Labowe „know-how”: podstawowe bufory

Labowe „know-how”: podstawowe
bufory
Drodzy Towarzysze doli i niedoli laboratoryjnej! Zapewne wielu z Was było
kiedyś w potrzebie przygotowania podstawowych, wykorzystywanych na co
dzień roztworów. Jeśli nie ufacie przepisom zaczerpniętym z sieci,
sięgnijcie po te sprawdzone wielokrotnie w praktyce. Poniżej kilka
przykładów podstawowych buforów (podane odważki oraz stężenia
końcowe poszczególnych związków), które możecie w każdej chwili
sporządzić sami.
[stężenie końcowe]
Bufor AP (na 100 ml):
10 ml 1M Tris-HCl pH 9.5
2 ml 5M NaCl
[100 mM]
[100 mM]
0,5 ml 1M MgCl2 [5mM]
(zalecana sterylizacja filtrowa)
Bufor do transferu (western blot , na 1 L):
3,03 g Tris-HCl
[19,2 mM]
14,4 g glicyny
[288 mM]
200 ml metanolu
[20%]
10x PBS (na 1L):
80 g NaCl
[1,37 M]
2 g KH2PO4 [14,7 mM]
11,1 g Na2HPO4 [78,1 mM]
2 g KCl
[26,8 mM]
(jeśli celem jest użycie buforu w hodowlach komórkowych, czy tkankowych
konieczna jest jego sterylizacja przez autoklawowanie)
20x SB (na 1l):
45 g kwasu borowego
8 g NaOH
50x TAE (na 1 L):
242 g Tris’u
57,1 ml kwasu octowego (100%)
100 ml 0,5 M EDTA pH 8,5
Uwaga! Przy rozpuszczaniu EDTA w wodzie należy ustalić pH roztworu – w
przeciwnym razie EDTA się nie rozpuści.
10x TBE (na 1 L):
108 g Tris-HCl
55 g kwasu borowego
40 ml EDTA (pH 8,5)
Uwaga! Przy rozpuszczaniu EDTA w wodzie należy ustalić pH roztworu – w
przeciwnym razie EDTA się nie rozpuści.
10x TE (na 1 L):
100 ml 1M Tris-HCl pH 7.5
40 ml 250 mM EDTA
[100 mM]
[10 mM]
(zalecana sterylizacja filtrowa)
10x TTBS
100 ml 10x PBS
5 ml 10% Tween20
Przygotowanie dobrego buforu jest proste.
AM
Data publikacji: 04.11.2011r.