FOSFATAZA ALKAlICZNA (ALP)

FOSFATAZA ALKAlICZNA
(ALP) - DEA
fOSFATAZA ALKAlICZNA
«(
(ALP) - DEA
BUFOR OWUETANOLOAMINA
ZASADA METOOY
FosfatilZa a1kaliczna (ALP, katalizuje IV srodo\\isku a1kalicznym przeriesienie
glupy
fosforanowej z 4-nitrofooj4ofosforanu na dwuelandoami~
(DEA). uwalniaj/lC 4-nitrcJenol.
St~erie katalilyczne oznaczane jest na podsta\~e szybkosci tworzenia si~ 4-nitrofenolu.
mietzonego przy 405 nm'~.
4- Nitrofenylofosforan ,. DEA
Tem
r<iura reaf...c··
n
ZS'C. do
iez zrlil
160UA=3.oo~KliA
220 UA = 3.67 ~KliA
270 Uft = 4.50 ~Kltft
3O"C. do
37'C. do
~.obie
160 un = 2.67 ~KalIl
195 un = 3.25 ~Kat/l
240 UA = 4.00 ~Kat/l
U dzieci dorastaill.cych st£liZenia Sll. wytsze i bardzo zmienne. Podane zakresy majl\. jedynle
chara.kler orientacyjny: kazoo laboratol'ium pow-nno ustalit wiasny zakres wartasci
referencyjnych.
ZAWARTOSC OPAKOWAN/A
Nr kat 11590
KONTROLA JAKOSCI
W calu weryfikacji wykonania procedury oznaczenia zaleca si~ uiywanie Slro\\lcy konlrOlnej
biochemicznej poziom I (nr kat 18005. 18009 i 18042) i poziom II (nr kat. 18007. 18010 I
18043).
SKtAO
A. Odczynnik: Dwuetanoloamina 1.2 moI~. cliorek magnezu 0.6 mmolA, pH 9.8.
SZkod1iwy (Xn). R22' Szkodliwy w przypBclw poIknlttda. S28.1: W przypadku zetl<ni¢a sill
odczynnika ze skofll, natyclmlast przemyc powierzchnill skory tiJtq i/oSdil. wody. S45: W
razie wypadku. zJego samopoczuda. skontakfowac s~ niezwiocznie z /ekarzem
Kazoo laboratorium po\\inno ustalii: l'Aasny. wew~trzny system kontroli jakasci i procedur
naprawczych. jetell wartosci konlrane nie mieszczl\. sl,: w zakresie OOpllszczalnyeh tderancji.
CHARAKTERYSTYKA
METROLOGICZNA
= 0.027
B. Od:zynnik: 4-Nilrofenylofosforan 60 mmoiA.
.- Granlca ootekcji: 1.6 UIL
PRZECHOWYWANIE
- Granica liniowosci: 6Sl() UA = 11.50 f.lkatA. Przy wytszych warlosciach rozcienczyi:
~
OOstylowana,w stosunku 1:2 i powtilrzye pomiar.
Przechowywai; w temp 2-8'C.
Sredoie ~zenie
CV
117 VII = 1.95 ~halll
Oznaki zepsucia:
431UII=7.18}J!<alI1
- Odczynniki: obecnosc za\\iesiny. z~ierie.
(kuwela z aoga, optyczna, 1 cm).
absotbancja slepej powyZej 1.200 p1Ly 405 nm
- OdtwarzaJnose (mi'ldZyseryjna):
Sr&drUe sb(ieme
OOCZVNNIKI OOOATKOWE
•
KaJibralor biochemiczny (nr kat. 18011).
•
KaJibrator biochemiczny ~udzki) (nr kat. 180-14).
117 Ull
= 1.95
431 UII
= 7.18 ~k.~1
~ka~1
- Czulosc: 0.362 AmA·UU·min
PRZYGOTOWANIE OOCZVNNIK6w
Od:zynnik rOOoczy:
•
pr~
- Powt!lfZalnose (wewna,lrZseryjna):
Odczynniki sa, stabilne do daty waznoSci podanej na etykiecie. jeieli sa, szczelnie zamkni~e
oraz jeieli nie dopusci si~ do ich zanieczyszczenia podczas uiycia.
•
f'!<alJ1
Nt kat. 11590 i 11591 Wlae zawartose butaleczki z odczynl~kiem B do butalki z
odczynnikiem A. Delikatn/e wymieszae. Inne obj~osci odczynnika roboczego moina
przygotowat w nastlWtqa,cej proporcji: 4 m odczynnika A + 1 m odczynnika B. Stabilnase
przez 2 miesia,ce w telJ1l. 2-8'C.
ilk kat. 11597: Przooiesc 20 n1 odczynnika z butaleczki B do blltelki z odczynllikiem A.
Delikatnie wymieszai: Inne obj~osci odczynnika loboczego motna ptzygotowai; w
nast~uja,cej proporcji: 4 ni odczynnlka A + 1 ni odczynnika B. Slabinosi: pl'zez 2 miesil\.ce
w lemp. 2-8'C.
Wlac zawartose buteleczki z odczynnikiem B do butelki z odczynnlkiem A. Dellkalrie
wynieszac. Inne obj,:tascl odczynnika roboczego moga, byi: ptzygotowane w nastwUil\.Cej
proporcji: 4ni od:zynnika A + 1 m od:zynnika B. Stabilnose przez 2 miesie,ce w temp. 2-8'C.
