Romku, fragmenty napisane różowa czcionką wymagają

ASO LATEX
Test aglutynacyjny do jakościowego i półilościowego
oznaczania antystreptolizyn-O w surowicy ludzkiej.
Ulotka informacyjna dla zestawów o nr kat.: 96.640
ZASADA
W teście ASO LATEX zastosowano zawiesinę cząstek lateksu
polistyrenowego opłaszczonych stabilizowaną streptolizyną-O.
W reakcji z surowicą zawierającą przeciwciała przeciwko
Streptolizynie-O zachodzi aglutynacja. Czułość odczynnika
lateksowego zastała tak dobrana aby dawał on aglutynację dla
surowic, których miano antystreptolizyn jest równe lub wyższe
od 200 IU/ml. Wartości powyżej tego poziomu uznano za
wskazujące na infekcję paciorkowcem β-hemolitycznym.
STRESZCZENIE
Immunologiczne
oznaczenie
specyficznych
przeciwciał
skierowanych przeciw produktom przemiany paciorkowców
dostarcza ważnych informacji o poprzedzającej infekcji
paciorkowcami. Przeciwciała powstają zarówno przeciw samym
zarazkom jak również przeciw ich produktom przemiany materii.
Przykładem jest przeciwciało przeciw streptolizynie O,
enzymowi produkowanemu przez β-hemolityczne paciorkowce
grupy A. Oznaczanie streptolizyny O przeprowadza się w
przypadku wystąpienia toksycznych lub uczuleniowych powikłań
takich jak gorączka reumatyczna (ważniejsze symptomy:
zapalenie mięśnia sercowego, zapalenie stawów, chorea minor,
subcitaneous
nodules,
erythema
annulare)
oraz
popaciorkowcowe ostre zapalenie kłębuszków nerkowych.
Do oznaczania Antystreptolizyny O można wykorzystać różne
metody takie jak aglutynacja lateksowa, reakcja zahamowania
hemolizy. Niniejszy test ASO bazuje na zasadzie
immunoaglutynacji. Cząsteczki lateksu zawarte w teście
wzmacniają reakcję.
ODCZYNNIKI
R1 zawiesina lateksu
Cząsteczki lateksu opłaszczone anty-ASO
Konserwant
R2 kontrola dodatnia
Roztwór białka zaw. antystreptolizynę O powyżej 200 lU/ml
Konserwant
R3 kontrola ujemna
Roztwór białka zaw. antystreptolizynę O poniżej 200 lU/ml
Konserwant
PRZECHOWYWANIE I STABILNOŚĆ
Odczynniki i surowice kontrolne są stabilne aż do daty ważności.
Zestaw testowy powinien być przechowywany w chłodni (2-8°C).
NIE ZAMRAZAĆ ! Nie używać po upływie terminu ważności.
MATERIAŁ BADANY
Do badania używać czystych i świeżych próbek surowicy
uzyskanych przez odwirowanie krwi. Surowice lipemiczne,
hemolityczne lub zanieczyszczone (np. drobnoustrojami) może
spowodować fałszywe wyniki. Jeżeli test nie może zostać
wykonany niezwłocznie po pobraniu próbki, przechowywać materiał
badany w temperaturze 2-8°C do 3 dni. W razie potrzeby dłuższego
przechowywania, materiał zamrozić (-20°C). Materiał zawierający
osad odwirować przed przeprowadzeniem testu.
OGRANICZENIA
•
Stosować wyłącznie do profesjonalnej diagnostyki in vitro. Nie
używać po upływie terminu ważności.
•
Nie jeść, nie pić i nie palić w strefie gdzie operuje się
materiałem badanym lub testami.
•
Traktować wszystkie próbki jako materiał zakaźny.
Przestrzegać ustalonych środków ostrożności przeciwko
zagrożeniu mikrobiologicznemu przez cały czas wykonywania
testu. Postępować zgodnie ze standardowymi procedurami
właściwego usuwania materiału zakaźnego.
•
Zanieczyszczenie surowicy oraz dłuższy czas reakcji testu niż
3 min może powodować fałszywie pozytywne wyniki.
ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Odczynniki zawierające azydek sodu. W razie kontaktu ze skórą
płukać dużą ilością wody. Odczynniki mogą reagować z miedzią i
ołowiem tworząc silnie wybuchowe azydki metali. Zużyte
odczynniki rozcieńczać przez spłukiwanie ich dużą ilością wody w
celu uniknięcia tworzenia się azydków w kanalizacji. Zarówno
dodatnia jak i ujemna kontrola została przygotowana z ludzkiej
surowicy, przebadanej w kierunku HBsAg i HIV przy użyciu metod
licencjonowanych przez FDA. W wyniku tych badań nie
stwierdzono infekcji. Niemniej, żadna z metod nie może całkowicie
wykluczyć obecności infekcji. Dlatego też każdy materiał
biologiczny powinien być traktowany jako potencjalnie zakaźny.
