URICULT

URICULT
WPROWADZENIE
Uricult posiada dwa podłoża agarowe. Jedna strona plastikowego
przeźrocza jest pokryta zielonym podłożem CLED, a druga strona
zawiera brązowo-czerwone podłoże MacConkey. Oba podłoża służą do
wykrywania bakterii wywołujących infekcje dróg moczowych (UTI).
Podłoże CLED jest przeznaczone do okreslenia ogólnej liczby
drobnoustrojów (OLD). Na podłożu MacConkey sole żółciowe hamują
wzrost organizmów Gram-dodatnich innych niż enterokoki, które mogą
rosnąc w postaci ostrych kolonii. Podłoże to wspiera wzrost wszystkich
Gram-ujemnych mikroorganizmów.
ZAWARTOŚĆ
10 płytek Uricult
10 naklejek opisowych
instrukcja użycia
Podstawą testu Uricult dip slide jest podwójne podłoże agarowe. Na
jednej stronie znajduje się zielone podłoże CLED do wykrywania
totalnej liczebności bakterii, a na drugiej czerwono-brązowe podłoże
MacConkeya do wykrywania mikrobów wywołujących choroby układu
moczowego. Na podłożu MacConkeya sole żółciowe zapobiegają
wzrostowi organizmów Gram-dodatnich innych niż enterococci, a które
mogą rosnąć jako ostro ograniczone kolonie. To podłoże umożliwia
wzrost organizmów Gram-ujemnych.
SKŁAD PODŁOŻA
a) CLED
pepton
ekstrakt mięsny
laktoza
L-cysteina
błękit
bromotymolowy
b) MacConkeya
10,0g/l
3,0g/l
20,0g/l
0,13g/l
pepton
laktoza
czerwień obojętna
sole żółciowe
20,0g/l
10,0g/l
0,075g/l
0,8g/l
0,03g/l
UWAGI I ZALECENIA
Uricult jest testem przeznaczonym do stosowania tylko w diagnostyce
in vitro. Testu nie powinno używać się po upływie daty ważności
umieszczonej na opakowaniu. Również nie powinno stosować się testu
jeśli odkryto odbarwienie lub wysuszenie agaru, oddzielenie podłoża od
płytki, lub stwierdzono wzrost bakterii lub grzybów.
Nie wolno dotykać miejsca wzrostu bakterii, ponieważ każda z
kolonii wzrastających na podłożu Uricult jest potencjalnym
patogenem.
PRZECHOWYWANIE
Uricult jest przechowywany w temperaturze 7-25ºC, chroniony przed
wpływem powietrza i zmianami temperatury. Nie wolno zamrażać
testu. Unikać przeciągów i przechowywania w pobliżu generatora
ciepła.
Data przydatności znajduje się na opakowaniu.
BADANIE MOCZU I MAGAZYNOWANIE PRÓBEK
Optymalny mocz dla wzrostu bakteryjnego powinien być pierwszym,
porannym oddaniem moczu po odpoczynku. W tym celu należy
dokładnie umyć się, oddać mocz do jałowego naczynia pomijając
początkowy strumień. Próbki moczu można również pozyskać z
cewników i metodą punkcji.
Próbka powinna być przeniesiona na slajd Uricult zaraz po zebraniu.
Slajd należy natychmiast włożyć do jego tuby ochronnej i dokładnie
zamknąć korek.
Próbki moczu przechowuje się w lodówce w temp. 2-8 ºC, jednak nie
dłużej niż 24 godziny. Rezultaty testu mogą być nieprawdziwe jeśli
pacjent był uprzednio poddany leczeniu antybiotykowemu. W takim
przypadku badanie nie powinno być wykonywane przed upływem 48h
od podaniu ostatniej dawki leku.
PROCEDURA WYKONANIA BADANIA
1. Okręcić korek z przeźroczem (płytką) i wyjąć z tuby bez dotykania
powierzchni agaru.
2. Trzymać test za nasadkę, zamoczyć płytkę w świeżym moczu tak,
aby powierzchnia agaru była całkowicie zanurzona.
