ABX Pentra Ig A CP

Chemia kliniczna
2013/06/18
A93A01347APL
A11A01923
28 mL
ABX Pentra
Ig A CP
6 mL
■ Pentra C400
Odczynnik diagnostyczny do oznaczania ilościowego in vitro
immunoglobuliny A (IgA) w surowicy krwi lub osoczu metodą
turbidymetryczną.
Wersja aplikacji
Surowica, osocze: IgA_CP (do użytku poza Stanami
Zjednoczonymi)
1.xx
Zastosowanie (do użytku poza Stanami
Zjednoczonymi)
ABX Pentra IgA CP jest odczynnikiem diagnostycznym
do
ilościowego
oznaczania
in
vitro
stężenia
immunoglobuliny A (IgA) w surowicy i osoczu metodą
turbidymetryczną.
Pomiary tej immunoglobuliny wykorzystuje się w
diagnostyce nieprawidłowego metabolizmu białek oraz
braku odporności organizmu na patogeny zakaźne.
QUAL-QA-TEMP-0846 Rev.8
Aspekty kliniczne (1, 2, 3)
Klasy ludzkiej immunoglobuliny (IgG, IgA, IgM, IgE i IgD)
stanowią grupę funkcjonalnie i strukturalnie blisko ze sobą
powiązanych glikoprotein. Ludzka immunoglobulina IgA
ma wagę cząsteczkową ok. 160000 daltonów i składa się
z dwóch identycznych łańcuchów ciężkich i dwóch
identycznych łańcuchów lekkich, powiązanych wiązaniami
dwusiarczkowymi o charakterystycznym kształcie litery Y.
Surowicza immunoglobulina IgA jest wytwarzana przez
komórki osocza (komórki B) i stanowi ok. 15% wszystkich
rozpuszczalnych klas immmunoglobuliny. W ok. 90%
surowicza immunoglobulina IgA jest monomeryczna,
pozostała część jest dimeryczna i polimeryczna.
Większość IgA nie występuje jednak w samej surowicy, a
jedynie na powierzchni błon śluzowych. W tkankach
śluzowych płuc i układu pokarmowego IgA jest uwalniana
w postaci dimerycznej przez komórki osocza. Obie jej Ykształtne części są powiązane nie tylko za pomocą
łańcucha wiążącego, ale też przez specjalny peptyd
zwany
fragmentem
wydzielniczym.
Dlatego
też
immunoglobulina typu IgA jest zwana wydzielniczą IgA.
Nie jest ona zwykle obecna w surowicy ludzkiej, występuje
za to w innych płynach ustrojowych, np. w pocie, łzach
oraz wydzielinach układu pokarmowego i wydzielinach
oskrzelowych. Główną funkcją surowiczej IgA jest
wiązanie się z antygenami i wyzwalanie dalszego ich
katabolizmu.
Obniżony surowiczy poziom IgA występuje zarówno w
pierwotnych, jak i wtórnych syndromach niedoboru
odporności. Duży wzrost jednej klasy immunoglobuliny
przy szpiczaku mnogim może skutkować spadkiem
poziomu innych jej klas, jak choćby IgA. Stężenie może
też zmaleć w wyniku zwiększenia utraty IgA
spowodowanego ostrym zapaleniem jelit. Z kolei
podwyższone poziomy IgA obserwuje się przy ostrych
infekcjach
i
chorobach
autoimmunologicznych.
Szczególnie wysokie surowicze stężenie IgA towarzyszy
procesom zapalnym wątroby. Podobnie, jak w przypadku
innych klas Ig, wiele postaci szpiczaka wytwarza duże
ilości mono- lub poliklonalnej IgA. Ilościowe określenie
surowiczego poziomu IgA jest konieczne przy diagnostyce
różnicowej tych chorób.
Wszystkie metody ilościowego oznaczania IgA są
kalibrowane według poliklonalnej surowiczej IgA. Brak jest
norm dla ilościowej analizy IgA monoklonalnej i
uzyskiwane wartości mogą być uzależnione od użytej
metody i odczynnika. Wyników analiz należy używać
wyłącznie
na
dalszych
etapach
badań.
Immunoglobulinemia monoklonalna, poza oznaczeniem
ilościowym, wymaga także szczegółowego, różnicowego
badania diagnostycznego.
1/5
S.A.S. au capital de 23,859.980 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Ig A CP
Metoda
Test immunoturbidymetryczny.
