±22,942 vs 39,81±18,261 U/l; p<0,05). Nie wykazano natomiast ró¿nic pomiêdzy grupami w aktywnoœci dehydrogenazy mleczanowej (185,58±39,404 vs 181,16±37,060 U/l) (Ryc. 4). Dyskusja Th is c op Przeprowadzone badania mia³y na celu porównanie wartoœci spoczynkowych parametrów biochemicznych krwi, takich jak hipoksantyna i ksantyna (oksypuryny), kwasu moczowego oraz aktywnoœci dwóch miêœniowych enzymów (kinazy kreatynowej i dehydrogenazy mleczanowej) u 13-letnich zawodników pi³ki no¿nej dwóch poznañskich zespo³ów – Lecha i Warty. Oznaczane przez nas enzymy s¹ odpowiedzialne za resyntezê ATP w niedotlenionej komórce miêœnio- - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - Kowalczyk K. i wsp., Aktywnoœæ wybranych markerów w osoczu krwi m³odych pi³karzy no¿nych 153 ibu for pe rs on al us This copy is for personal use only - distribution prohibited. y is is c op Dlatego te¿ ³atwo jest wyci¹gn¹æ wniosek, ¿e im lepsze szybkoœciowe przygotowanie zawodnika i powi¹zane z tym „przekierowanie” jego metabolizmu w kierunku procesu fosfagenowego, tym lepsze rezultaty na boisku i korzystniejsze funkcjonowanie organizmu w warunkach hipoksji. Markerami kryzysu energetycznego komórki s¹ takie metabolity jak HX, X i UA, które powstaj¹ z rozpadu AMP. Stwierdzone w badaniach œrednie wartoœci stê¿enia tych metabolitów s¹ porównywalne w obu badanych grupach (Ryc. 2, 3). Th - Ryc. 4. Aktywnoœæ dehydrogenazy mleczanowej i kinazy kreatynowej u zawodników Lecha i Warty Fig. 4. Lech and Warta soccer`s lactate dehydrogenase and creatine kinase activity - This copy is for personal use only - distribution prohibited. -d istr eo nly Ryc. 3. Stê¿enie kwasu moczowego u zawodników Lecha i Warty Fig. 3. Lech and Warta soccer`s uric acid concentration - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - tio np roh ibit ed . This copy is for personal use only - distribution prohibited. - Kowalczyk K. i wsp., Aktywnoœæ wybranych markerów w osoczu krwi m³odych pi³karzy no¿nych 154 Kszta³towanie tak wa¿nej dla zawodnika szybkoœci nadal budzi w¹tpliwoœci ze wzglêdu na indywidualizacjê obci¹¿eñ treningowych. Na podstawie struktury w³ókien miêœniowych, unerwienia oraz aktywnoœci enzymów odpowiedzialnych za tlenowe i beztlenowe mechanizmy pozyskiwania ATP mo¿emy okreœliæ predyspozycje sportowe zawodnika, a nastêpnie indywidualnie dobieraæ obci¹¿enia wysi³kowe. B³êdem jest stosowanie jednakowych obci¹¿eñ treningowych dla wszystkich zawodników. tio np roh ibit nly eo us al on pe rs for Th is c op y is - This copy is for personal use only - distribution prohibited. 1. Reilly T. Physiological aspects of soccer. Biol Sport 1994; 1: 3-20. -d istr 1. Oznaczenie aktywnoœci CK i LDH pozwala oceniæ predyspozycje m³odego zawodnika do wykonywania wysi³ku o wysokiej intensywnoœci. 2. Oksypuryny i kwas moczowy s¹ czu³ymi markerami niedotlenienia komórkowego. 3. Ocena aktualnych zdolnoœci wysi³kowych zawodnika oraz oznaczenie aktywnoœci enzymów odpowiedzialnych za pozyskiwanie ATP pozwalaj¹ optymalizowaæ trening fizyczny. 