Tytuły i treści ćwiczeń z przedmiotu: Biotechniki rozrodu (Hodowla

Tytuły i treści ćwiczeń z przedmiotu: Biotechniki rozrodu (Hodowla zwierząt)
Charakter przedmiotu (właściwy podkreślić): przedmiot podstawowy / przedmiot kierunkowy /
Liczba godzin ćwiczeń – 30
Lp.
Tytuł
1
Ćwiczenia
Podstawy anatomii i fizjologii układu. Wykrywanie rui
3
2
Komórki płciowe, narządy rozrodcze. Dojrzałość płciowa, cykl rujowy, jego regulacja, fale pęcherzykowe i
Treści ich implikacje. Metody wykrywania rui u samic różnych gatunków, zasady obserwacji, metody,
diagnostyka, metody wywoływania i blokowania rui.
Tytuł
2
l. godz.
Wykorzystanie hormonów płciowych w rozrodzie zwierząt
Gospodarka hormonalna i zasady sprzężenia zwrotnego, zasady stosowania hormonów w regulacji
Treści
cyklu, Indukcja i synchronizacja owulacji u wybranych gatunków zwierząt; programy, zasady aplikacji,
urządzenia - demonstracja
2
Tytuł
2
Sztuczne unasienianie (AI)
.Metody sztucznego unasieniania. Bydło, świnie, klacze, owce, króliki. instrumenty do inseminacji,
Treści prezentacja zabiegu. Zapoznanie się z etapami pracy i obróbki nasienia
Tytuł
Techniki unasieniania psów i kotów
2
4
Techniki unasieniania suki i kotki – prezentacja, technika, instrumentarium
Treści
Tytuł
5
Treści
Tytuł
6
Treści
Przenoszenie (transfer) zarodków (ET)
Prawo administracyjne. Dobór dawczyń i biorczyń zarodków. Założenia programu MOET. Przebieg i
procedury stosowane przy wykonywaniu transferu zarodków bydła.
Transfer zarodków u świń, klaczy i innych zwierząt gospodarskich
Metody i techniki transferu zarodków u świń i klaczy oraz ich możliwości i ograniczenia
2
2
Tytuł
Pozyskiwanie oocytów
Treści
Przyżyciowe (OPU) i poubojowe pozyskiwanie oocytów – efektywność metody, czynniki ryzyka metody
– prezentacja OPU
2
7
Tytuł
Pozyskiwanie kompleksów oocyt-kumulus (KOK) (ćw. praktyczne)
8
2
Ocena przydatności jajnika jako źródła KOK (ocena struktur na powierzchni jajnika – pęcherzyki, ciałka
Treści żółte), pozyskiwanie oocytów metodą aspiracji lub cięcia (bydło, świnia), ocena morfologiczna
kompleksów oocyt-kumulus (KOK) pod mikroskopem stereoskopowym,
Tytuł Ocena jakości KOK i ich przydatności do dojrzewania in vitro (ćw. praktyczne)
9
2
Treści Inkubacja KOK w roztworze trypsyny, usunięcie komórek pęcherzykowych, ocena morfologiczna
ooplazmy pod mikroskopem stereoskopowym, identyfikacja zmian degeneracyjnych, wykonanie
podstawowych manipulacji (przenoszenie i przepłukiwanie KOK przy pomocy pipety), barwienie
brylantowym błękitem krezolu (test przyżyciowy BCB) podział na oocyty kompetentne (BCB+) i
niekompetentne (BCB-)
Tytuł Dojrzewanie oocytów in vitro (ćw. praktyczne)
10
2
Zapoznanie się z technicznymi aspektami procedury dojrzewania oocytów bydła i świni in vitro (sprzęt,
Treści podłoża), omówienie przygotowania pożywek (stężenia hormonów etc) ocena morfologiczna oocytów po
dojrzewaniu in vitro (stan komórek pęcherzykowych), inkubacja KOK w roztworze trypsyny (usuwanie
komórek pęcherzykowych, identyfikacja pierwszego ciałka kierunkowego),
zasady wykonywania
preparatów z oocytów
Tytuł Ocena jakości mrożonego nasienia buhaja (ćw. praktyczne)
11
2
Rozmrożenie słomki z nasieniem buhaja, ocena morfologiczna plemników (wykonanie preparatów
Treści barwionych mieszaniną nigrozyny z eozyną); ustalenie udziału komórek żywych oraz zmienionych
morfologicznie w populacji 100 ocenianych plemników na preparacie (mikroskop biologiczny), określenie
zidentyfikowanych wad morfologicznych i ich klasyfikacja (pierwotne, wtórne) wykonanie testu HOS
(ocena funkcjonalności błony komórkowej plemnika) i obserwacja zmian morfologii witki
Tytuł Inseminacja oocytów – zapłodnienie in vitro (ćw. praktyczne)
2
12
Zapoznanie się z technicznymi aspektami procedury zapłodnienia in vitro (sprzęt, podłoża), przygotowanie
Treści plemników do zapłodnienia in vitro (wirowanie na kolumnie Percollu, wydzielanie ruchliwej frakcji nasienia
metodą swim-up), inkubacja w obecności heparyny (kapacytacja), inseminacja dojrzałych oocytów i
obserwacja zachowania się plemników w kropli inseminacyjnej pod mikroskopem stereoskopowym
Tytuł Hodowla zarodków in vitro, ocena morfologiczna zarodków (ćw. praktyczne)
13
2
Zapoznanie się z technicznymi aspektami hodowli zarodków in vitro (sprzęt, podłoża), ocena
Treści morfologiczna zarodków w różnych stadiach rozwojowych (od 2 blastomerów do blastocysty) w oparciu o
kryteria opracowana dla zarodków człowieka, ocena wybranych zmian morfologicznych na podstawie
zdjęć i tablic, omówienie procedury wykonywania preparatów z zarodków
Tytuł Oznaczanie płci zarodków metodą PCR (ćw. praktyczne)
14
2
Treści Izolacja DNA z zarodków (inkubacja z proteinazą K) przygotowanie mieszaniny reakcyjnej do PCR
(obliczenie objętości poszczególnych składników mieszaniny i ich stężeń), omówienie procedury PCR ze
starterami dla genu amelogeniny (b-AMGL), ocena wyników na przykładowym żelu agarozowym
Zaliczenie przedmiotu
15
Uwaga:
2
ćwiczenia 1-7
Ćwiczenia 8-15
Poznań, 13.02.2008
Katedra Weterynarii Rolniczej
Katedra Genetyki i Podstaw Hodowli Zwierząt
Kierownik przedmiotu
Dr hab. Dorota Cieślak, prof. nadzw