BV Test

BV Test
Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase)
Szybki test (roztwór) do wykrywania waginozy bakteryjnej w wymazie z pochwy
WSTĘP
Zaburzenia mikroflory pochwy określane terminem waginoza bakteryjna (ang. Bacterial Vaginosis – BV) lub
bakteryjne zakażenie pochwy polegają na zmniejszaniu się liczby bakterii z rodzaju Lactobacillus, zastępowanych
głównie przez drobnoustroje beztlenowe takie jak Gardnerella vaginalis, Gardneralla mobiluncus czy Mycoplasma
hominis. Waginoza bakteryjna stanowi ok. 60% wszystkich infekcji w obrębie pochwy i sromu. Podczas BV
dochodzi do zaburzenia równowagi mikroflory pochwy; ilość bakterii beztlenowych wzrasta 10–100-krotnie.
Drobnoustroje te wytwarzają różne enzymy (m.in. sialidazę), kwasy organiczne, toksyny, które mogą upośledzać
czynności układu immunologicznego związanego z błonami celulozowymi narządów płciowych i np. u kobiet
ciężarnych powodować przedwczesny poród.
ZASADA DZIAŁANIA TESTU
BV Test (Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase) jest szybkim testem przeznaczonym do wykrywania
podwyższonej aktywności sialidazy w wymazie z pochwy. W teście zastosowano specjalny substrat sialidazy, który
jest hydrolizowany przez specyficzną sialidazę obecną w wydzielinie z pochwy kobiet z waginozą bakteryjną.
Zmiana barwy roztworu na niebieską lub zieloną świadczy o dodatnim wyniku testu.
SKŁAD I PRZECHOWYWANIE ZESTAWU
Każdy zestaw zawiera wyposażenie niezbędne do wykonania 10 testów:
1.
2.
3.
4.
Buteleczka testowa BV, zawiera substrat specyficznej sialidazy
BV developer, zawiera wodorotlenek sodu i octan potasu
Karty wyników
Instrukcja wykonania oznaczenia
10 szt.
1 szt.
1 bloczek
1 szt.
Zestaw BV Test należy przechowywać w temperaturze 4  30C do daty ważności nadrukowanej na opakowaniu.
Składniki zestawu należy chronić przed działaniem gazów żrących, bezpośrednim działaniem światła słonecznego,
wilgoci lub ciepła. Nie należy używać odczynników, które mają widoczne oznaki zanieczyszczenia
mikrobiologicznego, zawierają strąty lub zostało uszkodzone opakowanie.
ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Test służy tylko do użytku profesjonalnego do diagnostyki in vitro.
Test jest przeznaczony tylko do jednorazowego użycia.
Nie używać testu po upływie daty ważności.
Nie mieszać odczynników różnych serii.
Używać tylko sterylnych wymazówek z końcówką z bawełny.
Nie jeść, nie pić i nie palić w pomieszczeniach, w których wykonywane są oznaczenia.
Podczas oznaczeń używać odzieży ochronnej, np. fartucha laboratoryjnego, jednorazowych rękawiczek i
ochrony oczu.
8. Odczynnik BV developer jest w nieznacznym stopniu żrący. Należy unikać kontaktu tego roztworu z oczami i
błonami śluzowymi. W przypadku zanieczyszczenia, miejsce kontaktu przemyć dokładnie wodą.
9. W każdym przypadku należy stosować się do wytycznych i standardów dotyczących stosowania materiałów
zakaźnych i odczynników chemicznych.
10. Zużyte materiały usunąć zgodnie z zasadami usuwania odpadów medycznych.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
WYKONANIE TESTU
Przed wykonaniem oznaczenia temperaturę buteleczek testowych, próbek, odczynników i/lub kontroli doprowadzić
do temperatury pokojowej.
POBRANIE I PRZYGOTOWANIE PRÓBKI
1. Delikatnie umieścić wziernik w pochwie.
2. Pobrać wymaz z pochwy przy pomocy wymazówki z końcówką z bawełny. Wymaz pobierać ze ścianek i z
tylnego sklepienia pochwy. Pobrać maksymalnie dużo materiału do badania.
