Monoclonal Mouse

Polyclonal Rabbit
Anti-Human
Progesterone Receptor
Nr kat. A0098
Przeznaczenie
Do badań diagnostycznych in vitro.
Przeciwciało Polyclonal Rabbit Anti-Human Progesterone Receptor jest przeznaczone do badań
immunocytochemicznych. Przeciwciało znakuje receptor progesteronu i może stanowić użyteczne narzędzie do
charakteryzowania raków sutka (1, 2). Identyfikacja różnicująca jest wspomagana przez wyniki panelu
przeciwciał. Interpretację powinien przeprowadzić wykwalifikowany patolog w oparciu o historię choroby
pacjenta oraz inne testy diagnostyczne.
Wstęp
Receptor progesteronu (PR) jest członkiem nadrodziny receptorów steroidowych, która obejmuje receptory
kilku steroidów, hormonu tarczycy, oksysteroli i witamin rozpuszczalnych w tłuszczach. PR istnieje w dwóch
izoformach, PRA i PRB, z ekspresją pojedynczego genu w wyniku transkrypcji z dwóch alternatywnych
promotorów (3). Izoforma PRB zawiera fragment N-końcowy ze 164 aminokwasami, który nie występuje w
izoformie PRA (4). Wiązanie progesteronu do PR wywołuje potwierdzającą zmianę powodującą dimeryzację
dwóch kompleksów receptorów ligandów, zwiększoną fosforylację receptora i wiązanie dimerów receptora do
swoistych elementów DNA reagujących na hormon (3). Istnieją pewne dowody sugerujące występowanie
podczas onkogenezy zmiany proporcji pomiędzy PRA i PRB i wskazujące na dominację PRA. Około 60%
przypadków inwazyjnego raka sutka wykazuje ekspresję PRA i(lub) PRB, a ekspresja PR jest powszechnie
uważana za marker funkcji prawidłowego ER
Odczynnik dostarczony
Oczyszczona frakcja immunoglobulin z surowicy odpornościowej królika w postaci płynnej w 0,1 mol/L NaCl,
15 mmol/L NaN3.
Stężenie białka w g/L: Patrz: informacja podana na etykiecie fiolki.
Immunogen:
Syntetyczny peptyd, GLPQVYPPYLNYLRP, odpowiadający aminokwasom 533-547 w regionie N-końcowym
receptora progesteronu wspólnego dla obu izoform (5) i sprzężonego z albuminą jaja kurzego.
Swoistość
Przeciwciała znakują receptor progesteronu. Ślady zanieczyszczeń przeciwciałami usunięto przez absorpcję w
fazie stałej z albuminą jaja kurzego.
W badaniu metodą elektroforezy krzyżowej przy użyciu 12,5 µL przeciwciał na cm 2 powierzchni żelu wobec
2 µL ludzkiego osocza i 2 µL albuminy jaja kurzego nie zaobserwowano reakcji z białkami osocza ani z
albuminą jaja. Barwnik: Coomassie Brilliant Blue.
Jak wykazano w badaniu immunocytochemicznym, przeciwciało
równoważnikiem receptora progesteronu u myszy (6) i szczura (7).
Środki ostrożności
reaguje
krzyżowo
z
białkowym
1. Do stosowania przez wyszkolony personel.
2. Produkt zawiera azydek sodu (NaN3), substancję chemiczną silnie toksyczną w czystej postaci. Azydek
sodu, zastosowany w produkcie w stężeniu, które nie jest sklasyfikowane jako niebezpieczne, może reagować
z elementami kanalizacji wykonanymi z ołowiu i miedzi, powodując nagromadzenie silnie wybuchowych
azydków metali. Po usunięciu spłukać dużą ilością wody, aby zapobiec nagromadzeniu się azydku metalu w
kanalizacji.
3. Podobnie jak w przypadku wszelkich materiałów pochodzących ze źródeł biologicznych należy stosować
właściwe procedury postępowania.
Przechowywanie
Przechowywać w temperaturze 2-8 C. Nie używać po upłynięciu daty ważności podanej na etykiecie fiolki.
Jeśli odczynniki są przechowywane w warunkach innych niż podane powyżej, użytkownik musi zweryfikować te
warunki. Nie ma oczywistych oznak wskazujących na utratę stabilności produktu. Dlatego jednocześnie z
badaniem próbek pacjenta należy wykonywać kontrole dodatnie i ujemne. Jeśli wystąpi nieoczekiwany wzór
barwienia, którego nie można wyjaśnić różnicami w procedurach laboratoryjnych i istnieje podejrzenie, że
przyczyną może być problem z przeciwciałem, należy niezwłocznie skontaktować się z Działem Pomocy
Technicznej naszej firmy.
Przygotowanie próbek
Skrawki parafinowe: Przeciwciało można stosować do znakowania skrawków tkanek utrwalonych w formalinie,
zatopionych w parafinie. Wymagane jest wstępne przygotowanie tkanek za pomocą podwyższonej temperatury
podczas odzyskiwania epitopu. Przy zastosowaniu podwyższonej temperatury podczas odzyskiwania epitopu,
optymalne wyniki uzyskuje się stosując Dako Target Retrieval Solution, nr kat. S1700, Dako Target Retrieval
Solution, pH 9, nr kat. S2368, Dako Target Retrieval Solution, pH 6, nr kat. S2369 lub Dako Target Retrieval
Solution, High pH, nr kat. S3308. Przygotowanie próbek przy użyciu Dako Proteinase K, nr kat. S3020, okazało
się nieskuteczne. Nie wolno dopuścić do wyschnięcia skrawków tkanki podczas przygotowania lub następującej
po nim procedury barwienia immunocytochemicznego.
