Opis procedury Wytyczne do oznaczania cystatyny C w

Cystatyna C
ABX Pentra 400
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
cystatyny C w surowicy/osoczu
w ABX Pentra 400
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia cystatyny C w próbkach materiału pochodzenia ludzkiego
z wykorzystaniem turbidymetrii, przy uŜyciu urządzenia ABX Pentra 400 (1, 2).
Zakres pomiarowy
Około 0,4–7,0 mg/L, w zaleŜności od konkretnej partii kalibratora. Zakres moŜe zostać poszerzony do 0,4–14 mg/L
w przypadku późniejszego rozcieńczenia.
Zakres normy
0,59–1,03 mg/L. Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z „Ustawieniami urządzenia” znajdującymi się na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor reakcyjny
Kalibrator
Kontrole
Rozcieńczalnik
Próbki
Ludzka surowica, osocze z dodatkiem heparyny lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 2 dni w temperaturze 2–8 °C.
Stabilne przez co najmniej 3 miesiące w temperaturze –20 °C.
ZamroŜone próbki naleŜy rozmraŜać w temperaturze 37 °C i dobrze wymiesza ć przed wykonaniem oznaczenia.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor (R1)
Bufor jest gotowy do uŜytku. W analizatorze stabilne do 12 tygodni.
Przeciwciało (R2)
Roztwór czynników immunologicznych jest gotowy do uŜytku.
Stabilność w temperaturze 2–8 °C: Zob. ulotkę informacyjną i datę waŜności na etykiecie.
W analizatorze stabilne do 12 tygodni.
Nr kat.
LX004
S2361
X7912
X7913
Nazwa
Cystatin C Immunoparticles (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 9
Cystatin C Calibrator (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Cystatin C Control Set (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
Wydajność: 1 mL roztworu czynników immunologicznych umoŜliwia dokonanie około 27 odczytów kuwet wzorców
lub próbek. Przy obliczaniu wymaganej objętości odczynnika naleŜy wziąć pod uwagę nieuŜyteczną objętość
buteleczki.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 8 tygodni po zmianie partii odczynnika lub w przypadku, gdy jakość wyników
spadnie poniŜej poziomu przyjętego w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli wydajność nie jest akceptowalna, naleŜy dokonać ponownej kalibracji. Zweryfikować odczynniki i procedurę.
Jeśli problem nie ustępuje, naleŜy skontaktować się z dostawcą urządzenia lub działem wsparcia technicznego
firmy Dako.
(122512-001)
D09554PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
ABX Pentra 400
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,30 w urządzeniu ABX Pentra 400 odpowiada stęŜeniu cystatyny C
ok. 7,0 mg/L.
Limit detekcji
Szacunkowy limit detekcji wynosi 0,10 mg/L.
Precyzja
Precyzję określono poprzez przebadanie dwóch próbek kontrolnych i surowic o dwóch róŜnych stęŜeniach
cystatyny C metodą analityczną ANOVA w 6 seriach. W kaŜdej serii wykonano nową kalibrację i po 6 oznaczeń.
Próbki
Cystatyna C
Wartość
średnia
(mg/L)
Odchylenie standardowe
(mg/L)
W serii
Między
seriami
Razem
Całk. wsp.
zmienności
(%)
n
Cystatin C Control 1,
Nr kat. X7913
4,27
0,023
0,067
0,071
1,7
36
Cystatin C Control 2,
Nr kat. X7913
1,21
0,021
0,024
0,031
2,6
36
Próbka surowicy
ludzkiej z niskim
stęŜeniem
1,46
0,017
0,017
0,024
1,7
36
Próbka surowicy
ludzkiej z wysokim
stęŜeniem
4,06
0,038
0,038
0,054
1,3
36
Dokładność
Przy stosowaniu kontroli Dako Cystatin C Control 1, nr kat. X7913 i Dako Cystatin C Control 2, nr kat. X7913,
moŜna oczekiwać odzyskania 90–110% cystatyny C.