Zwrócić uwagę, aby nie dotknąć wymazówką okolic cewki moczowej. Nie pobierać wymazu w czasie miesiączki
lub jeśli występuje zagrożenie poronienia. Nie pobierać wymazu, jeśli w ciągu ostatnich 24 godzin kobieta
stosowała jakiekolwiek dopochwowe preparaty farmaceutyczne lub kosmetyczne.
3. Oznaczenie powinno być przeprowadzone natychmiast po pobraniu wymazu.
Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase), Blue Cross
1z3
WYKONANIE OZNACZENIA
1. Otworzyć buteleczkę testową BV.
2. Następnie umieścić w niej wymazówkę z pobranym materiałem i delikatnie mieszać w roztworze. Podczas tego
mieszania dociskać końcówką wymazówki do ścianek probówki tak, aby wycisnąć z niej jak najwięcej płynu.
Usunąć wymazówkę zgodnie z zasadami usuwania materiałów potencjalnie zakaźnych.
3. Inkubować buteleczkę testową BV przez 10 minut w temperaturze 37ºC. Alternatywnie można inkubować w
temperaturze pokojowej przez 25 - 30 minut.
4. Usunąć zamknięcie z BV developera i dodać 1 – 2 krople do buteleczki testowej BV i delikatnie wymieszać.
5. Odczytać wynik w czasie 3 minut po dodaniu roztworu BV developer.
INTERPRETACJA WYNIKÓW TESTU
Wynik dodatni:
Pojawienie się barwy niebieskiej lub zielonej.
Wynik ujemny:
Obecność barwy żółtej.
KONTROLA JAKOŚCI
Dobra praktyka laboratoryjna zaleca używanie materiałów kontrolnych dla zapewnienia prawidłowych wyników testu.
Poprawność przeprowadzenia oznaczenia niniejszym testem należy sprawdzić na kontroli dodatniej i ujemnej, z
którymi należy postępować tak samo jak z badanymi próbkami.
CHARAKTERYSTYKA TESTU
1. Czułość analityczna
Czułość analityczna testu BV Test (Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase) wynosi 7,8 U/ml. Trzy serie testu
BV zostały przebadane na różnych stężeniach referencyjnych: 3,8 U/ml; 7,6 U/ml; 7,8 U/ml; 8,0 U/ml i 16 U/ml. Dla
każdego stężenia wykonano po 10 oznaczeń. Czułość analityczna została określona dla stężenia, dla którego
uzyskano zgodność 10 powtórek.
Stężenie sialidazy
[U/ml]
3,8
7,6
7,8
8,0
16
Seria 1
(+/-)
0/10
0/10
10/0
10/0
10/0
Seria 2
(+/-)
0/10
0/10
10/0
10/0
10/0
Seria 3
(+/-)
0/10
0/10
10/0
10/0
10/0
2. Swoistość analityczna
BV Test (Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase) jest specyficzny w swoim klinicznym zastosowaniu.
Następujące substancje dodane zarówno do ujemnych jak i do dodatnich próbek nie miały wpływu na wynik testu:
Substancja dodana
Esteraza leukocytów
45U
Peroksydaza
45U
Seria 1
(+/-)
Sialidaza 3,8 U/ml
Seria 2
Seria 3
(+/-)
(+/-)
Seria 1
(+/-)
Sialidaza 8,0 U/ml
Seria 2
Seria 3
(+/-)
(+/-)
0/10
0/10
0/10
10/0
10/0
10/0
0/10
0/10
0/10
10/0
10/0
10/0
3. Czułość i swoistość diagnostyczna, dokładność kliniczna
BV Test (Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase) poprawnie identyfikuje panel próbek. Wykonano badania
porównawcze równolegle z innym powszechnie dostępnym testem wykrywającym waginozę bakteryjną. Wyniki tych
badań przedstawiono w tabeli poniżej:
BV Test
BV Test
Suma
Test referencyjny
(wyniki dodatnie)
90 (a)
0 (c)
90
Test referencyjny
(wyniki ujemne)
3 (b)
117 (d)
120
Suma
93
117
210
Czułość diagnostyczna (zgodność w. dodatnich) = a / (a + c) = 90/90 = 100%
Swoistość diagnostyczna (zgodność w. ujemnych) = d / (b + d) = 117/120 = 97,5%
Zgodność całkowita = (a + d) / (a + b + c + d) = (90 + 117) / 210 = 98,6%
4. Powtarzalność i odtwarzalność
Powtarzalność BV Testu (Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase) przebadano na 30 testach z 3-ch różnych
serii używając roztworów sialidazy o stężeniach: 0 U/ml i 8 U/ml. Wyniki tych badań przedstawiono w tabeli poniżej:
Stężenie sialidazy
[U/ml]