Skrawki zamrożone i przygotowanie komórek: Przeciwciało można stosować do znakowania zamrożonych
skrawków (6)
(108961-003)
A0098/PL/JFC/14.06.05 p.1/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Procedura barwienia
Rozcieńczanie: Przeciwciało Polyclonal Rabbit Anti-Human Progesterone Receptor, nr kat. A0098, można
rozcieńczać w zakresie 1:25-1:50 w przypadku stosowania na skrawkach parafinowych raka sutka utrwalonych
w formalinie, stosując podwyższoną temperaturę podczas odzyskiwania epitopu w Dako Target Retrieval
Solution, nr kat. S1700, przez 20 minut oraz inkubację w temperaturze pokojowej z pierwszym przeciwciałem
przez 30 minut. Optymalne warunki mogą się zmieniać w zależności od próbki i metody przygotowania i
powinny być określone przez każde z poszczególnych laboratoriów. Zalecaną kontrolą ujemną jest odczynnik
Dako Rabbit Immunoglobulin Fraction (Normal), nr kat. X0903, rozcieńczony do takiego samego stężenia
białka jak pierwsze przeciwciało. Jeśli stabilność rozcieńczonego przeciwciała i kontroli ujemnej nie została
ustalona podczas rzeczywistej procedury barwienia, zaleca się, aby rozcieńczać te odczynniki bezpośrednio
przed użyciem lub rozcieńczyć w rozcieńczalniku Dako Antibody Diluent, nr kat. S0809. Kontrolę dodatnią i
ujemną należy wykonać jednocześnie z testem próbki pacjenta.
Wizualizacja: Zaleca się stosowanie zestawu DAKO LSAB™+/HRP, nr kat. K0679 oraz zestawów DAKO
EnVision™+/HRP, nr kat. K4008 oraz K4010. Należy postępować zgodnie z procedurą załączoną do zestawu.
Charakterystyka działania
Komórki znakowane przeciwciałem wykazują wybarwienie w jądrach.
Tkanki normalne: Przeciwciało znakuje gruczoł sutkowy i macicę.
Przeciwciało nie znakuje tkanek
móżdżkowych, migdałków, wątroby, trzustki, nerek ani okrężnicy.
Tkanki patologiczne: Spośród 165 przypadków raka przewodu sutkowego in situ, przeciwciało znakowało 71
(43%) przypadków (1). W innym badaniu 159 przypadków raka przewodu sutkowego in situ, przeciwciało
znakowało 30% przypadków (2). Podczas badania 75 przypadków gruczolakoraka śluzówki macicy
przeciwciało znakowało 37/60 (62%) przypadków typu I i 4/15 (27%) przypadków typu II (8).
Piśmiennictwo
1. Ringberg A, Anagnostaki L, Anderson H, Idvall I, Fernö M. Cell biological factors in ductal carcinoma in situ
(DCIS) of the breast – relationship tp ipsilateral local recurrence and histopathological characteristics. Eur J
Cancer 2001;37:1514-22.
2. Idvall I, Andersson C, Fallenius G, Ingvar C, Ringberg A, Strand C, et al. Histopathological and cell
biological factors of ductal carcinoma in situ before and after the introduction of mammographic screening.
Acta Oncol 2001;40:653-9.
3. Conneely OM, Mulac-Jericevic B, Lydon JP. Progesterone-dependent regulation of female reproductive
activity by two distinct progesterone receptor isoforms. Steroids 2003;68:771-8.
4. Anderson E. Progesterone receptors – animal models and cell signaling in breast cancer. The role of
oestrogen and progesterone receptors in human mammary development and tumorigenesis. Breast Cancer
Res 2002;4:197-201.
5. Traish AM, Wotix HH. Monoclonal and polyclonal antibodies to human progesterone receptor peptide-(533547) recognize a specific site in unactivated (8S) and activated (4S) progesterone receptor and distinguish
between intact and proteolyzed Receptors. Endocrinology 1990;127:1167-75.
6. Milliken EL, Ameduri RK, Landis MD, Behrooz A, Abdul-Karim FW, Keri RA. Ovarian hyperstimulation by
LH leads to mammary gland hyperplasia and cancer predisposition in transgenic mice. Endocrinology
2002;143:3671-80.
7. Molenda HA, Griffin AL, Auger AP, McCarthy MM, Tetel MJ. Nuclear receptor coactivators modulate
hormone-dependent gene expression in brain and female reproductive behavior in rats. Endocrinology
2002;143:436-44.
8. Veral A, Zekioglu O, Nart D, Çiris M, Özdemir N, Erhan Y. P53, c-erb, Ki-67, estrogen and progesterone
receptor expression and histological parameters in types I and II endometrial carcinomas. Ann Saudi Med
2002; 22: 242-4.
Objaśnienia symboli
(108961-003)
Numer katalogowy
Temperatura przechowywania
Wyrób medyczny do
diagnostyki in vitro
Numer serii
Sprawdzić w instrukcji
stosowania
Zużyć przed
Producent
A0098/PL/JFC/14.06.05 p.2/2
Dako Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17