Uczelnia: Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Koło Naukowe Biologów
Transkrypt
Uczelnia: Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Koło Naukowe Biologów
Uczelnia: Uniwersytet Rolniczy w Krakowie Koło Naukowe Biologów Autor: Joanna Szymanowicz, Daria Danecka Opiekun naukowy: dr M. Murawski, dr T. Schwarz The use of supercritical water as potential factor of gamete conservation and storage improvement Zastosowanie wody w stanie nadkrytycznym jako potencjalnego czynnika poprawy wyników konserwacji i przechowywania gamet Nasienie tryka poddane działaniu skrajnie niskich temperatur w procesie kriokonserwacji charakteryzuje się niską wartością biologiczną. Z tego powodu zabiegiem koniecznym w inseminacji owiec nasieniem mrożonym jest skrócenie do minimum drogi plemnika do miejsca zapłodnienia, poprzez zastosowanie unasienniania domacicznego kosztowną i skomplikowaną metodą laparoskopową. Szerokie rozpowszechnienie inseminacji doszyjkowej w praktyce produkcyjnej wymaga podniesienia jakości nasienia po rozmrożeniu poprzez zmianę w technice kriokonserwacji w tym ograniczenia zastosowania szkodliwych krioprotektorów. Woda wprowadzona w stan nadkrytyczny poprzez działanie zimnej plazmy nabiera specyficznych właściwości fizykochemicznych takich jak: zwiększona zdolność do rozpuszczania substancji, ułatwione przenikanie przez błony komórkowe, oraz obniżony punkt zamarzania, co może działać krioprotekcyjnie, zwiększając żywotność plemników. Celem badań była analiza przeżywalności plemników tryka poddanych kriokonserwacji w rozrzedzalniku z wodą dejonizowaną oraz wodą wprowadzoną w stan nadkrytyczny z użyciem zimnej plazmy. Analizie poddano 14 ejakulatów. Każdy z nich poddano wstępnej ocenie objętości, koncentracji plemników i ich ruchliwości a następnie podzielono na dwie równe części z których jedną zamrożono w rozrzedzalniku z wodą dejonizowaną zaś drugą wodą wprowadzoną w stan nadkrytyczny. Zastosowanie wody w stanie nadkrytycznym spowodowało nieznaczny wzrost ruchliwości plemników rozmrożonych i ich przeżywalności w temp. 37oC w łaźni wodnej. Istotne różnice na korzyść tej grupy stwierdzono natomiast w morfologicznej ocenie akrosomu i analizie wylewu enzymów świadczących o integralności błon komórkowych wstawki plemnika (tab. 1). Woda w stanie Parametr Woda dejonizowana nadkrytycznym Ruchliwość przed zamrożeniem [%] 89,3±7,3 Ruchliwość po rozmrożeniu [%] 26,4±12,2 30,8±12,4 Uszkodzone akrosomy [%] 64,6±17,2a 56,4±14,1b 187,1±160,4A 152,7±118,3B 2198,3±1810,5A 1612,1±1144,8B Wylew AspAT [U/l] Wylew ALP [U/l] Przeżywalność [min] 266,6±61,3 270,9±76,7 Uzyskane wyniki wskazują na poprawę istotnych z punktu widzenia wartości biologicznej parametrów nasienia po zastosowaniu do rozrzedzalnika wody w stanie nadkrytycznym.