GAMMA-GLUTAMYLOTRANSFERAZA (y-GT)

Nr kat. 11584
1 x 50 ml
GAMMA-GLUTAMYLOTRANSFERAZA
(y-GT)
Nrkat. 11520
1x200ml
I
PRZECHOWYWAC W TEMP. 2-8'C
Gamma-glutamylotransferaza (y-GT) katalizuje przeniesienie grupy y-glutamylowej z yglutamyI0-3-karboksy-4-nitroanilidu
na glicyloglicyn~ uwalniajqc 3-karboksy-4-nitroanilin~.
St~zenie katalityczne oznacza si~ na podstawie szybkosci powslawania 3-karboksy-4nitroaniliny'·'.
Y - Glutamylo - 3 - karboksy - 4 - nitroanilid
+
GAMMA-GLUTAMYLOTRANSFERAZA
C(
Odczynniki do pomiaru st~zenla y-GT
Tylko do uzytku in vitro w laboralorium klinlcznym
y - Glutamylo - glicyl09licyna
+
IFCC
T ernperatura reakCJi
3 - karboksy - 4 - nitroanilina
ZAWARTOSC OPAKOWANIA
Kobiely
Mfiliczyini
U!
25'C
nkaVl
U!
nkatJ1
< 251
<401
<368
< 15
30'C
< 22
<35
<585
37'C'
<55
<920
< 24
<38
y-GT
Glicyloglicyna~---~
(y-GT)
< 636
Wartosci dla temp. 25'C i 30'C uzyskuje si~ przeliczajqc wartosci dla temp. 37'C za pomocq
wsp6tczynnika konwersji. Podane zakresy majq jedynie charakter orienlacyjny; kazde
laboratorium powinno ustal!: w1asny zakres wartosci referencyjnych.
Nr kat. 11584
W celu weryfikacji wykonania procedury oznaczenia zaleca si~ uzywanie surowicy kontrolnej
biochemicznej poziom I (nr kat. 18005, 18009 i 18042) i poziom II (nr kat. 18007, 18010 i
18043).
SKtAD
Kazde laboratorium powinno ustalit wlasny, wewn~trzny system kontroli jakosci i procedur
naprawczych jezeli wartosci kontrolne nie mieszczq si~ w zakresie dopuszczalnych tolerancji.
A. Odczynnik: Glicyloglicyna 206.25 mmol/l, wodorotlenek sodu 130 mmoln, pH 7.9.
Drainiqcy (Xi): R36138: Podrainia oczy i skor~. S26: W przypadku kontaktu z oczarni
natychrniast przeplukat je dUiq iloscia. wody i skontaktowat si~ z lekarzern. S37/39: Uiywat
odpowiednich r~kawiczek oraz stosowat ochron~ na oczyltwarz.
8. Odczynnik: y-GlutamyI0-3-karboksy-4-nitroanilid
32.5 mmol~.
Przechowywat w temp. 2-8'C.
CHARAKTERYSTYKA METROLOGICZNA
Granica detekcji: 1.6 U!
-
Granica Iiniowosci: 300 un = 5000 nkatll. przy wyiszych wartosciach rozcienczyt prob~
badanq wadq destylowanq w stosunku 1:2 i powtorzyt pomiar.
-
Powtarzalnost (wewnqtrzseryjna):
Gradnie
Odczynniki sa. stabilne do daty waznosci podanej na etykiecie, jezeli Sq szczelnie zamkni~le
oraz jezeli nie dopusci si~ do ich zanieczyszczenia podczas uzycia.
27 nkat/1.
slli!zenie
31 un = 517 nkalJ1
99 un = 1650 nkalJ1
Oznaki zepsucia:
-
=
-
Odczynniki: Obecnost zawiesiny, zm~tnienie, absorbancja slepej powyzej 1.000 przy 410
nm lub powyzej 1.450 przy 405 nm (kuweta z dr09q optycznq 1 cm).
PRZYGOTOWANIE ODCZYNNIKOW
Odczynnik roboczy: Wlat zawartost buteleczki z odczynnikiem 8 do butelki z odczynnikiem A.
Delikatnie wymieszat. Inne obj~tosci odczynnika roboczego mogq byt przygotowane w
nast~pujqcej proporcji: 4 ml odczynnika A + 1 ml odczynnlka 8. Stabilnost przez 2 miesiqce w
temp. 2-8'C.
-
Analizator, spektrofotometr lub fotometr z termostatowanyrni gniazdami na 25, 30 lub 37'C i
filtrem 0 dtugosci fali 405 nm lub 410 nm (Uwaga 1)
-
Kuwety z dr09q optycznq 1 cm.
-
Czulost: 0.719 6mA·LlU·min = 0.043 6mA·Llpkat·min
-
Poprawnost: Wyniki uzyskane przy uzyciu tego odczynnika nie wykazaly roznic
systematycznych w porownaniu z odczynnikami referencyjnymi. Szczegoly eksperymentow
porownawczych dost~pne Sq na iyczenie.
