C-Reactive Protein - Serum Application Note

Białko C-reaktywne (Czułe)
Hitachi 917
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
Białka C-reaktywnego w surowicy/osoczu
na Hitachi 917
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia białka C-reaktywnego (C-Reactive protein, CRP) w próbkach
materiału pochodzenia ludzkiego z wykorzystaniem turbidymetrii przy użyciu urządzenia Hitachi 917 (1, 2)
Zakres pomiarowy
Około 0,20–15 mg/L, w zależności od konkretnej partii kalibratora. Zakres może zostać poszerzony do 0,2–60
mg/L w przypadku późniejszego rozcieńczenia próbki.
Zakres normy
0–0,5 mg/L (3). Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z „Ustawieniami urządzenia” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor
Kalibrator
Kontrola
Rozcieńczalnik
Nr kat.
LX001
S2360
X0970
X0971
X0972
S2005
Nazwa
DakoCytomation C-Reactive Protein Immunoparticles (Sensitive)
DakoCytomation Reaction Buffer 8
DakoCytomation C-Reactive Protein Calibrator (Sensitive)
DakoCytomation C-Reactive Protein Low Control (Sensitive)
DakoCytomation C-Reactive Protein High Control (Sensitive)
DakoCytomation Dilution Buffer 1
Próbki
Ludzka surowica, osocze z dodatkiem heparyny lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 5 dni w temperaturze 2–8 °C.
Nie zaleca się stosowania próbek poddanych wcześniejszemu zamrażaniu.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor reakcyjny (R1)
Bufor jest gotowy do użytku. W analizatorze bufor stabilny jest do 8 tygodni.
Przeciwciało (R3)
Zawiesina czynników immunologicznych jest gotowa do użytku.
Przechowywać w temperaturze 2–8°C. Zob. ulotkę informacyjną i datę ważności na etykiecie.
W analizatorze stabilne do 8 tygodni.
Wydajność: 1 mL zawiesiny czynników immunologicznych umożliwia dokonanie około 18 odczytów kuwet wzorców
lub próbek. Przy obliczaniu wymaganej objętości odczynnika należy wziąć pod uwagę nieużyteczną objętość
buteleczki.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 8 tygodni, po zmianie partii odczynnika lub w przypadku, gdy jakość wyników
spadnie poniżej poziomu przyjętego w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli wydajność jest nieakceptowalna, należy dokonać ponownej kalibracji. Zweryfikować odczynniki i procedurę.
Jeśli problemy będą się utrzymywać, proszę się skontaktować z dostawcą urządzenia lub obsługą techniczną
firmy DakoCytomation.
(113182-001)
30 190.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 1/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Białko C-reaktywne (Czułe)
Hitachi 917
Dane wydajnościowe
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,35 w urządzeniu Hitachi 917 odpowiada stężeniu CRP wynoszącemu
ok. 14 mg/L.
Limit detekcji
Szacunkowy limit detekcji wynosi 0,09 mg/L.
Precyzja
Precyzję oszacowano przy użyciu dwóch odczynników kontrolnych i surowic o trzech znanych stężeniach CRP,
zgodnie z wytycznymi zamieszczonymi w dokumencie NCCLS EP5-A (4).
Próbki
C-Reactive Protein Low Control
(Sensitive), Nr kat. X0971
C-Reactive Protein High Control
(Sensitive), Nr kat. X0972
Pula A ludzkich surowic
Pula B ludzkich surowic
Pula C ludzkich surowic
Średnie
stęż.
CRP
(mg/L)
W serii
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Miêdzy
Między
Razem
seriami
dniami
Całk. wsp.
zmienności
(%)
n
3,26
0,026
0,040
0,030
0,057
1,7
80
11,62
0,031
0,109
0,110
0,158
1,4
80
0,87
7,06
13,33
0,032
0,021
0,035
0,022
0,075
0,077
0,016
0,000
0,035
0,042
0,077
0,091
4,9
1,1
0,7
80
80
80
Dokładność
Oczekiwana dokładność wykrycia CRP wynosi 85-115% przy stosowaniu DakoCytomation C-Reactive Protein Low
Control (Sensitive), Nr kat. X0971, i DakoCytomation C-Reactive Protein High Control (Sensitive), Nr kat. X0972
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 0,2–60 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stężenia antygenu dla stężenia CRP do 500 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stężeniach do 10 g/L hemoglobiny, 25 g/L trójglicerydów, 1200 IU/mL czynnika
reumatoidalnego oraz 275 mg/L (~325 µmol/L) bilirubiny związanej i 320 mg/L (~ 550 µmol/L) bilirubiny wolnej.