MATERIAŁY
Materiały dostarczone
•
Odczynnik lateksowy
•
Kontrola ujemna i dodatnia
•
Płytka szklana lub zestaw jednorazowych płytek z sześcioma
polami reakcyjnymi
•
Mieszadełka
•
Ulotka
Materiały potrzebne, lecz nie dostarczone
•
Pojemnik na materiał
•
Minutnik
•
Pipeta
WYKONANIE TESTU
Przed przystąpieniem do testu doprowadzić odczynniki, i
materiał badany do temperatury pokojowej (15-30°C).
Oznaczenie jakościowe
1. Umieścić po 1 kropli (40µl) każdej z surowic badanych na
kolejne pola testowe na płytce reakcyjnej
2. Na oznaczone pola testowe nanieść po jednej kropli (40µl)
surowicy kontrolnej: dodatniej / ujemnej.
3. Delikatnie wymieszać zawiesinę ASO Latex. Nie wstrząsać,
unikać powstania piany. Napełnić zakraplacz i dodać po 1
kropli (40µl) zawiesiny do każdej z surowic na płytce
reakcyjnej.
4. Używając załączonych mieszalników wymieszać zawiesinę z
surowicą na każdym z pól i rozprowadzić płyn na całą
powierzchnię pola testowego.
5. Mieszać płyn na płytce testowej 2 min. ręcznie (przez
powolne przechylanie płytki) lub przy użyciu wytrząsarki
rotacyjnej przy prędkości 80-100 obr/min.
6. Po 2 min. mieszania bezzwłocznie ocenić wzrokowo
powierzchnię każdego pola w bezpośrednim świetle.
Oznaczenie ilościowe
1. Używając roztwór soli fizjologicznej przygotować kolejne
rozcieńczenia surowicy badanej 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 lub wg
własnego modelu. Nie rozcieńczać surowic kontrolnych!
2. Delikatnie wymieszać zawiesinę ASO Latex. Nie wstrząsać,
unikać powstania piany. Napełnić zakraplacz i dodać po 1
kropli zawiesiny do każdej z surowic na płytce reakcyjnej.
3. Kolejne rozcieńczenia badać wg metody opisanej w p.
Oznaczenie jakościowe.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
(proszę odnieść treść do ilustracji poniżej)
Wyniki testu jakościowego
Ujemny (rys.2)
Reakcję ujemną wskazuje jednolita, mleczna zawiesina bez
aglutynacji, tak jak obserwuje się to w kontroli ujemnej.
Dodatni (rys.1)
Na reakcję dodatnią wskazuje jakakolwiek widzialna
aglutynacja w mieszaninie reakcyjnej. Reakcja w próbce
badanej powinna zostać porównana z kontrolą dodatnią.
Wyniki testu ilościowego
Największe rozcieńczenie dające jeszcze aglutynację
wskazuje miano ASO w surowicy badanej jak pokazuje
poniższa tabela
Rozcieńczenie
ASO w surowicy
surowicy
nierozcieńczonej (lU/ml)
1:2
400
1:4
800
1:8
1600
1:16
3200
Interpretacja
WARTOŚCI OCZEKIWANE
Dorośli: ASO poniżej 200 lU/ml
Podwyższone miano ASO wskazuje na ostrą infekcję
paciorkowcem hemolitycznym – producentem streptolizyny O.
Uwaga:
Zaleca się ustalenie i stosowanie własnych wartości
referencyjnych przez każde laboratorium. Podane dane są
jedynie wskazówką.
Jak w przypadku innych testów, wszystkie wyniki muszą być
rozpatrywany w kontekście badań klinicznych, historii choroby
pacjenta, i innych danych dostępnych lekarzowi.
BIBLIOGRAFIA
1. Adams, L.E., Hess, E. J. Amer. Technol. 48 (1978)
2. Dito, W. Am.Soc.CIin.Pat. 69, (1976)
3. Normausell, D. Immunochemistry 9, (1972)
4. Plotz and Singer, Arn. J. Med. 22, (1979)
Symbole
= Zapoznaj się z treścią ulotki;
= In vitro Diagnosticum;
= Ważny do;
= numer serii;
= Przechowywać w temp.
= numer artykułu
= ten produkt jest zgodny z dyrektywą 98/79EG z dnia 27.10.1998;
:
STAMAR
41-300 Dąbrowa Górnicza ul.Perla 5
tel : 32 2617720; fax : 32 2617760 ;
e-mail : [email protected]
Ul 96.640-ASO_Latex-v0407