Pomiar stężenia IgA wykonuje się metodą fotometryczną.
Opiera się on na reakcji antygen-przeciwciało przeciwciał
IgA z IgA w badanej próbce.
■ roztworu NaCl 9 g/L dla Cal 0 (stężenie 0 mg/L).
■ ABX Pentra SP Cal, zawierającego pięć poziomów
kalibratora o różnych stężeniach. Każdą fiolkę
oznaczono numerem od 1 do 5. Dane dotyczące
stosunku poziomu do stężenia kalibratora podano w
dodatku, nr ref. 04710818.
Odczynniki
Kontrola
ABX Pentra IgA CP jest odczynnikiem gotowym do
użycia.
Do wewnętrznej kontroli jakości należy używać:
ABX Pentra SP Control Low, nr ref. A11A01928
(wymaga osobnego zakupu)
3 x 1 mL
ABX Pentra SP Control High, nr ref. A11A01929
(wymaga osobnego zakupu)
3 x 1 mL
Reagent 1:
TRIS pH 7,5
100 mmol/L
NaCl
150 mmol/L
Poli(tlenek etylenu) (PEG)
Detergenty, stabilizatory
Reagent 2:
TRIS pH 7,9
100 mmol/L
NaCl
300 mmol/L
Przeciwciało kozie
stabilizowane
skierowane
przeciwko
IgA
ludzkiemu,
Produktu ABX Pentra IgA CP należy używać zgodnie z
niniejszą ulotką. Producent nie może zagwarantować
właściwego działania produktu, jeżeli zostanie on użyty w
sposób inny od podanego.
Postępowanie z preparatem
1. Wyjmij obie zatyczki kasety.
2. Jeżeli odczynnik zawiera pianę, usuń ją za pomocą
plastikowej pipety.
3. Załóż zatyczki ochronne nr ref. GBM0969 na
pojemnikach z odczynnikami Reagent 1 i Reagent 2.
4. Umieść kasetę w chłodzonej komorze odczynnikowej
analizatora Pentra C400.
Kalibrator
Do kalibracji należy używać:
ABX Pentra SP Cal, nr ref. A11A01927 (wymaga
osobnego zakupu)
5 x 1 mL (5 poziomów)
Stężenie kalibratora oznacza się w odniesieniu do
preparatu wzorcowego CRM 470-CAP/IFCC.
Kalibrację wykonuje się przy użyciu:
Oznaczenie kontroli powinno być przeprowadzane raz
dziennie i/lub po wykonaniu kalibracji.
Częstość przeprowadzania kontroli oraz przedziały ufności
powinny być ustalone w oparciu o wytyczne laboratoryjne
oraz przepisy obowiązujące w danym kraju. Należy
przestrzegać krajowych, regionalnych i lokalnych
wytycznych dotyczących materiałów do kontroli jakości.
Wynik kontroli musi zawierać się w zdefiniowanych
przedziałach ufności. Każde laboratorium powinno
wypracować sposób postępowania w przypadku, gdy
wyniki wykroczą poza wyznaczone przedziały.
Wymagane komponenty niewchodzące w
skład produktu
■ Zautomatyzowany kliniczny analizator biochemiczny:
Pentra C400
■ Kalibrator: ABX Pentra SP Cal, nr ref.A11A01927
■ Kontrole:
ABX Pentra SP Control Low, nr ref.A11A01928, i
ABX Pentra SP Control High, nr ref.A11A01929
■ Roztwór NaCl: 9 g/L
■ Standardowy sprzęt laboratoryjny.
Próbka
■ Surowica.
■ Osocze heparynizowane lub z zawartością EDTA.
Firma HORIBA Medical nie prowadziła testów dla
antykoagulantów innych niż wymienione na liście i w
związku z tym nie zaleca ich używania dla potrzeb tego
oznaczenia.
2/5
S.A.S. au capital de 23,859.980 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Ig A CP
Stabilność (4):
8 mies.
w temperaturze 20-25°C
8 mies.
w temperaturze 4-8°C
8 mies.
w temperaturze -20°C
Zakres norm
■ Kasety odczynnikowe są kasetami jednorazowego
użytku, należy je utylizować zgodnie z lokalnymi
przepisami.
■ Należy uważnie zapoznać się z kartą charakterystyki
(MSDS) dołączoną do odczynnika.
■ Nie używać produktu, jeżeli można zaobserwować
zmianę jego cech biologicznych, chemicznych lub
fizycznych, co wskazuje na jego nieprzydatność do
użytku.