Bilirubina w stężeniach wyższych od podanych znacząco redukuje sygnał (zaniża wyniki).
Porównanie metod
Oznaczanie CRP zgodnie z niniejszą procedurą porównano z dostępnymi komercyjnie testami turbidymetrycznymi
i nefelometrycznymi. Dane dostępne są na życzenie.
Piśmiennictwo
1.
Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: method optimization. Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001;39:1098-109.
2.
Hitachi 917 manual(s).
3.
Dati F, Schumann G, Thomas L, Aguzzi F, Baudner S, Bienvenu J, et al. Consensus of a group of
professional societies and diagnostic companies on guidelines for interim reference ranges for 14 proteins in
serum based on the standardization against the IFCC/BCR/CAP Reference Material (CRM 470). Eur J Clin
Chem Clin Biochem 1996;34:517-20.
4.
Evaluation of Precision Performance of Clinical Chemistry Devices, Approved Guideline, NCCLS Document
EP5-A, 1998.
(113182-001)
30 190.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 2/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17
Białko C-reaktywne (Czułe)
Hitachi 917
Ustawienia urządzenia (program w wersji 7146020-02-48)
Analyze
Assay/Time/Point
2Point End
Wave (2nd/Primary)
S.Vol (Normal)
S.Vol (Decrease)
S.Vol (Increase)
Diluent
Reagent
(R1)
Reagent
(R2)
Reagent
(R3)
Reagent
(R4)
Abs. Limit
Prozone Limit
Cell Detergent
3.0
30
0.0
951*
T1
T2
T3
T4
10
450
0.0
3.0
0.0
230
0
50
0
32000
32000
Detergent 1
18
34
0
0
0.0
90
0.0
0
0
20
0
901*
901*
901*
901*
Increase
34
Upper
0
0
0
0
2 Tests
Calib
Calibration Type
Point
Weight
Logit-Log 4P
6
Span Point
0
4
Auto Calibration
Blank
Span
2 Point
Full
Time out
0
0
0
0
Change over
Lot
Bottle
SD Limit
Duplicate Limit
Sensitivity Limit
S1 ABS Limit
50
20
%
-99999
999999
-32000
320000
100
Abs
Range
Application Code
Report Name
Data Mode
Control Interval
Intrument Factor (Y=ax+b)
901*
CRP
On Board
*
a=
1.0
st1+0.001 st 6
st 1
st 6
Technical Limit**
Repeat Limit*
Expected Value
(Male)
100 Y
100 Y
(Female)
(Default)
Unit
b=
-99999
-99999
-99999
-99999
-99999
-99999
100 Y
100 Y
Male
mg/L
0
Qualitative
Cancel
(1)
(2)
(3)
(4)
(5)
999999
999999
999999
999999
999999
999999
Range 1
(6)
0
0
0
0
0
-+++
+++
++++
Others
<Standard>
Calibration Code*
(1)
013
0.0064
X C(cal)
(2)
013
0.0110
X C(cal)
(3)
013
0.0148
X C(cal)
(4)
013
0.0252
X C(cal)
(5)
013
0.1591
X C(cal)
(6)
013
0.4704
X C(cal)
Position*
13
13
13
13
13
13
Sample Volume
Diluted S. Vol
Diluted Volume
2.0
2.6
270
3.0
3.0
270
3.0
3.0
200
4.0
3.0
155
35
3.0
185
35
5.0
89
Concentration***
Rozcieńczalnik Nr kat. S2005
R1 – Nr kat. S2360
R3 – Nr kat. LX001
(113182-001)
[*]
Definiowane przez klienta.
[**]
Obliczone stężenie względne Std.1 i Std.6. Aby generowane były ostrzeżenia o próbkach, w których stężenie jest
niższe od stężenia w najniższym wzorcu, dolny limit techniczny musi być o 0,001 mg/L wyższy od najniższego
wzorca.
[***]
Kalibrator Nr kat. X0970. Stężenie wylicza się jako współczynnik pomnożony przez wartość kalibratora dla danej partii
(C(cal), podaną w mg/L na karcie parametrów analitycznych X0970). Liczba miejsc dziesiętnych dla Std.1 określa liczbę
cyfr po przecinku na wydruku. Zaleca się dwie cyfry po przecinku.
30 190.LX001.01/PL/KGR/22.09.04 str. 3/3
DakoCytomation Denmark A/S · Produktionsvej 42 · DK-2600 Glostrup · Denmark · Tel. +45 44 85 95 00 · Fax +45 44 85 95 95 · CVR No. 33 21 13 17