Jeśli ilość moczu jest bardzo mała, wówczas powierzchnia agaru może
być oblana moczem, przez przechylenie zbiorniczka.
3. Pozwolić aby nadmiar moczu spłynął ze slajdu.
4. Ostatnie krople usunąć papierem absorpcyjnym
5. Zamknąć szczelnie slajd w tubie.
6. Opisać próbkę.
7. Umieścić tubę w pozycji pionowej w inkubatorze (w temp. 36±2ºC)
na 16-24 godzin.
Można również wysłać tubkę do inkubacji do laboratorium.
8. Porównać gęstość (wzrost) kolonii z planszą wzorcową.
UWAGA 1
Próbki z ujemnym wynikiem wzrosty mogą być inkubowane dodatkowo,
przez kolejne 24h, dla wykrycia wolnorosnących bakterii.
UWAGA 2
Płytki zaszczepione mogą być inkubowane natychmiast, bądź
przechowywane lub transportowane do laboratorium w celu inkubacji i
interpretacji. Magazynowanie lub transport nie powinny przekraczać
48h w warunkach temperatury w zakresie 7-25ºC. Po tym czasie próbki
powinno się inkubować w temp. 36±2ºC przez 16-24 godzin. Jeśli slajd
był przechowywany lub transportowany ponad 48 godzin, w takim
wypadku możliwe jest wyłącznie stwierdzenie wzrostu i liczebności
kolonii; reakcje barwne mogą być nietypowe.
UWAGA 3
Próbka może być inkubowana w temperaturze pokojowej przez 1-3 dni.
Po tym czasie dodatnie wzrosty mogą być wysłane do
specjalistycznego laboratorium dla dalszych badań. Ujemne wzrosty
mogą być inkubowane dodatkowo, przez kolejne 24h, dla wykrycia
wolnorosnących bakterii.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
Po inkubacji zaszczepionego slajdu, obecność bakterii jest stwierdzona
poprzez obecność kolonii na powierzchni agaru. Ponieważ kolonia jest
rezultatem namnażania pojedynczej komórki bakterii, liczba kolonii
wskazuje stężenie jednostek tworzących kolonie w jednostce próbki
moczu (CFU/ml). Liczba kolonii powinna być określona z pierwotnie
zielonego podłoża CLED przez porównanie gęstości powstałych kolonii
z wzorcowym szablonem. Istotne jest porównanie liczby kolonii, a nie
ich wielkości. Niskie stężenie elektrolitów w podłożu CLED zapobiega
pełzającemu rozwojowi szczepów Proteus. Błękit bromotymolowy i
laktoza obecne w podłożu pozwalają na wykrycie bakterii
fermentujących laktozę. Wzrost laktozo-dodatnich mikroorganizmów
powoduje pojawienie się żółtych kolonii i zabarwienie podłoża na żółto,
natomiast laktozo-ujemnych objawia się w obecności bezbarwnych
kolonii i brakiem zmian zabarwienia podłoża.
Selektywne, brązowo-czerwone podłoże MacConkeya umożliwia
wzrost gram-ujemnych bakterii, lecz nawet enterococci mogą rosnąć na
podłożu, jako ostro ograniczone kolonie. Selektywność została
osiągnięta przez dodatek soli żółciowej. Laktozo-dodatnie bakterie
rosną jako czerwone, a laktozo-ujemne bakterie jako pół przeźroczyste
kolonie. Jeśli zawartość bakterii w moczu jest wysoka (≥10 7CFU/ml)
powierzchnia agaru może totalnie pokryta w całości wzrostem. Może
być to źródłem mylnej interpretacji jako negatywny wynik.Dlatego,
każda powierzchnia wykazująca brak wzrostu powinna być sprawdzana
w świetle odbitym. Brak odbicia wskazuje na wystąpienie wzrostu na
całej powierzchni. Silne, bezpośrednie światło umożliwia wykrycie
bardzo małych kolonii. Mieszanina różnych szczepów bakterii
występujących na Uricult wskazuje zazwyczaj na występujące
zanieczyszczenia próbki moczu.