Interterencje: Hem09lobina (> 5 gn), bilirubina (> 10 gn) i lipemia (triglicerydy > 4 g~) mogq
miet wplyw na wynik oznaczenia. Inne leki i substancje ffilJ9q interterowac'.
Podana charakterystyka metrol09iczna zostala uzyskana w przypadku uiycia analizatora.
Wyniki ffilJ9q roznit si~ przy uzyciu innego aparatu lub w procedurze manualnej.
MATERIAt DO BADAN
Surowica pobrana zgodnie ze standardowymi procedurami.
Gamma-glutamylotransferaza w surowicy jest stabilna 5 dni w temp. 2-8'C
Najwyzsze st~zenie gamma-glutamylotransferazy wyst~puje w wqtrobie, kanalikach nerkowych i
jelitach, chociaz gamma-glutamylotransferaza wyst~puje rowniei w innych tkankach takich, jak·
trzustka, prostata, gruczoly slinowe, p~cherzyki nasienne, mozg i serce.
1. Doprowadzit odczynnik roboczy i aparat do temperatury reakcji.
Podwyiszona aktywnost gamma-glutamylotransferazy ma miejsce we wszelkich chorobach
wqtroby, wykazujqc najwyZsze wartosci w przypadkach wewnqtrz- lub zewnqtrzwqtrobowej
cholestazy. Wysokie st~ienia moina zaobserwowac takie u pacjentow z metastatycznym
nowotworem wqtroby. przy zapaleniu trzustl<i oraz niektorych nowatworach zlosliwych trzustki
aktywnost enzymu moze byt nieco podwyzszona ".
2. Odpipetowac do kuwety: (Uwaga 2)
Odczynnik roboczy
1.0 ml
PrOba bad ana
100 ~I
Diagnoza kliniczna nie powinna byt stawiana na podstawie wynikow pojedynczego badania, ale
powinna Iqczyt zarowno dane kliniczne jak i laboratoryjne.
3. Wymieszat i wlozyt kuwel~ do fotometru.
4. Zarejestrowat absorbancj~ POCZqlkOwq I wykonat
jednominutowych.
5. Obliczyt r6Znic~ pomi~dzy kolejnymi
absorbancji na minut~ (6Nmin).
pomiarami
3 kolejne pomiary w odsl~pach
absorbancji
oraz sredniq roinic~
1. Zalecana przez IFCC metoda podaje dlugost fali 410 nm. Jednak pomiary mogq byt takze
przeprowadzane przy 405 nm. W tym przypadku absorbancja poczqtkowa odczynnika jest
prawie dwukrotnie wyzsza i inny jest wsp6tczynnik uzywany do obliczen (patrz: Obliczenia).
2. Odczynniki te m09q byt stoSQwane w analizatorach automatycznych. Aplikacje do wielu z
nich dost~pne Sq na iyczenie.
St~zenie y-GT w probie oblicza si~ przy zastosowaniu ponizszego 09olnego wzoru:
BIBLIOGRAFIA
Vt x 10'
6Nmin x --= un
e x I x Vs
Absorbancja molowa (e) 3-karboksy-4-nitroaniliny przy 410 nm wynosi 7908 a przy 405 nm 9900, droga optyczna (I) - 1 cm, calkowita obj~tost reakcji (Vt) - 1.1, obj~tost proby badanej
(Vs) - 0.1, a 1 U/I rowna si~ 16.67 nkat/1. Do obliczenia st~zenia katalitycznego stosuje si~
nast~pujqce wzory:
l6Nffiin
UWAGI
405 nm
410nm
x 1111 = UII
x 18520= nkalJ\
x 1391 = U!
x 23188 = nkalJ\
1. IFCC methods for the measurement of catalytic concentration of enzymes. Part 4. IFCC
method for y-glutamyltransferase. J Clin Chern Clin Biochern 1983; 21: 633-646.
2. 8eleta J, Gella FJ. Metodo recomendado para la determinacion en rutina de la concentracion
catalitica de la y-glutamiltransferasa en suero sanguineo humano. Ouirn C/in 1990; 9:58-61.
3. IFCC Primary reference Procedures for the measurement of catalytic activity concentrations
of enzymes at 37'C. Part 6. Reference procedure for the measurement of catalytic
concentration of y-Glutamyltransferase. C/in Chern Lab Med 2002; 40:734-738.
4. Young DS. Effects of drugs on clinical laboratory tests, 4th ed. AACC Press, 1995.
5. Tietz NW. Clinical guide to laboratory tests, 2nd ed. Saunders Co, 1991.
6. Friedman and Young. Effects of disease on clinical laboralory tests, 3th ed. AACC Press,
1997
S.A. Costa Bra,·a 3D, Barcelona (1Iiszpania)
WytW(lrca: BioS,stems
fSO
!Ji)(f
/So
.
n", . PJItII11t",d·
9fJ{JI -
j{(!!,.:
JX
TI"1 . CL:lrr· Rf.!:.: f)1
6fJf)f(J1,'{J
/fjfJ
66fJ(;
flfliJI