=
0.022 AmA-Uf'!<at·min
- PoprawnoSe: Wynikl uzyskane przy uiyciu tego odczynnika nie wykazaty roillic
systematycznych Vi pa-ownaniu z odczynnikami referencyjnymi. SZezegoly eksperymentow
pa-ownawczych dost'iPne sa, na tyczenie.
- Interferencje: Lipe~a (tri9icerydy < 10 gAl I billrWina « 20 mgld)
HemO£iobina (> 5 gAl interferuje. Inne leki i substancje moga,interterowae'.
nie inteneruja,.
Podana charakterystyka metrdogiczna zostala uzyskana w przypad<u uiycia
Wyniki magll. rotnli: si~ przy utyciu innego aparatu lub w procedurze manualnej
CHARAKTERYSTYKA
an!1izatora.
DIAGNOSTYCZNA
Fosfataza alkall~zna katalizuje hydroliz<: monoestrOw organlcznego fostoranu w zasadowym pH.
Enzym jest <becny praklycznie we wszyslklch Ikankach ciala. g1ilwnie Vi b10nach kornor1<owych.
a w szczeganie wysokich st~eniach wystwLje w loiysku. nablonku jalilowym. kanalikach
nerkowych. osteotlasJach I wa,lrotie.
Fosfataza obecna w SUfO'Mcyzelrowyeh doroslych powstaje gtownie w wa,lrobie i koSelach.
WYPOSAZENIE OOOATKOWE
- Anallzalor. sp€ktrofolomelr lub fotometr z termostatowanymi gniazdami na 25. 30 lub 37"C i
fillrem 0 dugosci fali 405 nm.
- Kuwety z drog!!. optyczna, 1 em.
MATERIAl:. 00 BADAN
Surowica lub osocze pobrane zgodnie ze standardowymi procedurami.
Fostataza !1kaliczna w surowicy lub osoczu jest slabilna przez 7 dIli w temp. 2-8'C. Jako
antykoagl1antu motna uiyWat heparyny.
WYKONANIE OZNACZENIA
PodllYtszone sl~enia ALP w suro\\icy IIYsIlWUil( u pacjentow z chorobami kOSeizwil(zanymi
ze wzmoiofll\. aktywnoscia, osleotiaslyczna, (chorooa Pageta. pierwotna I wtorna nadczynnose
przytarczyc. guzy kosei. krzywica. osteomaacja. z1amania kosci). a Jakie u pacjentow z
choroba~ dlOg iotciow)'ch i wa,lroby (iOllaezka zapocowa. tOltaczka. poIekowe uszkodzenie
wa,troby. rak wa,lroby). Zmiany fizjdogiczne tskie. jak przyrost masy kostnej i ci~a magl(
spowodowae wzrost poziornu ALP>'o.
Diagnoza kliniczna nie pow/nna bye s!aiMana na pods!awie wynikow pojedynczego badar~a. ale
powinna ie,czyi: zarowno dane kllniczne jak i laboratoryjne ..
UWAGI
1. Doprowadzle odczynnik roboczy i aparal do tel'npel'atury reakcji.
1. Odczynniki Ie mogll bye stosowane w analizalorach automatyeznych. A[Aikacje do \\ielu z
nich dosl'iPne sll. na Zyczenie.
2. O¢ipetowac do kuwety: (Uwaga 1)
BIBUOGRAFIA
I
1. The Committee on Enzymes of the SCandinavian Society fer Qinical Chemistry and airica!
Physiaogy. Recommended methods fer determinaijon of four enzymes in tiood. Scand J
CRn Lab Invest 1974; 33:291-300.
3. Wymieszae I wlotye kuwet~ do fotometru. Rozpocza,i: pomiar czasu.
4. Zarejestrowae absorbancj<: pOCZl\.lkowa, i wykonae 3 kolejne porniary w odst,:pach
jedllominutowych.
5. OtJiczye rDinle': absorooncjl pomi<:dzy kaejnymi
absorbancji na minul~ (AAlmin).
pomiarami
oraz Sl'ednill. roinic~
OBUCZENIA
St~enie ALP w probie obIicza Sl~ przy zastosowaniu poniiszego ogOlnego WZOIlJ:
AAimin "'ob"
------
~Almin
2. Empfeliungen der Deutschen Gesallschaft fOr KJinische Chemie. Standardisierung von
methoden zur bestimmung von enzymaktiviliiten in biologischen 'lissigkeilen. Z KJin Chern
KJin BIochem 1970; 8:658-660.
3. Rosalkl SB, Foo AY, Burtlna A, at al. Multicenter e<aluation of iso-ALP test kit lor
measll"ement of bone alkaline phosphatase activity in serum and ~asma. ain Chem 1993;
39:648{)52
4. Young DS. Effects of <tugs on clinical labora/cry tests. 3th ed. AACC Press, 1997.
5. Friedman and Young. Effects of disease on clinicallabomtory
1997.
xC •••••••~ = UIL
I .bnton
tests, 3th ed. AACC Press,
6. Tietz Texaxx:i< of ainical Chemistry, 2nd edition. BUllis CA, AshVtWd ER WB Saunder.;
Co,l994.
Wytw6n.:a:
Costa Brava30, Barcelona(Hiszp.ma)
ISO 13485· TIJV RJ",r./mtd - Rt~..SX60010383 OOIJI
IS09001-7VVCERT.!lIg
...OllOO6696