Ulotka - Stamar

CRP LATEX
Test aglutynacyjny do jakościowego i półilościowego
oznaczenia białka C-reaktywnego w surowicy ludzkiej.
Ulotka informacyjna dla zestawów o nr kat.: 96.641
ZASADA
Test lateksowy CRP jest zawiesiną polistyrenowych cząstek
lateksu opłaszczonych frakcją gamma globuliny ludzkiej antyCRP z surowicy specyficznej. Jeśli białko CRP obecne jest w
próbce w trakcie badania zachodzi aglutynacja, która wskazuje
że zawartość CRP w próbce nierozcieńczonej jest równa lub
większa od 6 mg/l.
STRESZCZENIE
Białko C-reaktywne CRP jest klasycznym białkiem fazy ostrej
przy stanach zapalnych. Syntezowane jest w wątrobie i składa
się z pięciu identycznych łańcuchów polipeptydów połączonych
w pięcioczęściowy pierścień o masie molowej 120.000
daltonów. CRP jest najbardziej czułym markerem ostrej fazy a
jego stężenie narasta w stanach zapalnych bardzo szybko.
Skompleksowane
CRP
aktywuje
system
dopełniacza
zaczynając od C1q. CRP inicjuję opsonizację i fagocytozę
komórek, które wniknęły do organizmu. Jednakże głównym
zadaniem CRP jest wiązanie i unieczynnianie toksycznych
substancji endogennych powstałych w wyniku uszkodzenia
tkanek.
Oznaczenie parametru CRP wykorzystuje się w celu:
• rozpoznania zakażenia ogólnego układu (wyjątkami są
zapalenia jak SLE lub Colitis ulcerosa (wrzodziejące
zapalenie okrężnicy))
• oceny skuteczności terapii antybiotykowej przy infekcjach
bakteryjnych
• rozpoznania zakażenia wewnątrzmacicznego wraz z
towarzyszącym
przedwczesnym
przerwaniem
błon
płodowych
• rozróżnienia pomiędzy aktywną formą choroby lub
nieaktywną formą połączoną z infekcją np. u pacjentów
pacjentów SLE lub Colitis ulcerosa
• terapeutycznego monitorowania chorób reumatycznych
• oszacowania
konieczności
wprowadzenia
terapii
przeciwzapalnej
• wczesnego rozpoznania komplikacji pooperacyjnych (infekcja
ran, powstanie skrzepów)
• rozróżnienia infekcji od reakcji odrzutu transplantacji szpiku
kostnego.
Do oznaczenia białka C-reaktywnego można wykorzystać wiele
metod takich jak nefelometria lub turbidymetria. Niniejszy test
CRP bazuje na zasadzie immunoaglutynacji.
ODCZYNNIKI
R1 zawiesina lateksu
Cząsteczki lateksu opłaszczone anty-CRP
Konserwant
R2 kontrola dodatnia
Roztwór białka zawierający białko C-reaktywne powyżej 6 lU/ml
Konserwant
R3 kontrola ujemna
Roztwór białka zawierający białko C-reaktywne poniżej 6 lU/ml
Konserwant
•
PRZECHOWYWANIE I STABILNOŚĆ
Odczynniki i surowice kontrolne są stabilne aż do daty ważności.
Zestaw testowy powinien być przechowywany w chłodni (2-8°C).
NIE ZAMRAZAĆ ! Nie używać po upływie terminu ważności.
WYKONANIE TESTU
MATERIAŁ BADANY
Pobierać materiał używając standardowych probówek.
Do badania używać czystych i świeżych próbek surowicy. Użycie
osocza, surowicy lipemicznej lub kontaminacja drobnoustrojami
może spowodować fałszywe wyniki. Jeżeli test nie może zostać
wykonany niezwłocznie po pobraniu próbki, przechowywać materiał
badany w temperaturze 2-8°C do 24 h. W razie potrzeby dłuższego
przechowywania, materiał zamrozić (-20°C). Materiał zawierający
osad odwirować przed przeprowadzeniem testu.
OGRANICZENIA
•
Stosować wyłącznie do profesjonalnej diagnostyki in vitro. Nie
używać po upływie terminu ważności.
•
Nie jeść, nie pić i nie palić w strefie gdzie operuje się
materiałem badanym lub testami.
•
Traktować wszystkie próbki jako materiał zakaźny.
Przestrzegać ustalonych środków ostrożności przeciwko
zagrożeniu mikrobiologicznemu przez cały czas wykonywania
testu. Postępować zgodnie ze standardowymi procedurami
właściwego usuwania materiału zakaźnego.
•
Zanieczyszczenie surowicy oraz dłuższy czas reakcji testu niż
3 min może powodować fałszywie pozytywne wyniki.
