Monoclonal Mouse Anti-Pneumocystis Jiroveci Clone 3F6 Nr kat

Monoclonal Mouse
Anti-Pneumocystis Jiroveci
Clone 3F6
Nr kat. M0778
Przeznaczenie
Do stosowania w diagnostyce in vitro.
Monoclonal Mouse Anti-Pneumocystis Jiroveci, Clone 3F6, przeznaczony jest do zastosowania w badaniach
immunohistochemicznych. Przeciwciało znakuje Pneumocystis jiroveci (P. jiroveci) i stanowi przydatne
narzędzie do identyfikacji obecności tego organizmu w preparatach przygotowanych z bloczków parafinowych,
zawierających komórki oskrzelowo –pęcherzykowe płuc i tkankę płucną. (1).
Interpretacja kliniczna pozytywnego jak i ujemnego wyniku powinna być uzupełniona przez badanie
morfologiczne z wykorzystaniem odpowiednich kontroli i oceniona przez wykwalifikowanego patologa w
kontekście klinicznego przebiegu choroby pacjenta z uwzględnieniem innych testów diagnostycznych.
Inne nazewnictwo
Szczep pneumocystis, wywołujący infekcje u ludzi, dotychczas znany jako P.carinii (3) jest obecnie nazywany P.
jiroveci (4-6). RównieŜ nazwa P.carinii. sp. Hominis odnosi się do tych wywodzących się od człowieka
szczepów.(5).
Wprowadzenie
P. jiroveci jest drobnoustrojem pozakomórkowym osiedlającym się w przestrzeniach pęcherzykowych płuc.
P.jiroveci wykazuje sekwencje homologiczne bliŜsze grzybom niŜ pierwotniakom, choć jego dokładna pozycja
w królestwie grzybów nie została jeszcze ustalona. Badania nad Pneumocystis utrudnione są brakiem systemu
do hodowli in vitro, w związku, z czym nieznanych jest wiele kluczowych aspektów drobnoustroju (5,6). P.
jiroweci uznawana jest za waŜny czynnik powodujący zakaŜenia oportunistyczne u osób z obniŜoną
odpornością (1).
Dostarczany odczynnik
Monoklonalne mysie przeciwciała w postaci ciekłej jako nadsącz hodowli tkankowej w buforze Tris/HCl
o stęŜeniu 0,05 mol/L, o pH 7,2, zawierający NaN3 w stęŜeniu 15 mmol/L.
Klon: 3F6 (1). Izotyp: IgM, kappa.
StęŜenie mysich IgM: patrz etykieta na fiolce.
Immunogen
Surowy ekstrakt tkanki płucnej zainfekowanej P. jiroveci (1).
Swoistość
W rozdziałach metodą Western blot izolowanych P. carinii, przeciwciało znakuje swoisty dla pasoŜyta element
o masie 82 kDa (1). Przeciwciało nie wykazuje aktywności krzyŜowej z tkanką ludzkich płuc ani róŜnymi
tkankami szczurzymi. Co więcej, przeciwciało nie wykazuje aktywności krzyŜowej z Aspergillus fumigatus,
Candida albicans, Entamoeba histolytica, Giardia lamblia, Leishmania tropica, Plasmodium falciparum,
Toxoplasma gondii, Trypanosoma cruzi, Trypanosoma gambiense (1) i Cryptosporidium sp. (3).
Środki ostroŜności
1. Odczynniki są przeznaczone dla przeszkolonych UŜytkowników.
2. Opisywany produkt zawiera silnie toksyczny związek — azydek sodu (NaN3), w czystej postaci. StęŜenie
NaN3 występujące w produkcie nie jest klasyfikowane jako niebezpieczne. Jednak w wyniku reakcji NaN3
z ołowiem lub miedzią, wchodzącymi w skład instalacji kanalizacyjnych, mogą powstawać silnie wybuchowe
azydki metali. Przy usuwaniu resztek odczynnika uŜywać duŜych ilości wody do przepłukiwania, aby uniknąć
gromadzenia się azydków w instalacji kanalizacyjnej.
3. Podobnie jak w przypadku kaŜdego produktu otrzymywanego z materiału biologicznego, naleŜy stosować
odpowiednie procedury postępowania.
4. W celu uniknięcia kontaktu z oczami i skórą naleŜy nosić odpowiednie osobiste wyposaŜenie ochronne.
5. Niewykorzystany roztwór utylizować zgodnie z lokalnymi, wojewódzkimi i krajowymi rozporządzeniami.
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2–8 °C. Nie stosowa ć po upływie terminu waŜności podanego na opakowaniu.
JeŜeli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niŜ podane w ulotce dołączonej do opakowania,
UŜytkownik powinien je zweryfikować. Nie ma jednoznacznych oznak świadczących o niestabilności tego
produktu. Dlatego równolegle z odczynami na materiale pochodzącym od pacjentów, naleŜy wykonywać
dodatnie i ujemne próby kontrolne. W wypadku nieoczekiwanego wyniku odczynu, którego nie moŜna wyjaśnić
róŜnicami w procedurach laboratoryjnych, gdy podejrzewa się problem z przeciwciałem, naleŜy się
skontaktować z naszym Działem Technicznym.
Przygotowanie próbek
Skrawki parafinowe: Przeciwciała mogą być wykorzystane do znakowania utrwalonych formaliną skrawków
zatapianych w parafinie. Zaleca się wstępną obróbkę próbek przy uŜyciu Dako Proteinase K, nr kat. S3020, lub
cieplne odmaskowanie epitopu. Optymalne wyniki uzyskuje się przy wykorzystaniu Dako Proteinase K, nr kat.
S3020; Dako Target Retrieval Solution, nr kat. S1700; Dako Target Retrieval Solution, pH 9, nr kat. S2368;
Dako Target Retrieval Solution, High pH, nr kat. S3308, lub Dako Target Retrieval Solution, Citrate pH 6, nr kat.
S2369. W trakcie przygotowywania i procedury znakowania immunocytochemicznego skrawki nie powinny
wysychnąć.
(112497-003)
Dako Denmark A/S
M0778/PL/SSJ/2010.08.27 p. 1/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Wykonanie odczynu
Rozcieńczenie: Przeciwciała Monoclonal Mouse Anti-Pneumocystis Jiroveci, nr kat. M0778, mogą być uŜywane
w zakresie rozcieńczeń 1:25–1:50 w przypadku stosowania utrwalanych w formalinie i zatapianych w parafinie
tkanek płucnych, zakaŜonych P. jiroveci, po obróbce wstępnej w postaci 5-minutowego trawienia
protelitycznego z uŜyciem Dako Proteinase K, nr kat. S3020 i 30-minutowej inkubacji z pierwotnym
przeciwciałem w temperaturze pokojowej. Optymalne warunki mogą się zmieniać w zaleŜności od rodzaju
materiału i sposobu jego przygotowania i powinny być ustalone indywidualnie w kaŜdym laboratorium. Zalecana
kontrola ujemna to odczynnik Dako Mouse IgM, na kat. X0942, rozcieńczony do tego samego stęŜenia mysich
IgM, co przeciwciało pierwotne. Zalecane jest rozcieńczanie tych odczynników bezpośrednio przed uŜyciem w
rozcieńczalniku Dako Antibody Diluent, nr kat. S0809, chyba Ŝe stabilność rozcieńczonych przeciwciał i kontroli
ujemnej potwierdzono w praktyce w ramach procedury wykonywania odczynu. Równolegle z odczynami na
materiale pochodzącym od pacjentów naleŜy wykonywać dodatnie i ujemne próby kontrolne.
Wizualizacja: Zaleca się stosowanie zestawu Dako LSAB™+/HRP, nr kat. K0679, i Dako EnVision™+/HRP, nr
kat. K4004 i K4006. W przypadku skrawków mroŜakowych i preparatów komórkowych, jeśli problemem jest
odczyn wywoływany przez endogenną peroksydazę, właściwym rozwiązaniem jest zastosowanie zestawu Dako
APAAP, nr kat. K0670. Postępować zgodnie z procedurą dostarczoną z zestawem do wizualizacji.
Charakterystyka
Wzór odczynu przybiera formę homogenicznych pierścieni odpowiadających ścianom poszczególnych cyst (1).
barwienia
Nieprawidłowe tkanki Przeciwciało znakuje P. jiroveci w zakaŜonej tkance płucnej. Morfologiczny obraz
wewnątrzpęcherzykowych skupisk P. jiroveci moŜe być do pewnego stopnia zróŜnicowany; obserwowano
liniowe ściany cyst oraz wzór ziarnisty w róŜnych regionach zainfekowanej tkanki płucnej (1).
Piśmiennictwo
1. Linder E, Lundin L, Vorma H. Detection of Pneumocystis carinii in lung-derived samples using monoclonal
antibodies to an 82 kDa parasite component. J Immunol Methods 1987;98:57-62.
2. Stringer JR, Beard CB, Miller RF, Wakefield AE. A new name (Pneumocystis jiroveci) for Penumocystis
from humans. Emerg Infect Dis 2002;8:891-96.
3. Hughes WT. Pneumocystis Carinii vs. Pneumocystis jiroveci: Another misnomer (Response to Stringer et
al.). Emerg Infect Dis 2003;9:276-77.
4. Stringer JR, Beard CB, Miller RF, Cushion MT, A new name (Pneumocystis jiroveci) for Pneumocystis from
humans (Response to Hughes). Emerg Infect Dis 2003;9:277-79.
5. Wakefield AE. Pneumocystis carinii. Br Med Bull 2002;61:175-88.
6. Barry SM, Johnson MA. Pneumocystis carinii pneumonia: a review of current issues in diagnosis and
management. HIV Med 2001;2:123-32.
Objaśnienie symboli
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdzić w instrukcji
stosowania
ZuŜyć przed
(112497-003)
Dako Denmark A/S
Producent
M0778/PL/SSJ/2010.08.27 p. 2/2
| Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17