Opis procedury Wytyczne do oznaczania cystatyny C w

Cystatyna C
Architect i8200
Opis procedury
Wytyczne do oznaczania
cystatyny C w surowicy/osoczu
w urządzeniu Architect i8200
Informacje ogólne
Przeznaczenie
Opis procedury dotyczy ilościowego oznaczenia cystatyny C w próbkach materiału pochodzenia ludzkiego
z wykorzystaniem turbidymetrii, przy uŜyciu urządzenia Architect i8200 (1, 2).
Zakres pomiarowy
Około 0,4–7,0 mg/L, w zaleŜności od konkretnej partii kalibratora. Zakres moŜe zostać poszerzony do 0,4–14 mg/L
w przypadku późniejszego rozcieńczenia.
Zakres normy
0,59–1,03 mg/L. Zaleca się wyznaczenie zakresu normy dla lokalnej populacji.
Ustawienia urządzenia
Urządzenie programuje się zgodnie z „Ustawieniami urządzenia” znajdującymi się na stronie 3.
Odczynniki
Przeciwciało
Bufor reakcyjny
Kalibrator
Kontrole
Rozcieńczalnik
Próbki
Ludzka surowica, osocze z dodatkiem heparyny lub osocze z EDTA.
Stabilne przez 2 dni w temperaturze 2–8 °C.
Stabilne przez co najmniej 3 miesiące w temperaturze –20 °C.
ZamroŜone próbki naleŜy rozmraŜać w temperaturze 37 °C i dobrze wymiesza ć przed wykonaniem oznaczenia.
Kalibrator
Wzorce rozcieńczane są automatycznie przez urządzenie.
Bufor (R1)
Bufor jest gotowy do uŜytku. W analizatorze stabilne do 12 tygodni.
Przeciwciało (R2)
Roztwór czynników immunologicznych jest gotowy do uŜytku.
Stabilność w temperaturze 2–8 °C: Zob. ulotkę informacyjną i datę waŜności na etykiecie.
W analizatorze stabilne do 12 tygodni.
Nr kat.
LX004
S2361
X7912
X7913
Nazwa
Cystatin C Immunoparticles (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Dako Turbidimetry/Nephelometry Reaction Buffer 9
Cystatin C Calibrator (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Cystatin C Control Set (standaryzowane ERM-DA471/IFCC)
Roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
Wydajność: 1 mL roztworu czynników immunologicznych umoŜliwia dokonanie około 27 odczytów kuwet wzorców
lub próbek. Przy obliczaniu wymaganej objętości odczynnika naleŜy wziąć pod uwagę nieuŜyteczną objętość
buteleczki.
Stabilność kalibracji
Zaleca się powtarzanie kalibracji co 8 tygodni po zmianie partii odczynnika lub w przypadku, gdy jakość wyników
spadnie poniŜej poziomu przyjętego w danym laboratorium.
Rozwiązywanie problemów
Jeśli wydajność nie jest akceptowalna, naleŜy dokonać ponownej kalibracji. Zweryfikować odczynniki i procedurę.
Jeśli problem nie ustępuje, naleŜy skontaktować się z dostawcą urządzenia lub działem wsparcia technicznego
firmy Dako.
(122529-001)
D09555PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 1/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
Architect i8200
Dane dotyczące działania
Czułość
Wartość gęstości optycznej (OD) około 0,35 w urządzeniu Architect i8200 odpowiada stęŜeniu cystatyny C
ok. 7,0 mg/L.
Limit detekcji
Szacunkowy limit detekcji wynosi 0,04 mg/L.
Precyzja
Precyzję określono poprzez przebadanie dwóch próbek kontrolnych i surowic o dwóch róŜnych stęŜeniach
cystatyny C metodą analityczną ANOVA w 3 seriach. W kaŜdej serii wykonano nową kalibrację i po 6 oznaczeń.
Próbki
Cystatyna C
Wartość
średnia
(mg/L)
Odchylenie standardowe
(mg/L)
W serii
Między
seriami
Razem
Całk. wsp.
zmienności
(%)
n
Cystatin C Control 1,
Nr kat. X7913
4,27
0,022
0,019
0,029
0,7
18
Cystatin C Control 2,
Nr kat. X7913
1,20
0,009
0,011
0,014
1,2
18
Próbka surowicy
ludzkiej z niskim
stęŜeniem
1,66
0,010
0,014
0,017
1,0
18
Próbka surowicy
ludzkiej z wysokim
stęŜeniem
4,05
0,015
0,034
0,037
0,9
18
Dokładność
Przy stosowaniu kontroli Dako Cystatin C Control 1, nr kat. X7913 i Dako Cystatin C Control 2, nr kat. X7913,
moŜna oczekiwać odzyskania 90–110% cystatyny C.