Gdy bakteriologiczny wzrost zawiera duże kolonie, w ocenie należy
uwzględniać jedynie ich ilość a nie wielkość.
WARTOŚCI POMIARÓW
Niżej podane wartosci zostały opracowane na podstawie
wytycznychECLM-EUG European Urianalysis Guidelines (2000)
Metoda pobrania
Liczba CFU/ml
Strumień moczu < 4h symptomatyczny pacjent
>103
Strumień moczu < 4h
>104-5
Cewnikowanie próbek od mężczyzn
>103
Cewnikowanie próbek od kobiet
>104
Bez objawów infekcji dróg moczowych
>105
Punkcja
każdy wzrost
UWAGA W rzadkich przypadkach mocz z pęcherza <4h może
wykazywać liczbę kolonii znacznie poniżej 103 CFU/ml.
Powyższe wartości oparto na wytycznych ECLM-EUG ( Europejskiego
Przewodnika Analizy Moczu 2000).
OGRANICZENIA
Uricult jest zdolny wykryć bakterie skoncentrowane (zawarte) między
103 a 107 CFU/ml. Plansza wzorcowa określa liczebność kolonii do
najbliższej potęgi 10. Gdy plansza jest używana zgodnie z instrukcją,
liczebność kolonii określona zostaje z 99% korelacją z klasyczną
metodą wykorzystującą podłoże na płytkach (Arneil, G.C. 1970:
„Detection of bacteriuria at room temperature.” Lancet, January 17, pp
119-121.).
KONTROLA JAKOŚCI
Badania kontrolne Uricult są przeprowadzane u producenta. Jeśli
odbiorca pragnie przeprowadzić własną kontrolę , zaleca się
następującą procedurę:
1. Przygotować zawiesiny o stężeniu 105-106 bakterii/ml w sterylnej soli
fizjologicznej:
Staphylococcus aureus
ATCC 25923
Eschericha coli
ATCC 25922
Proteus mirabilis
ATCC 12453
2. Używając zawiesiny do zaszczepienia powierzchni slajdu Uricult
należy postępować zgodnie z instrukcją.
3. Interpretować wyniki po 16-24 godzinach inkubacji zgodnie z
poniższymi wskazówkami:
St. Aureus ATCC 25923:
Wzrost kolonii tylko na podłożu CLED. Kolonie fermentują laktozę, i
charakteryzują się żółtym kolorem i tendencją do zmiany zabarwienia
podłoża na żółto.
E.coli ATCC 25922:
Wzrost żółtych kolonii z tendencją do zabarwiania podłoża CLED na
żółto i wzrost różowo-czerwonych kolonii na podłożu MacConkeya.
P.mirabilis ATCC 12453:
Wzrost przeźroczystych kolonii z tendencją do zabarwiania na
niebiesko podłoża CLED i wzrostu bezbarwnych kolonii na podłożu
MacConkeya.
PRZECHOWYWANIE I UTYLIZACJA
Zapas opakowań Uricult przechowywać w temperaturze pokojowej
(około 20˚C), unikając przeciągów.
Zużyte Uriculty najlepiej spalić lub umieścić w autoklawie, bądź
zanurzyć na noc w stosowanych środkach dezynfekcyjnych.
Orion Diagnostica, P.O. Box 83, Espoo
02101 Finland
Dystrybutor:
Indeks symboli
Uwaga, należy
zapoznać się z
instrukcją
Wyłącznie do użytku in
vitro
Przechowywać w 230°C
Ilość
testów w
zestawie
Używać
do
Producent
Nie używać
ponownie
Numer
serii
Numer
katalogowy
Postępowanie z odpadami – zgodnie z obowiązującymi w tym
zakresie przepisami
Produkt jest przeznaczony do profesjonalnego użycia w
diagnostyce in vitro
Druk:
21.08.2006
Aktualizowano:
21.08.2013
Orion Diagnostica, P.O.Box 83, Espoo
02101 Finland
Dystrybutor: