PULSIFIER® -

PULSIFIER® -
W 2003 roku firma Microgen Bioproducts wprowadziła na rynek urządzenie o nazwie
Pulsifier®. Okazało się ono skutecznym i pomocnym narzędziem w pracy laboratoryjnej,
dodatkowo łatwym w obsłudze i konserwacji.
Urządzenie trafiło do róŜnych odbiorców i było wykorzystwane było w róŜnych celach, m. in.
do izolacji pasoŜytów z próbek Ŝywności oraz patogenów roślinnych z płodów rolnych.
We wszystkich badaniach stwierdzono, iŜ otrzymane zawiesiny miały mniej zanieczyszczeń, a
sam proces obróbki przebiegał duŜo szybciej, niŜ ma to miejsce w przypadku uŜycia urządzeń
łopatkowych.
Badania
Porównanie skuteczności działania Pulsifiera® i Stomachera® w procesie odzyskiwania
drobnoustrojów z badanych próbek warzyw.
Wu V.C.H., Jitareerat P. & Fung Y.C. (2003) Journal of Rapid Methods and Automation in
microbiology 11: 145-152
Do badania uŜyto 30 próbek róŜnych warzyw. Obróbkę przeprowadzono przy uŜyciu
Pulsifiera® przez 30 sekund i Stomachera® przez 60 sekund. Uzyskane wyniki wykazały, Ŝe
ogólna liczba drobnoustrojów oraz bakterii z grupy coli były prawie identyczne przy róŜnicy
mniejszej niŜ 0,2 Log jtk/g oraz współczynniku zgodności około 1.00, pomiędzy obiema
metodami (Tabela 1).
Tabela 1. Ogólna liczba bakterii w róŜnych warzywach, przygotowanych przy uŜyciu
Pulsifiera® i Stomachera®
Warzywo
Sałata głowiasta
Zielona cebula
ŚwieŜa marchew
Rzodkiewka
Pietruszka
Zielona sałata
Sałata długolistna
Botwina
Sałata bostońska
Szpinak
Cykoria
Log jtk/g
Pul
Stom
4.78
5.09
6.20
6.15
5.83
5.85
6.07
6.04
5.96
6.16
5.85
6.13
5.82
4.03
6.12
6.12
5.99
5.79
5.76
6.11
6.11
4.82
Stosunek P/S
0.94
1.00
1.00
1.00
0.97
0.95
1.44
1.00
1.03
0.94
1.27
Pieprz pomarańczowy
Ogórek
Seler
Brokuły
Kalafior
Groszek
Rzepa
Kolendra
Cukinia
Rabarbar
Pasternak
Szparagi
Kapusta
Kapusta pekińska
Zielona fasolka
Pomidory
Ziemniaki (pieczone)
BakłaŜan
Średnia
4.14
6.03
5.04
5.61
3.29
4.91
5.41
6.07
6.20
5.65
6.12
6.10
3.54
5.74
5.34
2.01
5.75
5.64
4.36
4.25
4.39
4.90
5.31
5.70
5.58
6.10
6.01
4.38
6.12
5.72
2.31
5.84
4.21
2.31
5.48
5.91
0.95
1.42
1.15
1.14
0.62
0.86
0.97
1.00
1.03
1.29
1.00
1.07
1.53
0.98
1.27
0.87
1.05
0.95
1.02
Zawiesiny uzyskane dla próbek poddanych obróbce przy uŜyciu Pulsifiera® były o wiele
bardziej czyste (gęstość optyczna 0,052), przy mniejszej ilości całkowitego zawieszonego
materiału stałego (SS 0,3%) oraz przy trochę wyŜszym pH (6,56), niŜ próbki ze Stomachera®,
które były bardziej mętne (gęstość optyczna 0,237), przy większej ilości całkowitego
zawieszonego materiału stałego (0,55%) i niŜszym pH (6,35). Uzyskane wyniki przedstawia
Tabela 2.
Tabela 2. Ogólna liczba bakterii w róŜnych warzywach, przygotowanych przy uŜyciu
Pulsifiera® i Stomachera®
Warzywo
Sałata głowiasta
Zielona cebula
ŚwieŜa marchew
Rzodkiewka
Pietruszka
Zielona sałata
Sałata długolistna
Botwina
Sałata bostońska
Szpinak
Cykoria
Pieprz pomarańczowy
Ogórek
Seler
Brokuły
Kalafior
Groszek
Rzepa
Kolendra
Cukinia
OD
Pul
0.01
0.031
0.016
0.021
0.033
0.063
0.063
0.138
0.047
0.282
0.102
0.001
0.003
0.003
0.024
0.004
0.012
0.001
0.14
0.003
SS
Stom
0.073
0.148
0.365
0.037
0.322
0.192
0.222
0.32
0.177
0.56
0.283
0.125
0.095
0.123
0.271
0.078
0.227
0.019
0.765
0.094
Pul
0.2
0.4
0.25
0.1
0.15
0.05
0.15
0.4
0.4
0.4
0.4
0.22
0.4
0.2
0.4
0.3
0.5
0.3
0.1
0.3
Stom
0.2
0.6
0.9
0.4
0.4
0.4
0.4
0.3
0.3
0.4
0.5
0.7
0.5
0.5
0.7
0.5
1.0
0.6
0.7
0.5
Rabarbar
Pasternak
Szparagi
Kapusta
Kapusta pekińska
Zielona fasolka
Pomidory
Ziemniaki (pieczone)
BakłaŜan
Średnia
0.079
0.284
0.041
0.001
0.011
0
0.023
0.018
0.082
0.052
0.224
1.158
0.154
0.034
0.01
0.232
0.05
0.247
0.47
0.237
0.3
0.5
0.4
0.2
0.22
0.2
0.5
0.3
0.22
0.3
0.5
0.8
0.7
0.4
0.2
0.7
0.4
0.6
0.8
0.56
Dane uzyskane dla tych badań potwierdzają, Ŝe próbki poddane obróbce przy uŜyciu
Pulsifiera®, zawierają podobne całkowite liczby bakterii, co próbki opracowane z uŜyciem
Stomachera®, jednak uzyskane zawiesiny są bardziej klarowne i zawierają mniejszą ilość stałych
cząstek, co stanowi zaletę w przypadku dalszych badań mikrobiologicznych na próbkach
takich jak pipetowanie, PCR, oznaczanie ATP i badania immunologiczne.
Ocena wpływu procesu obróbki materiału przy uŜyciu Pulsifiera® na wydajność
odzysku bakterii. Tokai University, Shizouka, Japan.
W badaniu wykorzystano pietruszkę, szpinak, surowe krewetki, małŜe i szynkę. Próbki badano
po 15, 30 i 60 sekundach obróbki w Pulsifierze® i po 30 sekundach w Stomacherze® (Rysunek
2.).
Rysunek 2. Całkowita liczba bakterii, uzyskanych z róŜnych typów Ŝywności, przy
pomocy Pulsifiera® w róŜnym czasie oraz przy pomocy Stomachera® w czasie 30
sekund.
1,0E+08
1,0E+08
1,0E+06
1,0E+06
1,0E+04
1,0E+04
1,0E+02
1,0E+02
1,0E+00
1,0E+00
1
2
3
4
1
1. Szpinak
2. Surowe krewetki
1,0E+08
1,0E+06
1,0E+04
1,0E+02
1,0E+00
1
2
3. MałŜe
LEGENDA:
1=Pulsifier 15 sekund,
2=Pulsifier 30 sekund
3=Pulsifier 60 sekund,
4=Stomacher 30 sekund
2
3
4
3
4
Badania przeprowadzano z uŜyciem woreczków zwykłych i woreczków z filtrem, w celu oceny
ich wytrzymałości. Uzyskana wartość ogólnej liczby drobnoustrojów, odpowiadająca liczbie
jednostek tworzących kolonie (jtk), po 15 sekundach obróbki w Pulsifierze® była równa
wartości uzyskanej po 30 sekundach dla Stomachera®. Liczba ta nie zwiększała się przy
wydłuŜeniu czasu (Tabela 3).
Tabela 3. Średnia ogólna liczba bakterii uzyskanych z róŜnych typów Ŝywności
poddanych procesowi obróbki w Pulsifierze® przez 15 sek. i w Stomacherze® przez 30
sek.
Próbka
Fasola
Pietruszka
Szpinak
Surowe krewetki
MałŜe
Pulsifier®
(jtk/g)
Stomacher®
(jtk/g)
8.2 x 106
3.1 x 106
1.6 x 106
1.4 x 105
2.3 x 104
7.6 x 106
6.3 x 106
1.5 x 106
9.6 x 104
1.9 x 104
Pulsifier®, w porównaniu do Stomachera®, nie powoduje uszkodzenia woreczków po 30
sekundach badania, nawet w przypadku obróbki twardych próbek, takich jak łodygi szpinaku,
czy rozbite muszle małŜy.W przypadku woreczków z filtrami, nie zaobserwowano ich
uszkodzeń po 15 sekundach badania, natomiast po 30 sekundach badania, uszkodzenia juŜ
występowały. Uzyskane dane przedstawia Tabela 4.
Tabela 4. Procent woreczków uszkodzonych przez Pulsifiera® i Stomachera®.
śywność
Rodzaj
woreczka
Pietruszka
Fasola
Szpinak
Szynka
Surowe krewetki
MałŜe
z filtrem
z filtrem
zwykły
zwykły
zwykły
zwykły
Pulsifier®
15 sekund
Pulsifier®
30 sekund
Stomacher®
30 sekund
0%
0%
0%
0%
0%
0%
20%
60%
0%
0%
0%
0%
0%
0%
60%
0%
0%
60%
Z uzyskanych badań jasno wynika, Ŝe Pulsifier® jest skutecznym narzędziem do odzyskiwania
bakterii z róŜnych próbek Ŝywności. Warto podkreślić, Ŝe urządzenie to jest zdolne do obróbki
próbek w ciągu 15 sekund, w porównaniu do zalecanego czasu obróbki 30 sekund dla
Stomachera® (Tabela 3.). Istnieją dane, które wskazują, iŜ Pulsifier® moŜe powodować
uszkodzenie woreczków z filtrami, ale tylko po 30 sekundach obróbki, natomiast w czasie 15
sekund, nie powstają Ŝadne uszkodzenia. Próbki otrzymywane z Pulsifiera® są czystsze i
pozwalają na zmniejszenie liczby próbek, które muszą być poddane obróbce z uŜyciem
woreczków filtracyjnych.
Porównanie Pulsifiera® i Stomachera® pod względem odzyskiwania bakterii
patogennych z próbek Ŝywności. Podsumowanie badań komisyjnych, wykonanych przez
Central Science Laboratory, Norwich, UK.
Badanie moŜliwości Pulsifiera®, w porównaniu ze Stomacherem®, pod względem odzysku
bakterii patogennych z róŜnych typów Ŝywności, przeprowadzono z uŜyciem szczepów
Salmonella enteritidis, Listeria monocytogenes i E. coli 0157. Próbkami Ŝywności
przeznaczonymi do tych badań były: mroŜony groszek, mielona wołowina i proszek
ziemniaczany.
Analiza uzyskanych danych (Tabele 5, 6 i 7) nie wykazuje znaczących róŜnic w ilości
odzyskanych bakterii. Dane te potwierdzają, Ŝe Pulsifier® odzyskuje bakterie patogenne z
róŜnych próbek Ŝywności w porównywalnym stopniu.
Tabela 5. Salmonella enteritidis
Próbka
Metoda
MroŜony groszek
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
Mielona wołowina
Proszek ziemniaczany
Log 10jtk/gm
7.58
7.17
9.48
9.63
9.68
9.67
Tabela 6. Listeria monocytogenes
Próbka
Metoda
MroŜony groszek
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
3.54
3.68
3.45
3.76
3.55
3.79
Metoda
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
Pulsifier®
Stomacher®
Log 10jtk/gm
3.54
3.68
3.79
3.45
3.55
3.76
Mielona wołowina
Proszek ziemniaczany
Log 10jtk/gm
Tabela 7. E. coli 0157
Próbka
MroŜony groszek
Mielona wołowina
Proszek ziemniaczany