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 0,4–7,0 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stęŜenia antygenu dla stęŜenia cystatyny poniŜej 11 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stęŜeniach do 10 g/L hemoglobiny, 600 mg/L bilirubiny, 16 g/L intralipidu
oraz 1200 IU/mL czynnika reumatoidalnego.
Porównanie metod
Oznaczania cystatyny C zgodnie z niniejszą procedurą porównano z innymi dostępnymi komercyjnie testami
turbidymetrycznymi. Dane dostępne są na Ŝyczenie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001; 39:1098-1109.
2. ABX Pentra 400 manual(s).
(122512-001)
D09554PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
ABX Pentra 400
Ustawienia urządzenia
Test Name
Cystatin C*
Channel
[√ ] Enable
990*
Code
Modified on
CYSC*
--
Local Code
LX004*
General Parameters
Characteristics
Sample Type
Number of Reagents
Serum / Plasma
Reagent 2
Reagent
Reagent Short Name
Reagent Number
CYSC*
990*
On Board Stability (days)
[ ] Casette
[ ] Pre-dilution
Diluent Name
Factor
Incubation time (in cycles)
--
Automatic Rerun
----
[√ ] Linearity (mg/L)
Low Limit
0.40
High Limit
7.00
Correlation
Slope
Intercept
1.00000 0.00000
[ ] Delta Check
Delta Check Validity
--
Absolute Variation
--
Relative Variation
--
Man/ Default
---
Woman
---
Child
---
Man/ Default
---
Woman
---
Child
---
Reference Range (mg/L)
[√ ] Post Dilution
[ ] Post Concentration
2.0
--
Result
Unit
Decimal Position
[ ] Manual Patient Validation
mg/L
2
[ ] Low Check
[ ] High check
Rerun range (mg/L)
[ ] Low check
[ ] High Check
Calibration Parameters
[√ ] Pre-dilution
Type
Main direct
Factor 1
18.0
Factor 5
2.0
Factor 2
9.0
Factor 6
1.0
Calibration
Calibration Mode
Level
Calibration Factor
Run(s)
[√ ] Dev_Rep (%)
[ ] Dev_C (%)
Calibrator used
Calibrator Diluent
PHYS
Factor 3
Factor 4
5.0
3.0
Factor 7
Factor 8
--Logit / Log4
6
-2
10.0
-X7912*
Checks
[ ] Reagent Limit Absorbance Check
Reagent Range low
Reagent Range High
[ ] Reagent Blank Limit Absorbance Check
Blank Range - Low limit
Blank Range - High limit
Validity
[√ ] On Request
[ ] Time Validity
Interval
Time Unit
---
-----
Factor Calibration
[ ] Low limit Check
[ ] High Limit Check
[ ] Relative variation check
----
Analysis parameters
[ ] Cleaner
Cleaner Solution
Wawelength (nm)
[ ] H20
[ ] Before
Primary Wawelength
Secondary Wawelength
[ ] After
Analysis Sequence
Cycle
Reagent Needle
1
R1
10
------
Volume (µL)
154.0
----
Sample Needle
SAMPLE
R2
---
Volume (µL)
2.0
34.0
---
550
700
H20 Vol (µL)
5.0
10.0
---
Blank
[ ] Reagent Blank
Diluent
-Mixing Speed
60
Calculation parameters
Correlation Factor
Slope
Intercept
1.00000
0.00000
Reaction Direction
[√ ] Reaction Direction Check
Reaction Direction
[ ] Sample Limit Check
Sample Limit (∆ O.D)
Sample Limit Cycle
---
[ ] Antigen Excess Check
Antigen Excess Limit (%)
Antigen Excess Point
[√ ] Definition Step A
Calculation Type
End point
First Reading
Cycle
11
Last Reading
Cycle
[ ] Reaction Limit Check
Reaction Limit Absorbance
Cycle
OD deviation check
[ ] Linear Regression
r2 threshold
SD
44
[ ] First point
First point threshold
Rozcieńczalnikt – Roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
[*]
Increase
---
---
[ ] Last point
SD Factor
R1 – Nr kat. S2361
R2 – Nr kat. LX004.
Definiowane przez klienta.
(122512-001)
D09554PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17