PASKI DO TESTU PYR

Transkrypt

PASKI DO TESTU PYR
PASKI DO TESTU PYR MAST ID
181807. Szybki test paskowy do wstępnej identyfikacji Streptococcus pyogenes
i Enterococcus spp.
TYLKO DO DIAGNOSTYKI IN VITRO
ZAWARTOŚĆ
25 pasków w opakowaniu
ZASADA TESTU
Zarówno Enterococcus spp., jak i Streptococcus pyogenes (paciorkowce z grupy A wg
Lancefield) często izoluje się z materiałów klinicznych. W celu rozpoczęcia skutecznej terapii
decydująca jest szybka identyfikacja tych drobnoustrojów patogennych.
Godsey i wsp. opisali w 1981 kolorymetryczny test na hydrolizę L-pirolidonylo-b-naftylaminy
(PYR), pozwalający na wstępną identyfikację paciorkowców i enterokoków.
Testy z użyciem chromogennych i fluorogennych substratów są szybsze w porównaniu do
testów tradycyjnych. Dlatego MAST opracował ekonomiczny i szybki test na hydrolizę PYR,
który daje wynik w ciągu 10 min.
Dodatkowe badania wykazały, że hydroliza PYR przez aminopeptydazę pirolidonylową jest
swoista dla enterokoków i S. pyogenes. Nieporęczne testy wrażliwości na bacytracynę
i tolerancji na 6,5% NaCl do identyfikacji S. pyogenes i enterokoków można zastąpić przez
wygodny test PYR.
Dalsze różnicowanie S. pyogenes, enterokoków i enterokoków nie należących do grupy D
można przeprowadzić przy pomocy pasków identyfikacyjnych z eskuliną MAST ID™ (Nr kat.
181806). Poleca się używanie tych pasków w kombinacji z zestawem lateksowym do
typowania paciorkowców.
OPIS TESTU
Paski bibułowe z nadrukiem identyfikacyjnym, polami dla kontroli dodatniej i kontroli
ujemnej. Paski są nasączone L-pirolidonylo-β-naftylamidem.
Sposób użycia
1. Używając jałową igiełkę lub pęsetkę umieścić pasek intralaktamowy MAST ID ™ na
odpowiedniej powierzchni, tj. na czystym szkiełku podstawowym lub w pustej płytce
Petriego.
2. Aseptycznie dodać małą kroplę jałowej dejonizowanej lub destylowanej wody na
każdą powierzchnię paska. Bibuła musi być zwilżona, ale nie nasączona.
3. Używając czystą, świeżą hodowlę badanego drobnoustroju, pobrać kilka kolonii
używając albo patyczka, albo ezę i wetrzeć w powierzchnię testową paska.
4. Inkubować w 35 - 37°C przez 5 minut.
5. Nanieść ok. 10 µl odczynnika DMACA (przygotowanego jak niżej) na każde pole
z badanym szczepem.
6. Rozpuścić 1 g 4-(dwumetyloamino) cynamaldehydu (DMACA), Sigma D4506, w 100
ml 10% v/v roztworu kwasu solnego. Roztwór można przechowywać do 2 miesięcy
w temperaturze pokojowej w ciemnym miejscu. Odczynnik DMACA został
sklasyfikowany jako drażniący.
7. Obserwować każdą zmianę zabarwienia zachodzącą w ciącu 30 sekund.
Interpretacja wyników
Dodatni – barwa różowo-fioletowa.
Ujemny – brak zmiany barwy.
Ograniczenia
Zaleca się wykonanie testów biochemicznych i/lub serologicznych dla kolonii z czystej
hodowli w celu potwierdzenia identyfikacji (np. test lateksowy). Bakterie inne niż
paciorkowce lub enterokoki, np. pewne Klebsiella spp., mogą być PYR – dodatnie. Można
badać tym testem tylko katalazo – ujemne, Gram – dodatnie ziarniaki.
Pewna część paciorkowców z grupy A nie hydrolizuje PYR.
Pewne nie-enterokokowe paciorkowce z grupy D mogą być PYR – dodatnie.
Przechowywanie i termin ważności
Przechowywać w 2 - 8°C w dostarczonych pojemnikach do daty ważności podanej na
etykiecie na opakowaniu. Pozwolić na osiągnięcie temperatury pokojowej przed otwarciem.
Zawartość:
25 pasków, nr katalogowy 181807.
Literatura
1. Godsey J.R., Schulman R., Eriquez L. The hydrolysyisof L-pyrrolidonyl-b-naphtylamide as an
aid in the rapid identification of Streptococcus pyogenes, S. avium and group D enterococci.
Abstracta of the Annual meeting of the ASM 1981; abstract C-84.
2. Kaufholf A., Luttiken R., Schwein U. Few-minutes test for the identification of Group
A streptococci and enterococci with chromogenic substrates. Zbl. Bakt. 1989; 272: 191-195.
3. Facklam R.R., Thacker L.G., Fox B., Eriquez L. Presumptive identification of streptococci with
a new test system. J. Clin. Microbiol. 1982; 15: 191-195.