C-Reactive Protein - Serum Application Note

Białko C-reaktywne (Czułe)
Modular P
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
Białka C-reaktywnego w surowicy/osoczu
na Modular P
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia białka C-reaktywnego (C-Reactive protein, CRP) w próbkach
materiału pochodzenia ludzkiego z wykorzystaniem turbidymetrii przy użyciu urządzenia Modular P (1, 2)
Zakres pomiarowy
Około 0,20–15 mg/L, w zależności od konkretnej partii kalibratora. Zakres może zostać poszerzony do 0,2–60
mg/L w przypadku późniejszego rozcieńczenia próbki.
Zakres normy
0–0,5 mg/L (3). Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z „Ustawieniami urządzenia” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor
Kalibrator
Kontrola
Rozcieńczalnik
Nr kat.
LX001
S2360
X0970
X0971
X0972
S2005
Nazwa
DakoCytomation C-Reactive Protein Immunoparticles (Sensitive)
DakoCytomation Reaction Buffer 8
DakoCytomation C-Reactive Protein Calibrator (Sensitive)
DakoCytomation C-Reactive Protein Low Control (Sensitive)
DakoCytomation C-Reactive Protein High Control (Sensitive)
DakoCytomation Dilution Buffer 1
Próbki
Ludzka surowica, osocze z dodatkiem heparyny lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 5 dni w temperaturze 2–8 °C.
Nie zaleca się stosowania próbek poddanych wcześniejszemu zamrażaniu.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor reakcyjny (R1)
Bufor jest gotowy do użytku. W analizatorze bufor stabilny jest do 8 tygodni.
Przeciwciało (R3)
Zawiesina czynników immunologicznych jest gotowa do użytku.
Przechowywać w temperaturze 2–8°C. Zob. ulotkę informacyjną i datę ważności na etykiecie.
W analizatorze stabilne do 8 tygodni.
Wydajność: 1 mL zawiesiny czynników immunologicznych umożliwia dokonanie około 18 odczytów kuwet wzorców
lub próbek. Przy obliczaniu wymaganej objętości odczynnika należy wziąć pod uwagę nieużyteczną objętość
buteleczki.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 8 tygodni, po zmianie partii odczynnika lub w przypadku, gdy jakość wyników
spadnie poniżej poziomu przyjętego w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli wydajność jest nieakceptowalna, należy dokonać ponownej kalibracji. Zweryfikować odczynniki i procedurę.
Jeśli problemy będą się utrzymywać, proszę się skontaktować z dostawcą urządzenia lub obsługą techniczną
firmy DakoCytomation.
(113197-001)
30 194.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Białko C-reaktywne (Czułe)
Modular P
Dane wydajnościowe
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,35 w urządzeniu Modular P odpowiada stężeniu CRP wynoszącemu
ok. 14 mg/L.
Limit detekcji
Szacunkowy limit detekcji wynosi 0,07 mg/L.
Precyzja
Precyzję oszacowano przy użyciu dwóch odczynników kontrolnych i surowic o trzech znanych stężeniach CRP,
zgodnie z wytycznymi zamieszczonymi w dokumencie NCCLS EP5-A (4).
Próbki
C-Reactive Protein Low Control
(Sensitive), Nr kat. X0971
C-Reactive Protein High Control
(Sensitive), Nr kat. X0972
Pula A ludzkich surowic
Pula B ludzkich surowic
Pula C ludzkich surowic
Średnie
stęż.
CRP
(mg/L)
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Całk. wsp.
zmienności
(%)
n
W serii
Między
dniami
Razem
3,21
0,027
0,033
0,042
1,3
20
11,98
0,078
0,129
0,150
1,3
20
0,84
7,12
13,28
0,026
0,072
0,116
0,004
0,092
0,088
0,026
0,117
0,145
3,1
1,7
1,1
20
20
20
Dokładność
Oczekiwana dokładność wykrycia CRP wynosi 85-115% przy stosowaniu DakoCytomation C-Reactive Protein Low
Control (Sensitive), Nr kat. X0971, i DakoCytomation C-Reactive Protein High Control (Sensitive), Nr kat. X0972
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 0,2–60 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stężenia antygenu dla stężenia CRP do 500 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stężeniach do 10 g/L hemoglobiny, 25 g/L trójglicerydów, 1200 IU/mL czynnika
reumatoidalnego oraz 230 mg/L (~270 µmol/L) bilirubiny związanej i 450 mg/L (~ 770 µmol/L) bilirubiny wolnej.