Każde laboratorium powinno wypracować swoje własne
zakresy odniesienia. Wartości podane w niniejszej ulotce
mają wyłącznie charakter orientacyjny.
Wydajność przy użyciu w analizatorze
Pentra C400
Zamrażać tylko raz!
Dorośli: (5) 0,70 - 4,00 g/L
Dane przedstawione poniżej to wartości uzyskiwane na
analizatorach HORIBA Medical.
Przechowywanie i stabilność
Liczba oznaczeń: 100
Odczynniki, w nieotwieranych kasetach, zachowują
stabilność do daty ważności podanej na etykiecie, o ile są
przechowywane w temperaturze 2-8°C.
Stabilność
robocza
odczynników:
patrz
rozdział
„Wydajność przy użyciu w analizatorze Pentra C400”.
Nie wolno zamrażać odczynników.
Stabilność robocza odczynników:
Po otwarciu kaseta z odczynnikiem umieszczona w
chłodzonej komorze analizatora Pentra C400 zachowuje
stabilność przez 28 dni.
Uszkodzenie opakowania
Granica oznaczalności:
W przypadku zniszczenia opakowania ochronnego, nie
należy używać odczynnika, jeżeli uszkodzenie mogło
wpłynąć na jego właściwości.
Objętość próbki: 2 µL/oznaczenie
Granicę oznaczalności określono zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP17-A (6) i wynosi ona
0,22 g/L.
Minimalna granica oznaczalności:
Postępowanie z odpadami
■ Należy postępować zgodnie z lokalnie obowiązującymi
przepisami.
■ Opisywany odczynnik jest konserwowany azydkiem
sodu, obecnym w stężeniu poniżej 0,1%. Azydek sodu
może wchodzić w reakcje z ołowiem lub miedzią,
tworząc wybuchowe azydki metali.
Ogólne środki ostrożności
■ Niniejszy odczynnik jest przeznaczony wyłącznie do
profesjonalnej diagnostyki in vitro.
■ Nie połykać. Unikać zanieczyszczenia skóry i błon
śluzowych.
■ Przy pracy należy stosować standardowe laboratoryjne
środki ostrożności.
Dolną granicę oznaczalności (MIL) ustala się wykonując
wielokrotne oznaczenie próbek o niskim stężeniu i wynosi
ona 0,06 g/L.
Trafność i precyzja:
■ Powtarzalność (precyzja w trakcie pracy urządzenia)
Przeprowadzane jest 20 oznaczeń dla 3 próbek o niskim,
średnim oraz wysokim stężeniu oraz dla 2 kontroli,
zgodnie z zaleceniami procedury Valtec (7).
Wartość średnia
g/L
CV %
Próbka kontrolna 1
1,02
0,95
Próbka kontrolna 2
3,24
0,63
Próbka 1
0,93
0,53
3/5
S.A.S. au capital de 23,859.980 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Ig A CP
Wartość średnia
g/L
CV %
Próbka 2
1,83
0,71
Próbka 3
3,73
0,93
według obecnego stanu wiedzy wpływają na wyniki tej
metody (12, 13).
Zjawisko prozone:
Nie stwierdzono nadmiaru antygenu do wartości stężenia
50,0 g/L.
■ Powtarzalność (precyzja całkowita)
3 szt. próbek o niskim, średnim i wysokim stężeniu oraz 2
kontrole są przez 20 dni poddawane podwójnym
oznaczeniom (2 serie dziennie), zgodnie z zaleceniami
CLSI (NCCLS), procedura EP5-A2 (8).
Wartość średnia
g/L
CV %
Próbka kontrolna 1
1,03
4,30
Próbka kontrolna 2
3,36
2,94
Próbka 1
1,08
2,89
Próbka 2
2,09
1,61
Próbka 3
4,11
1,64
Zakres pomiaru:
Oznaczenie potwierdziło zakres pomiaru od 0,22 do
najwyższego punktu kalibracji, z automatycznym
rozcieńczeniem następczym do x 3.
Liniowość odczynnika ustalono do wartości 8,00 g/L,
stosując zalecenia CLSI (NCCLS), procedura EP6-A (9).
Korelacja:
50 pobrane od pacjenta próbki (surowicy) koreluje się z
komercyjnie dostępnym odczynnikiem, służącym jako
wzorzec, zgodnie z zaleceniami CLSI (NCCLS), procedura
EP9-A2 (10). Wartości zawierały się w zakresie od < 0,18
do 6,27 g/L.
