Gamma-glutamylotransferaza
Transkrypt
Gamma-glutamylotransferaza
Nr kat. GAMMA.GLUTAMYLOTRANSFERAZA Nrkat.11520 1x200ml 1584 1 1x50ml PRZECHOWYWACWTEMP, (r-Gr) (C 2.80C odczynniki do pomiaru stęzenia 7_GT Ty|ko do Użytku n Vltro W laboratorjum klinicznym z Garnma-glutamy|otransferaza (Y GT) katalizuje pŻenjesienie grupy Y-glutamylowej 7glutamylo_3'karboksy-4-nilroan]]idu na g ]cyloglicynę uwaln ając 3_karboksy-4-n troan nę Stężenie katalitycune oznacza się na podstawie szybkości powstawania 3 karboksy 4- Tempeiatura r€akc] nitroanllinyr2. - Glutamylo - 3 - karboksy - 4 - nitroanilid * )'- Glutamylo Gticyloglicyna-fjl-> - glicylog cyna +3- karboksy-4 - nitroanilina A Ooczv--r B oocr'-r" kal. 1 Nr 1584 1.40mt 1.10T I l I l kat. 1 160- ''łoml I I I 0dczynnik: y G utamylo 3-karboksy-4-nitroanilid 636 lub fotometr z termostatowanymi filtrem o dłUgościfali 405 nm lub 4'10 nm (Uwaga 1) gniazdami na 25, 30 lub 37'C W zakres]e dopuszczalnych tolerancji = 27 nkavl W stosUnkU 1:2 i poMózyć pom]ar PoWtaŻalnośc(WeWnątrzseryjna): I I .517 CV o/" 050/" I I v" 14o/. I 1 n 1 6 ?A 2a odtwarz alność (międzysery]na): ŚIednio ŚtęŻen e 517 nkaLa 99ll/l=1650nkat/l I 1 Uil Anallzator, spektrolotometr i - * _ | 1 = CzulośĆ: 0'719 ^mA.L/U.min 4.8 ?5 25 0'043 = ^mA.Lilkalmin pzy użyciu tego Poprawnośc: Wyniki uzyskane odczynnika nie Wykazaly różnic systematycznych W porównaniu Ż odczynnikami referencyjnymi. Szczegóły eksperymentóW po'ownawcZycl" dostęone są na życzer e lnteńerencje: Hemoglobina (> 5 g/l)' bilirubina (> 10 g/l) i lipemia (triglicerydy > 4 g/l) mogą mieć wpływ na Wynik oznaczenia' Inne leki i substancje mogą inteńerować4. Podana charakterystyka metrologiczna została Uzyskana w prŻypadku Użyc]a analizatora. cm. Wyniki mogą różnic się plz y UżyciU innego aparatu lUb MATER|AŁ Do BADAŃ CHARAKTERYSTYKA w surowicy lest stabilna 5 dni w temp. 2'8oC DIAG W procedUŻ e manualnej NOSTYCZNA Najwyższe stężenie gamma_gIutamylotransferazy występU]e W Wąlrobie, kanalikach nerkowych i chociaż gamn]a glutamylotransferaza WystępUie róWnież W innych tkankach takich ]ak: je ]tach' WYKONANIE OZNACZENIA tlzustka' prostata' gruczoły ślinowe, pęcherzyki nasienne' mózg 1' Podwyższona aktywnośc gamma_glutamylotransferazy ma mie]sce We WsŻelkich chorobach Wąlroby, Wykazując na]Wyższe WańoŚci w plzypadkach WewnątŻ_ lub zewnątrzwątrobowej cholestazy' Wysokie stężenia można zaobserwowac także u pacjentóW z metastatycznym nowotworem wątroby' PrZy Żapaleniu tzustki oraz n ektórych nowotworach złośliwychtlz Ustki aktywnośc enzymu może byc nieco podwyższona 56. Doprowadzić odczynn k roboczy i aparatdo temperatury reakcji do kuwety: (Uwaqa 2) Odcz/-ll,roboczy P,óba badana 3. Wymieszać 4' i | ; 'O' l 100 WloŹyc kuwetę do fotometru Zarejestrować absorbancję początkową i Wykonac 3 koLejne pomiary W odstępach lednominutowych 5. ob|iczyc rÓżnicę pomiędzy kołejnyrni pom|arami absorbanc]i oraz średn!ą różnicę absorbanc]i na minUtę (^A/min). 1. ZalecanapŻez|FCCmetodapodajedłUgość,fali 4'l0nm.Jednakpomiarymogąbyctaue pzeprcWadzane przy 405 nm W tym przypadkU absorbancja początkowa odczynnika jest Stężenie ,v-GT w próbie oblicza się przy zastosowaniU poniższego ogólnego WZoru: Vt*1ou exlxVs i nny jest Współczynnik Używany do im x 18520= nkaM method fory-glutamyltransferase. J Cilt Cilen Clin Biochem 1983,21: 633-646, 2. BeletaJ Ge]aFJ'l\'łólodorecomendadopara]adetermnaciÓnenrutinadeIaconcentración cataliticadelay-glutamiltransferasaensuerosanguineohumano 410 im x 1391 = U/l 23188 = nkaul QulmC/in1990; 9:58-61. concentratlon of 7-GLutamyltranslerase. Clin Chem Lab Med 2042,40.734-138. 