Opis procedury Wytyczne do oznaczania cystatyny C w surowicy

Cystatin C
Cobas c501
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
cystatyny C w surowicy/osoczu
w urządzeniu Cobas c501
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia cystatyny C w próbkach materiału pochodzenia ludzkiego
z wykorzystaniem turbidymetrii przy uŜyciu urządzenia Cobas c501 (1, 2).
Zakres pomiarowy
Około 0,4–7,5 mg/L, w zaleŜności od danej partii kalibratora. Zakres moŜe zostać zwiększony do 0,3–11 mg/L
w przypadku późniejszego zagęszczenia lub rozcieńczenia.
Zakres normy
0,59–1,03 mg/L. Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z opisem w punkcie „Ustawienia urządzenia” na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciała
Bufor reakcyjny
Kalibrator
Kontrole
Rozcieńczalnik
Próbki
Ludzka surowica, osocze z dodatkiem heparyny lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 2 dni w temperaturze 2–8°C.
Stabilne przez co najmniej 3 miesiące w temperaturze –20°C.
ZamroŜone próbki naleŜy rozmraŜać w temperaturze 37°C i dobrze wymiesza ć przed wykonaniem oznaczenia.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor reakcyjny (R1)
Bufor reakcyjny jest gotowy do uŜycia. Stabilność w urządzeniu wynosi 12 tygodni.
Przeciwciała (R2)
Roztwór cząstek immunologicznych jest gotowy do uŜycia.
Stabilność w temperaturze 2–8°C: Zob. ulotkę informacyjną i datę waŜności na etykiecie.
Stabilność w urządzeniu wynosi 12 tygodni.
Kod
LX004
S2361
X7912
X7913
Nazwa
Cystatin C Immunoparticles (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 9
Cystatin C Calibrator (standaryzowany ERM-DA471/IFCC)
Cystatin C Control Set (standaryzowany ERM-DA471/IFCC)
Roztwór NaCl, 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
Wydajność: 1 mL roztworu czynników immunologicznych umoŜliwia wykonanie około 29 odczytów kuwet roztworów
wzorcowych lub próbek. Przy obliczaniu wymaganej objętości odczynnika naleŜy wziąć pod uwagę objętość martwą
butelki z odczynnikiem.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 8 tygodni, kaŜdorazowo po zmianie partii odczynnika lub w przypadku, gdy wyniki
kontroli jakości przekroczą zakres przyjęty w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli jakość oznaczania jest nieakceptowalna, naleŜy dokonać ponownej kalibracji. NaleŜy zweryfikować odczynniki i
procedurę. Jeśli problem nie ustępuje, naleŜy skontaktować się z dostawcą urządzenia lub obsługą techniczną
firmy Dako.
(124522-001)
D18965PL_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Dania | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | Nr CVR 33 21 13 17
Cystatin C
Cobas c501
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) wynosząca około 0,36 w urządzeniu Cobas c501 odpowiada stęŜeniu cystatyny C
wynoszącemu ok. 7,0 mg/L.
Granica wykrywalności
Szacunkowa granica wykrywalności wynosi 0,02 mg/L.
Precyzja
Precyzję określono przy uŜyciu dwóch kontroli i surowic o dwóch róŜnych stęŜeniach cystatyny C metodą analityczną
ANOVA w 6 seriach z nową kalibracją i 6 oznaczeniach w kaŜdej z serii.
Cystatin C
Wartość
średnia
(mg/L)
Odchylenie standardowe
(mg/L)
Razem
Całk. wsp.
zmienności
(CV) (%)
n
0,039
0,057
1,4
36
0,015
0,017
0,023
2,1
36
1,01
0,010
0,013
0,016
1,6
36
6,08
0,070
0,075
0,102
1,7
36
W serii
Między
seriami
4,18
0,042
1,06
Próbka z niskim
stęŜeniem surowicy
ludzkiej
Próbka z wysokim
stęŜeniem surowicy
ludzkiej
Próbki
Kontrola Cystatin C
Control 1,
Nr kat. X7913
Kontrola Cystatin C
Control 2,
Nr kat. X7913
Dokładność
Przy zastosowaniu kontroli Dako Cystatin C Control 1, nr kat. X7913 i Dako Cystatin C Control 2, nr kat. X7913,
oczekiwany uzysk cystatyny C to 90–110%.
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 0,4–7,0 mg/L.