4. Uzyskane wyniki potwierdzaj¹ tezê, ¿e nale¿y indywidualnie dobieraæ obci¹¿enia treningowe dla poszczególnych zawodników. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. ibu Wnioski Piœmiennictwo 2. Ronikier A. Mierniki wydolnoœci i ich diagnozuj¹ce zastosowanie w sportowych grach zespo³owych. Materia³y z Internacional Conference on Science in Sport Team Games. Bia³a Podlaska 1995; 60-68. 3. Lacour JR. Fizjologiczne aspekty gry w pi³kê no¿n¹. Sport Wyczynowy 1982; 12: 9-12. 4. Chmura J. Kszta³towanie wytrzyma³oœci szybkoœciowej pi³karza (II). Sport Wyczynowy 1993; 9-10: 29-35. 5. Chmura J. Kszta³towanie wytrzyma³oœci szybkoœciowej pi³karza (I). Sport Wyczynowy 1993; 7-8: 32-40. 6. Chmura J. Charakterystyka i koszt fizjologiczny czynnoœci ruchowych pi³karza w czasie gry (I). Sport Wyczynowy1997; 5-6: 11-22. 7. Banaszak F, Rychlewski T. Metabolizm kwasu adenilowego w warunkach wysi³ku fizycznego. Zmiany poziomu oksypuryn osocza krwi, reutylizacja oksypuryn. Monografia AWF Poznañ 1992; 274: 681-697. 8. Banaszak F. Metabolizm nukleotydów pirymidynowych i purynowych w nadciœnieniu têtniczym pierwotnym – ocena wp³ywu leków hipotensyjnych. Monografia AWF Poznañ 1999; 341. 9. Parks DA, Granger DN. Xanthine oxisase: biochemistry, distribution and physiology. Acta Physiol Scand Suppl 1986; 548: 876-99. 10. Saltin B. Metabolic fundamentals in exercise. Med Sci Sports Exercise 1973; 5: 137-146. 11. Chmura J. Charakterystyka i koszt fizjologiczny czynnoœci ruchowych pi³karza w czasie gry (I). Sport Wyczynowy 1997; 5-6: 11-22. 12 K³apciñska B, P³atek £, Jabczyk M, Grzesiok K. Changes in plasma activites of creatine kinase (CK) and lactate dehydrogenase (LD) in adolescent female swimmers during a two-year course of training. Biology of Sport 2001; 18: 269-280. 13. Poprzêcki S, K³apciñska B, Iskra J. Zmiany aktywnoœci kinazy kreatynowej (CK) i dehydrogenazy mleczanowej (LDH) w osoczu krwi u p³otkarzy po testach biegowych na krótkim dystansie i w okresie restytucji. Trening 1997; 34: 265-273. ed . Z fizjologicznego punktu widzenia, pi³karz okreœlany jako typ zawodnika wytrzyma³oœciowego nie osi¹gnie, z powodu innych predyspozycji genetycznych, takiej szybkoœci jak typ zawodnika szybkoœciowego. Ocena aktualnej zdolnoœci wysi³kowej zawodnika oraz aktywnoœci g³ównych enzymów odpowiedzialnych za proces resyntezy ATP pozwala w³aœciwie sterowaæ treningiem sportowym, a w konsekwencji oczekiwaæ okreœlonych wyników sportowych. Dysproporcje pomiêdzy zawodnikami obu dru¿yn maj¹ odzwierciedlenie na boisku. W sezonie 2002/ 2003 Lech czterokrotnie pokona³ zespó³ Warty, zajmuj¹c pierwsze miejsce w tabeli. M³odzi Lechici grali dynamiczniej, poprzez szybsze starty do pi³ki ³atwiej przejmowali j¹ od przeciwnika. Na koñcowy wynik sk³ada³a siê nie tylko szybkoœæ i zwinnoœæ, ale tak¿e lepsza motoryka zawodników Lecha. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - This copy is for personal use only - distribution prohibited. - Kowalczyk K. i wsp., Aktywnoœæ wybranych markerów w osoczu krwi m³odych pi³karzy no¿nych 155