4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press, 1995. 5. TietŻ NW' Cljnical gU de to aboratory tests 2nd ed' saunders co' 6. Friedman and Young. Effects of disease on clinical 1997 1584i 0507 z 3. IFCC Primary reference Procedures {or the measuremenl of catalytic activity concentratlons of enzymes at 37"C. Pań 6' Reference procedure lor the measurement of calalytic 405 N/1 W]e U 1. IFCC melhods lor the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 4. IFCC następUjące Wzory: I obliczeń (patŻ: 0bliczenia)' odczynn]ki te mogą byĆ stosowane W analizatorach automatycznych Aplikacje do nich dostępne są na życzenie' BIBLIOGRAFIA =ur Absorbancja molowa (a) 3"karboksy-4'nitroaniliny przy 410 nm wynosi 7908 a przy 405 nm 9900' droga optyczna (l) - 1 crn, całkowita objętoścreakcji (V0_ 1.1' objętoścpróby badane] (Vs) - 0.1, a'1 U/| rÓWna się 1667 nkat{. Do obliczenia Stężenia katalitycznego stosuje się I serce. UWAGI 2' lA/rin* i Diagnoza klin]czna nie powinna byÓ staw]ana na podstawie WynikóW pojedynczego badania, ale powinna łączyc ZarÓwno dane kliniczne jak i laboratoryjne' prawie dwukrotnie Wyższa OBLICZENIA I < € nkaul ggtl/l=1650nkel/ WYPosAżENlE DoDATKoWE I I < 401 38 sled|ie Śtęże| Odczynnik roboczy: W]ac zawańośc buteleczk z odczynnikjem B do bute]ki z odczynnikiem A Delikatnie Wymieszać. 1nne objętości odczynnika roboczego mogą byc przygotowane W następującej proporcjil 4 ml odczynnika A + 1 ml odczynnika B, stabilnośĆprzez 2 miesiące w temp 2'8"C. 2, odpipetować I 24 920 31 tl/l Surowica pobrana zgodnie ze standardowymi procedurami. I 58s 55 badaną wodą destylowaną PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKOW Gamma-glutamylotransfemza 35 Granica detekcjir 1.6 u/l Odczynniki: obecnoŚc zawiesiny, zmętnienie' absorbancja ślepej powyżej 1'000 pŹy 410 nm lub powyżej 1 '450 przy 405 nrn (kuweta z drogą optyczną 1 cm) '1 30"c 37"C: nkaVl Granica liniowości:300 U/l = 5000 nkav|. PŻy Wyższych Wańościach rozcieńczyó próbę 0znakl zepsucia: optyczną <251 CHARAKTERYSTYKA METROLOGICZNA - _ temp' 2-8"c. KUWety Ż drogą 15 naprawczycn jeże]i wartości kontrolne nle mieszczą się Odczynn ki są stabilne do daty Ważnościpodanej na etykiecie' jeżeli są szczelnie zamknięte oraz jeżeli nie dopuści się do ich Zanieczyszczenia podczas użycia' _ 368 8043). _ 32.5 mmol/|. PRZECHOWYWANIE - 22 Każde laboratorium powinno ustalic Własny' Wewnętzny system kontroli jakościi procedur Drażniący (Xi): R36/38: Padrażnia oczy i skÓrę. 526: W pnypadku kantaktu z aczami natychniast przeplukaĆ je dużąiloŚciąwody i skontaktowaĆ się z \ekarzem. s37/39: Używać odpowiednich rękawiczek oraz stasolaĆ ochronę na aczy/tvlarz. I 25"C W ce]u Wer}.fikacji wykonania procedury oznacŻenia zaeca się użyłVanie surowicy kontrolnej biochemicznej poziom I (nr kat. 18005, 18009 i 18042) i poziom ll (nr kat. 18007, 18010 i 1 W u/l KoNTRoLA JAKoścl 1520 Odczynnik: Glicyloglicyna 206.25 mmol/|, wodorotlenek sodu 130 mmol/1, pH 7.9. PŻechowywac Kob ely nkaUl 25'C i 30"C uzyskuje się przeiczając Wartości dla temp. 37"C za pomocą Współczynnika konwersji' Podane zakresy mają jedynie charakter orientacyjny każde sKŁAD I MężczyŹn u1 laboratoriUm powinno Usta]]c Własny zakres WanoŚci referencyjnych' Nr B tFcc WartośCi d|a temp' ZAWARToŚc oPAKoWANlA A. (Y-GT) WARToŚcl REFERENcYJNE ZASADA METODY 7 GAMMA-GLUTAMYLOTRANSFERAZA Wr nrrircr: lJioSr sreirls $.Ą" (]<lsta l:}rrr'ii 3()' lJarccltltrl -]'I /\() 'ilr' ] Iir,żlłrl li.|.r \'x1ln)|l)]r]ll|11 l\()r|/)| ' ].tIl (']:1ł.]- 1ł!!)':l)1 1/)l)|)/)r/, (I liszpania) 1991 laboratory tests, 3th ed. MCC Press,