0
8
Seria 1
dodatni ujemny
0
10
10
0
Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase), Blue Cross
Seria 2
dodatni ujemny
0
10
10
0
Seria 3
dodatni ujemny
0
10
10
0
Precyzja
100%
100%
2z3
OGRANICZENIA
1. Wyniki dodatnie otrzymane niniejszym testem powinny być potwierdzone bardziej specyficznym badaniem.
Ostateczna diagnoza powinna być postawiona w oparciu o informacje kliniczne o pacjencie.
2. Wynik niniejszego testu nie może być stosowany jako jedyne kryterium do diagnozy waginozy bakteryjnej.
Ujemny wynik testu nie wyklucza możliwości zakażenia.
3. Unikać wielokrotnego zamrażania i rozmrażania odczynników i próbek.
4. Niewłaściwe pobranie próbki lub niewłaściwy sposób wykonania mogą mieć wpływ na dokładność wyniku testu.
LITERATURA
1. U.S.Department of Heath and Human services. Biosafety in microbiological and Biomedical Laboratories. HHS
Publication (NIH) 88-8395. Washington: U.S. Govemment Printing Office, May 1988.
2. World Health Organization. Laboratory Biosafety manual. Geneva. World Health Organization, 1983.
3. National Committee for clinical laboratory Standards. Protection of Laboratory Workers from Infectious tissue:
Tentative Guideline. NCCLS Document M29-T. Villanova, PA: NCCLS, 1989.
4. Thomason JL, Gelbart SM, Anderson RJ, Walt AK, Osypowski PJ, Broekhuizen FF (1990). “Statistical evaluation
of diagnostic critheria for bacterial vaginosis”. Am. J. Obstet. Gynecol. 162 (1): 155-60.
5. Bradshaw CS, Morton AN, Hocking J, et al. High recurrence ratek of bacterial vaginosis over the course of 12
months after oral metronidazole therapy and factors associated with recurrence. J. Infect. Dis. 193 (11): 147886, 2006.
6. Ison, CA; Hay, PE.”Validation of a simplifed grading of Gram stained vaginal smears for use in genitourinary
medicine clinics”. Sex Transm. Infect. 78 (6): 413-5, 2002.
7. Jorgelina Smayevsky, Liliana Fernández Canigia, Alejandra Lanza, Hebe Bianchini. Vaginal Microflora
Associeted With Bacterial Vaginosis in Nonpregnant Women: Reliability of Sialidase Detection. Infectious
Diseases in Obsterics and Gynecology, 2001.
15.07.2014 / BC-421411**-1.0-BV 2011-2-25
ZASTOSOWANE SYMBOLE:
Tylko do diagnostyki in vitro
Tylko do jednokrotnego użycia
Zawartość
Data ważności
Nr serii
Temperatura przechowywania
Wytwórca
Zapoznaj się z instrukcją użycia
Wytwórca: Blue Cross Bio-Medical (Beijing) Co., Ltd , Beiqijia Industry Zone, Changping District, Beijing, P.R. China 102209
Autoryzowany przedstawiciel: Shanghai International Holding Corp. GmbH, Eiffestrasse 80, 20537 Hamburg Germany
Importer: Hydrex Diagnostics Sp. z o.o. Sp. k., ul. T. Zana 4, 04-313 Warszawa, tel./fax: 22 673 13 60, 61
Bacterial Vaginosis Rapid Test Kit (Sialidase), Blue Cross
3z3