Gamma-glutamylotransferaza

Transkrypt

Gamma-glutamylotransferaza
Nr kat.
GAMMA.GLUTAMYLOTRANSFERAZA
Nrkat.11520
1x200ml
1584
1
1x50ml
PRZECHOWYWACWTEMP,
(r-Gr)
(C
2.80C
odczynniki do pomiaru stęzenia 7_GT
Ty|ko do Użytku n Vltro W laboratorjum klinicznym
z
Garnma-glutamy|otransferaza (Y GT) katalizuje pŻenjesienie grupy Y-glutamylowej
7glutamylo_3'karboksy-4-nilroan]]idu na g ]cyloglicynę uwaln ając 3_karboksy-4-n troan nę
Stężenie katalitycune oznacza się na podstawie szybkości powstawania 3 karboksy 4-
Tempeiatura r€akc]
nitroanllinyr2.
-
Glutamylo
-
3
-
karboksy
-
4
-
nitroanilid *
)'-
Glutamylo
Gticyloglicyna-fjl->
- glicylog cyna +3- karboksy-4
- nitroanilina
A Ooczv--r
B oocr'-r"
kal.
1
Nr
1584
1.40mt
1.10T
I
l
I
l
kat.
1
160-
''łoml
I
I
I
0dczynnik: y G utamylo 3-karboksy-4-nitroanilid
636
lub fotometr z termostatowanymi
filtrem o dłUgościfali 405 nm lub 4'10 nm (Uwaga 1)
gniazdami na 25, 30 lub
37'C
W
zakres]e dopuszczalnych tolerancji
=
27 nkavl
W
stosUnkU 1:2
i
poMózyć pom]ar
PoWtaŻalnośc(WeWnątrzseryjna):
I
I
.517
CV
o/"
050/"
I
I
v"
14o/.
I
1
n
1 6
?A
2a
odtwarz alność (międzysery]na):
ŚIednio ŚtęŻen e
517 nkaLa
99ll/l=1650nkat/l
I 1 Uil
Anallzator, spektrolotometr
i
-
*
_
|
1
=
CzulośĆ: 0'719
^mA.L/U.min
4.8
?5
25
0'043
=
^mA.Lilkalmin
pzy
użyciu tego
Poprawnośc: Wyniki uzyskane
odczynnika nie Wykazaly różnic
systematycznych W porównaniu Ż odczynnikami referencyjnymi. Szczegóły eksperymentóW
po'ownawcZycl" dostęone są na życzer e
lnteńerencje:
Hemoglobina
(>
5 g/l)' bilirubina (> 10 g/l) i lipemia (triglicerydy > 4 g/l) mogą
mieć wpływ na Wynik oznaczenia' Inne leki i substancje mogą inteńerować4.
Podana charakterystyka metrologiczna została Uzyskana w prŻypadku Użyc]a analizatora.
cm.
Wyniki mogą różnic się plz y UżyciU innego aparatu lUb
MATER|AŁ Do BADAŃ
CHARAKTERYSTYKA
w surowicy lest stabilna 5 dni w temp. 2'8oC
DIAG
W
procedUŻ e manualnej
NOSTYCZNA
Najwyższe stężenie gamma_gIutamylotransferazy występU]e W Wąlrobie, kanalikach nerkowych i
chociaż gamn]a glutamylotransferaza WystępUie róWnież W innych tkankach takich ]ak:
je ]tach'
WYKONANIE OZNACZENIA
tlzustka' prostata' gruczoły ślinowe, pęcherzyki nasienne' mózg
1'
Podwyższona aktywnośc gamma_glutamylotransferazy
ma mie]sce We WsŻelkich chorobach
Wąlroby, Wykazując na]Wyższe WańoŚci w plzypadkach WewnątŻ_ lub zewnątrzwątrobowej
cholestazy' Wysokie stężenia można zaobserwowac także u pacjentóW z metastatycznym
nowotworem wątroby' PrZy Żapaleniu tzustki oraz n ektórych nowotworach złośliwychtlz Ustki
aktywnośc enzymu może byc nieco podwyższona 56.
Doprowadzić odczynn k roboczy
i
aparatdo temperatury reakcji
do kuwety: (Uwaqa 2)
Odcz/-ll,roboczy
P,óba badana
3. Wymieszać
4'
i
|
;
'O'
l
100
WloŹyc kuwetę do fotometru
Zarejestrować absorbancję początkową
i
Wykonac
3
koLejne pomiary W odstępach
lednominutowych
5. ob|iczyc rÓżnicę pomiędzy kołejnyrni pom|arami absorbanc]i oraz średn!ą różnicę
absorbanc]i na minUtę (^A/min).
1. ZalecanapŻez|FCCmetodapodajedłUgość,fali 4'l0nm.Jednakpomiarymogąbyctaue
pzeprcWadzane przy 405 nm W tym przypadkU absorbancja początkowa odczynnika jest
Stężenie ,v-GT w próbie oblicza się przy zastosowaniU poniższego ogólnego WZoru:
Vt*1ou
exlxVs
i
nny jest Współczynnik Używany do
im
x 18520= nkaM
method fory-glutamyltransferase.
J Cilt Cilen Clin Biochem 1983,21: 633-646,
2. BeletaJ Ge]aFJ'l\'łólodorecomendadopara]adetermnaciÓnenrutinadeIaconcentración
cataliticadelay-glutamiltransferasaensuerosanguineohumano
410
im
x 1391 = U/l
23188 = nkaul
QulmC/in1990; 9:58-61.
concentratlon of 7-GLutamyltranslerase.
Clin Chem Lab
Med 2042,40.734-138.
4.
Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed.
AACC Press, 1995.
5.
TietŻ NW' Cljnical gU de to aboratory tests 2nd ed' saunders
co'
6. Friedman and Young. Effects of disease on clinical
1997
1584i 0507
z
3. IFCC Primary reference Procedures {or the measuremenl of catalytic activity concentratlons
of enzymes at 37"C. Pań 6' Reference procedure lor the measurement of calalytic
405
N/1
W]e U
1. IFCC melhods lor the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 4. IFCC
następUjące Wzory:
I
obliczeń (patŻ: 0bliczenia)'
odczynn]ki te mogą byĆ stosowane W analizatorach automatycznych Aplikacje do
nich dostępne są na życzenie'
BIBLIOGRAFIA
=ur
Absorbancja molowa (a) 3"karboksy-4'nitroaniliny przy 410 nm wynosi 7908 a przy 405 nm 9900' droga optyczna (l) - 1 crn, całkowita objętoścreakcji (V0_ 1.1' objętoścpróby badane]
(Vs) - 0.1, a'1 U/| rÓWna się 1667 nkat{. Do obliczenia Stężenia katalitycznego stosuje się
I
serce.
UWAGI
2'
lA/rin*
i
Diagnoza klin]czna nie powinna byÓ staw]ana na podstawie WynikóW pojedynczego badania, ale
powinna łączyc ZarÓwno dane kliniczne jak i laboratoryjne'
prawie dwukrotnie Wyższa
OBLICZENIA
I
<
€
nkaul
ggtl/l=1650nkel/
WYPosAżENlE DoDATKoWE
I
I
< 401
38
sled|ie Śtęże|
Odczynnik roboczy: W]ac zawańośc buteleczk z odczynnikjem B do bute]ki z odczynnikiem A
Delikatnie Wymieszać. 1nne objętości odczynnika roboczego mogą byc przygotowane W
następującej proporcjil 4 ml odczynnika A + 1 ml odczynnika B, stabilnośĆprzez 2 miesiące w
temp 2'8"C.
2, odpipetować
I
24
920
31 tl/l
Surowica pobrana zgodnie ze standardowymi procedurami.
I
58s
55
badaną wodą destylowaną
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKOW
Gamma-glutamylotransfemza
35
Granica detekcjir 1.6 u/l
Odczynniki: obecnoŚc zawiesiny, zmętnienie' absorbancja ślepej powyżej 1'000 pŹy 410
nm lub powyżej 1 '450 przy 405 nrn (kuweta z drogą optyczną 1 cm)
'1
30"c
37"C:
nkaVl
Granica liniowości:300 U/l = 5000 nkav|. PŻy Wyższych Wańościach rozcieńczyó próbę
0znakl zepsucia:
optyczną
<251
CHARAKTERYSTYKA METROLOGICZNA
-
_
temp' 2-8"c.
KUWety Ż drogą
15
naprawczycn jeże]i wartości kontrolne nle mieszczą się
Odczynn ki są stabilne do daty Ważnościpodanej na etykiecie' jeżeli są szczelnie zamknięte
oraz jeżeli nie dopuści się do ich Zanieczyszczenia podczas użycia'
_
368
8043).
_
32.5 mmol/|.
PRZECHOWYWANIE
-
22
Każde laboratorium powinno ustalic Własny' Wewnętzny system kontroli jakościi procedur
Drażniący (Xi): R36/38: Padrażnia oczy i skÓrę. 526: W pnypadku kantaktu z aczami
natychniast przeplukaĆ je dużąiloŚciąwody i skontaktowaĆ się z \ekarzem. s37/39: Używać
odpowiednich rękawiczek oraz stasolaĆ ochronę na aczy/tvlarz.
I
25"C
W ce]u Wer}.fikacji wykonania procedury oznacŻenia zaeca się użyłVanie surowicy kontrolnej
biochemicznej poziom I (nr kat. 18005, 18009 i 18042) i poziom ll (nr kat. 18007, 18010 i
1
W
u/l
KoNTRoLA JAKoścl
1520
Odczynnik: Glicyloglicyna 206.25 mmol/|, wodorotlenek sodu 130 mmol/1, pH 7.9.
PŻechowywac
Kob ely
nkaUl
25'C i 30"C uzyskuje się przeiczając Wartości dla temp. 37"C za pomocą
Współczynnika konwersji' Podane zakresy mają jedynie charakter orientacyjny każde
sKŁAD
I
MężczyŹn
u1
laboratoriUm powinno Usta]]c Własny zakres WanoŚci referencyjnych'
Nr
B
tFcc
WartośCi d|a temp'
ZAWARToŚc oPAKoWANlA
A.
(Y-GT)
WARToŚcl REFERENcYJNE
ZASADA METODY
7
GAMMA-GLUTAMYLOTRANSFERAZA
Wr nrrircr: lJioSr sreirls $.Ą" (]<lsta l:}rrr'ii 3()' lJarccltltrl
-]'I
/\() 'ilr'
] Iir,żlłrl li.|.r \'x1ln)|l)]r]ll|11
l\()r|/)| ' ].tIl (']:1ł.]- 1ł!!)':l)1 1/)l)|)/)r/,
(I
liszpania)
1991
laboratory tests, 3th ed.
MCC
Press,