Bilirubina w stężeniach wyższych od podanych znacząco redukuje sygnał (zaniża wyniki).
Porównanie metod
Oznaczanie CRP zgodnie z niniejszą procedurą porównano z dostępnymi komercyjnie testami turbidymetrycznymi
i nefelometrycznymi. Dane dostępne są na życzenie.
Piśmiennictwo
1.
Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: method optimization. Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001;39:1098-109.
2.
Modular P manual(s).
3.
Dati F, Schumann G, Thomas L, Aguzzi F, Baudner S, Bienvenu J, et al. Consensus of a group of
professional societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in
serum based on the standardization against the IFCC/BCR/CAP Reference Material (CRM 470). Eur J Clin
Chem Clin Biochem 1996;34:517-20.
4.
Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices, Approved Guideline, NCCLS Document
EP5-A, 1998.
(113197-001)
30 194.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Białko C-reaktywne (Czułe)
Modular P
Ustawienia urządzenia (program w wersji 7146020-02-48)
Analysis
Assay/Time/Point
Wavelength (2nd/Primary)
Sample Volume
Normal
Decrease
Increase
О Water
О Diluent
Diluent
Abs. Limit
Prozone Limit
Cell Detergent
Twin Test
Calibration
2 Point End
3.0
30
0
0.0
3.0
0
18
34
Reagent Volume
R1
230
R2
0
R3
50
R4
0
0.0
90
0
951*
0
32000
Increase
32000
0
0
Detergent 1
Cancel
0
0
Upper
Logit-Log 4P
6
4
0
None
Cancel
Calibration Type
Point
Span
Weight
Update Type
Isozyme Q Channel
SD Limit
Duplicate Limit
Sensitivity Limit
S1 Abs. Limit
Range
10
0
0
0
0
20
0
901*
901*
901*
901*
450
50
20
-99999
-32000
Application Code
Unit
Report Name
CRP
100
901*
mg/L
Data Mode
Technical Limit
Repeat Limit
Change over
Module
Lot
Bottle
Abs
Expected Value
Male
100
Year
100
Year
Active
St1+0.001
Std. 1
Female
100
100
Std. 6
Std. 6
Year
Year
Timing
T2
T3
Reagent Bottle Size
A
0*
D
B
0*
E
C
0*
Auto Calibration
Time out
□ Blank
□ Span
□ 2 Point
□ Full
%
999999
320000
0
0
0
0
0*
0*
0
0
0
0
Cancel
Cancel
Cancel
-99999 999999
-99999 999999
-99999 999999
-99999 999999
-99999 999999
-99999 999999
□ Control Interval Time
□ Qualitative
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
Others
0
0
0
0
0
Standard
Calibration Code*
(1)
501*
0.0064
x C(cal)
S001-3*
Concentration***
Rack No. - Pos.*
Sample Volume
Diluted S. Volume
Diluent Volume
Diluent – Code No. S2005
(113197-001)
2.0
2.6
270
-+++
+++
++++
Default
Sex
О Male
О Female
Range
О Range 1
О Range 2
О Range 3
(2)
(3)
(4)
(5)
(6)
501*
501*
501*
501*
501*
0.0110 0.0148 0.0252 0.1591 0.4704
x C(cal) x C(cal) x C(cal) x C(cal) x C(cal)
S001-3* S001-3* S001-3* S001-3* S001-3*
3.0
3.0
270
R1 – Code No. S2360
3.0
3.0
200
4.0
3.0
155
35
3.0
185
35
5.0
89
R3 – Code No. LX001
[*]
Defined by the customer.
[**]
The calculated relative concentration of Std.1 and Std.6. In order to get a warning for samples with concentration
below the concentration of the lowest standard, the lower technical limit has to be 0.001 mg/L higher than the
lowest standard.
[***]
Calibrator, code No. X0970. The concentration is calculated as the factor times the calibrator value for the specific lot
(C(cal), stated in mg/L on the X0970 Analytical Value Sheet). Number of decimals stated for Std.1 defines the number
of decimals in printout. Two decimals are recommended.
30 194.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17