Równanie dla otrzymanej linii allometrycznej (11) jest
następujące:
Y = 0,87 X + 0,00 (g/L)
przy współczynniku korelacji r2 = 0,9976.
Czynniki zakłócające:
Hemoglobina:
Nie obserwuje się znaczącego
wpływu do 290 µmol/L (500 mg/dL).
Triglicerydy:
Nie obserwuje się znaczącego
wpływu do stężenia Intralipid®
(świadczącego
o
lipemii)
wynoszącego
7,0
mmol/L
(612,5 mg/dL).
Bilirubina
Nie obserwuje się znaczącego
całkowita:
wpływu do 400 µmol/L (23,4 mg/dL).
Bilirubina
Nie obserwuje się znaczącego
bezpośrednia:
wpływu do 400 µmol/L (23,4 mg/dL).
Young podaje także inne ograniczenia, a w szczególności
listę leków oraz zmiennych przedanalitycznych, które
Stabilność kalibracji:
Odczynnik jest kalibrowany w dniu 0. Stabilność kalibracji
jest kontrolowana przez wykonanie testów na 2 próbkach
kontrolnych.
Stabilność kalibracji wynosi 14 dni.
Uwaga: Ponowną kalibrację odczynnika zaleca się w
przypadku zmiany jego serii oraz w przypadku, gdy wyniki
kontroli jakości wykroczą poza założony zakres.
Wersja aplikacji:
1.xx
Ostrzeżenie
Użytkownik ma obowiązek sprawdzić, czy niniejszy
dokument dotyczy używanego odczynnika.
Bibliografia
1.
2.
3.
4.
5.
6.
Thomas L., editor. Clinical laboratory diagnostics. 1st
ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft (1998):
667-78.
Johnson AM, Rohlfs EM, Silverman LM. Proteins. In:
Burtis CA, Ashwood ER, editors. Tietz Textbook of
Clinical Chemistry. 3rd ed. Philadelphia: WB Saunders
Company (1999): 507-12.
Bartl R, Hoechtlen-Vollmar W, Thomas L. Monoclonal
immunoglobulins. In: Thomas L., editor. Clinical
laboratory diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books
Verlagsgesellschaft (1998): 742-58.
Use of anticoagulants in diagnostic laboratory
investigations. WHO Publication WHO/DIL/LAB/99.1
Rev 2 (2002): 35.
Dati F, Schumann G, Thomas L, Aguzzi F, Baudner
S, Bienvenu J et al. Consensus of a group of
professional societies and diagnostic companies on
guidelines for interim reference ranges for 14 proteins
in serum based on the standardization against the
IFCC/BCR/CAP reference material (CRM 470). Eur.
J. Clin. Chem. Clin. Biochem. (1996) 34: 517-20.
Protocols for determination of limits of detection and
limits of quantitation. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP17-A (2004) 24 (34).
4/5
S.A.S. au capital de 23,859.980 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com
Chemia kliniczna
ABX Pentra
Ig A CP
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
Vassault A, Grafmeyer D, Naudin C et al. Protocole
de validation de techniques (document B). Ann. Biol.
Clin. (1986) 44: 686-745.
Evaluation of Precision Performance of Quantitative
Measurement Method. Approved Guideline, CLSI
(NCCLS) document EP5-A2 (2004) 24 (25).
Evaluation of the Linearity of Quantitative Analytical
Methods. Approved Guideline, CLSI (NCCLS)
document EP6-A (2003) 23 (16).
Method Comparison and Bias Estimation Using
Patient Samples. Approved Guideline, 2nd ed., CLSI
(NCCLS) document EP9-A2 (2002) 22 (19).
Passing H, Bablock W. A new biometrical procedure
for testing the equality of measurements from two
different analytical methods. J. Clin. Chem. Clin.
Biochem. (1983) 21: 709-20.
Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory
Tests. 4th Edition, Washington, DC, AACC Press
(1997) 3: 143-163.
Young DS. Effects of Preanalytical Variables on
Clinical Laboratory Tests. 2nd Edition, Washington,
DC, AACC Press (1997) 3: 120-132.
5/5
S.A.S. au capital de 23,859.980 € - RCS Montpellier 328 031 042 - SIRET 328 031 042 000 42 - APE 332 B
Najnowsza wersja dokumentacji: www.horiba.com