Liniowość
Test jest liniowy w zakresie 0,4–7,0 mg/L.
Bezpieczny zakres
Nie stwierdzono nadmiernego stęŜenia antygenu dla stęŜenia cystatyny poniŜej 11,6 mg/L.
Zakłócenia
Nie stwierdzono zakłóceń przy stęŜeniach do 10 g/L hemoglobiny, 600 mg/L bilirubiny, 16 g/L intralipidu oraz
1200 IU/mL czynnika reumatoidalnego.
Porównanie metod
Oznaczania cystatyny C zgodnie z niniejszą procedurą porównano z innymi dostępnymi komercyjnie testami
turbidymetrycznymi. Dane dostępne są na Ŝyczenie.
Piśmiennictwo
1. Blirup-Jensen S. Protein Standardization III: Method optimization: Basic principles for quantitative determination
of human serum proteins on automated instruments based on turbidimetry or nephelometry. Clin Chem Lab
Med 2001; 39:1098-1109.
2. Archtect i8200 manual(s).
(122529-001)
D09555PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 2/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17
Cystatyna C
Architect i8200
Ustawienia urządzenia
General parameters
Name: CystC*
Assay number: *
Assay version: 1
Assay type:
Assay availability:
Cal version:
Photometric
Enabled
1
Reaction definition
Reaction mode:
Primary wavelength:
Secondary wavelength:
Last read required:
Absorbance range:
End up
548
700
33
0.0000 - 0.0000
Main read time:
Flex read time:
Color correction read time:
Blank read time:
27 - 28
0- 0
17 - 17
R2 reagent volume:
R2 water volume:
R2 dispense mode:
Diluent dispense mode:
34
0
Type 0
Type 0
Sample blank type: Self
Blank assay:
Reagent / Sample
Reagent:
R1 reagent volume:
R1 water volume:
R1 dispense mode:
Diluent name:
LX004*
154
0
Type 0
Saline
Dilution name Sample volume Diluted sample volume
Normal
2.0
0.0
Dec
25.0
2.0
Diluent volume
0
75
Water volume
0
0
Dilution factor
1 : 1.00
1 : 4.00
Validity checks
Reaction check type: None
Read time A range:
Calculation limit:
Read time B range:
Minimum absorbance:
Rate linearity %:
Maximum absorbance variation: 0.0000
Calibration parameters
Calibration method:
Use cal factor from:
Full interval hours:
Adjustment type:
Expected cal factor:
Expected cal factor tolerance %:
Spline
0
None
0.00
0
Span:
Maximum curve fit: 0.00
Calibrator set name: X7912*
Cal level
Water
*
*
*
*
*
*
Concentration
0.00
**
**
**
**
**
**
Sample volume
2.0
9.0
18.0
25.0
35.0
35.0
2.0
Factor:
Adjustment interval hours:
Adjustment level:
Default ordering type:
Blank absorbance range:
Span absorbance range:
0
Full
0.0000 - 0.0000
0.00 - 0.00
Replicates:
2
Diluted sample volume Diluent volume Water volume
0
0.0
0
0
2.0
155
0
2.0
150
0
2.0
105
0
3.0
100
0
5.0
90
0
0.0
0
Results parameters
Linearity range: 0.40 - 7.00
Flag range specifications:
Result units
Result concentration units: mg/L
Result decimal places: 2
Rozcieńczalnikt – Roztwór NaCl 154 mmol/L (0,9%, stęŜenie wagowo-objętościowe)
Correlation factor:
Intercept:
1.0000
0.0000
R1 – Nr kat. S2361
[*]
Definiowane przez klienta.
[**]
Wartość kalibratora dla danej partii (C(cal), podaną w mg/L na karcie parametrów analitycznych X7912).
(122529-001)
R2 – Nr kat. LX004.
D09555PL_001_LX004.01/PHC/2012.05 str. 3/3
Dako Denmark A/S | Produktionsvej 42 | DK-2600 Glostrup | Denmark | Tel. +45 44 85 95 00 | Fax +45 44 85 95 95 | CVR No. 33 21 13 17