Zakres bezpieczeństwa
Nie stwierdzono nadmiaru antygenu dla stęŜenia cystatyny C poniŜej 20 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stęŜeniach do 10 g/L hemoglobiny, 600 mg/L bilirubiny, 16 g/L intralipidu i 1200 IU/mL
czynnika reumatoidalnego.
Porównanie metod
Oznaczenia cystatyny C zgodnie z niniejszym opisem procedury porównano z innymi komercyjnymi testami
turbidymetrycznymi. Dane dostępne są na Ŝyczenie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination of
human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab Med
2001; 39:1098-1109.
2. Instrukcje obsługi urządzenia Cobas c501.
(124522-001)
D18965PL_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Dania | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | Nr CVR 33 21 13 17
Cystatin C
Cobas c501
Ustawienia urządzenia
Analyze
2 Point End
Assay/Time/Point
Wavelength (2nd/Primary)
10
700
546
13
Sample Volume
0
2
0
0
Code
Decrease
15
8
75
Expiration date
Increase
3
0
0
Reagent volumen
Water
Diluent
952*
Linearity Limit
0%
0%
0
0
Abs. Limit
0
0
LOW
Casette Type A
R1
154
0
R2
34
R3
0
0
Stirring level
M1
stirring
Bottle settings
a
R1
225
34.6
20
b
R2
225
7.7
0
0
c
0
0,0
outside
0
Inactive
Cancel
0
Increase
Detergent 1
Stirring settings
99
0
0
32000
Cell Detergent
XXXX*
1
Prozone Limit
UP
0
Casette configuration
Normal
Diluent
Calibration
46
stirring
Calibration Type
2
M2
M3
stirring
stirring
Spline
Auto Calibration
Point
6
Timeout
Span
4
Casette
Weight
0
Cancel
0
Update Type
0
none
0
Day
Change over
casette
Cancel
QC Violation
Range
SD Limit
999
Duplicate Limit
10
Blank
Method
100 Abs
Rule
1s
Sensitivity Limit
-99999
99999
Control 1
None
S1 Abs. Limit
-32000
32000
Control 2
None
Control3
None
Application Code
901*
Expected Value
Unit
mg/L
Male
Report Name
Cystatin C
Active
Dato Mode
99
Year
-99999
999999
100
Year
-99999
999999
-99999
999999
√ Automatic Rerun
Female
Technical Limit
Std 1
+0.01
Std 6
99
Year
-99999
999999
Repeat Limit
-99999
99999
100
Year
-99999
999999
-99999
999999
Control interval Time
0
Automatic Qc On board Dtability
1
□ Qualitative
1
Default
0
L
0
0
0
Sex
О Male
2
0
H
3
0
I
4
0
Range
5
0
О Range 1
О Female
О Range 2
О Range 3
6
Standard
Others
Calibration Code*
Concentration**
Rack No. - Pos.*
Sample volume
Diluted S. Volume
Diluent Volume
1
Cal mg/L
x 0.0549
1
1
1
1
1
Cal mg/L Cal mg/L Cal mg/L Cal mg/L Cal mg/L
x 0.1071 x 0.1923 x 0.3889 x 0.7000
x 1.0000
S00009-1
9.0
2.0
155.0
S0009-2 S0009-2
18.0
25.0
2.0
2.0
150.0
105.0
S0009-2
35.0
3.0
100.0
Rozcieńczalnik — roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
R2 — przeciwciało, nr kat. LX004.
S0009-2
35.0
5.0
90.0
S0009-2
2.0
0
0
R1 — bufor reakcyjny, nr kat. S2361
[*]
Definiowane przez klienta.
[**]
Obliczone stęŜenie Std.1 i Std.6. Aby generowane były ostrzeŜenia o próbkach, w których stęŜenie jest niŜsze od stęŜenia
najniŜszego roztworu wzorcowego, dolna granica musi być o 0,01 mg/L wyŜsza od stęŜenia najniŜszego roztworu wzorcowego.
[***]
Kalibrator, nr kat. X7912. StęŜenie wylicza się jako współczynnik pomnoŜony przez wartość kalibratora dla danej partii (podaną w
mg/L na karcie parametrów analitycznych X7912). Liczba miejsc dziesiętnych dla Std.1 określa liczbę cyfr po przecinku na wydruku.
Zaleca się dwie cyfry po przecinku.
(124522-001)
D18965PL_001_LX004.01/PHC/2013.10 s.3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Dania | Tel. +45 44 85 95 00 | Faks +45 44 85 95 95 | Nr CVR 33 21 13 17