ŚRODKI OSTROŻNOŚCI
Odczynniki zawierające azydek sodu mogą reagować z miedzią i
ołowiem tworząc silnie wybuchowe azydki metali. Zużyte
odczynniki rozcieńczać przez spłukiwanie ich dużą ilością wody w
celu uniknięcia tworzenia się azydków w kanalizacji. Zarówno
dodatnia jak i ujemna kontrola została przygotowana z ludzkiej
surowicy, przebadanej w kierunku HBsAg i HIV przy użyciu metod
licencjonowanych przez FDA. W wyniku tych badań nie
stwierdzono infekcji. Niemniej, żadna z metod nie może całkowicie
wykluczyć obecności infekcji. Dlatego też każdy materiał
biologiczny powinien być traktowany jako potencjalnie zakaźny.
MATERIAŁY
Materiały dostarczone
•
Odczynnik lateksowy
•
Kontrola ujemna i dodatnia
•
•
Płytka szklana lub zestaw jednorazowych płytek z
sześcioma polami reakcyjnymi
Mieszadełka
Ulotka
Materiały potrzebne, lecz nie dostarczone
•
Pojemnik na materiał
•
Minutnik
•
Pipeta
Przed przystąpieniem do testu doprowadzić odczynniki, i
materiał badany do temperatury pokojowej (15-30°C).
Oznaczenie jakościowe
1. Umieścić po 1 kropli (40µl) każdej z surowic badanych na
kolejne pola testowe na płytce reakcyjnej
2. Na oznaczone pola testowe nanieść surowice kontrolne:
dodatnią i ujemną.
3. Delikatnie wymieszać zawiesinę CRP Latex. Nie wstrząsać,
unikać powstania piany. Napełnić zakraplacz i dodać po 1
kropli zawiesiny do każdej z surowic na płytce reakcyjnej.
4. Używając załączonych mieszalników wymieszać zawiesinę z
surowicą na każdym z pól i rozprowadzić płyn na całą
powierzchnię pola testowego.
5. Mieszać płyn na płytce testowej 2 min. ręcznie (przez
powolne przechylanie płytki) lub przy użyciu wytrząsarki
rotacyjnej przy prędkości 80-100 obr/min.
6. Po 2 min. mieszania bezzwłocznie ocenić wzrokowo
powierzchnię każdego pola w bezpośrednim świetle.
Oznaczenie ilościowe
1. Używając roztwór soli fizjologicznej przygotować kolejne
rozcieńczenia surowicy badanej 1:2, 1:4, 1:8, 1:16 lub wg
własnego modelu. Nie rozcieńczać surowic kontrolnych!
2. Delikatnie wymieszać zawiesinę CRP Latex. Nie wstrząsać,
unikać powstania piany. Napełnić zakraplacz i dodać po 1
kropli zawiesiny do każdej z surowic na płytce reakcyjnej.
3. Kolejne rozcieńczenia badać wg metody opisanej w p.
Oznaczenie jakościowe.
INTERPRETACJA WYNIKÓW
(proszę odnieść treść do ilustracji poniżej)
Wyniki testu jakościowego
Ujemny (CRP w próbce badanej poniżej 6 mg/l -rys.2)
Reakcję ujemną wskazuje jednolita, mleczna zawiesina bez
aglutynacji, tak jak obserwuje się to w kontroli ujemnej.
Dodatni (CRP w próbce badanej 6mg/l i powyżej -rys.1)
Na reakcję dodatnią wskazuje jakakolwiek widzialna
aglutynacja w mieszaninie reakcyjnej. Reakcja w próbce
badanej powinna zostać porównana z kontrolą dodatnią.
Wyniki testu ilościowego
Największe rozcieńczenie dające jeszcze aglutynację wskazuje
miano CRP w surowicy badanej jak pokazuje poniższa tabela
Rozcieńczenie
CRP w surowicy
surowicy
Nierozcieńczonej (lU/ml)
1:2
12
1:4
24
1:8
48
1:16
96
Interpretacja
WARTOŚCI OCZEKIWANE
Dorośli: <6 mg/l
CRP jest białkiem, którego poziom w surowicy podnosi się
znacznie w ostrej fazie jak też w większości przypadków
uszkodzenia tkanki. Białko CRP uważa się za bardzo czuły,
choć mało specyficzny wskaźnik ostrych procesów zapalnych
(nowotwór złośliwy, gorączka reumatoidalna, zawał mięśnia
sercowego, zakażenie itp.)
Uwaga:
Zaleca się ustalenie i stosowanie własnych wartości
referencyjnych przez każde laboratorium. Podane dane są
jedynie wskazówką.
Jak w przypadku innych testów, wszystkie wyniki muszą być
rozpatrywany w kontekście badań klinicznych, historii choroby
pacjenta, i innych danych dostępnych lekarzowi.
Symbole
BIBLIOGRAFIA
= Zapoznaj się z treścią ulotki;
1.
2.
= In vitro Diagnosticum;
3.
Deyo, R.A., Pope, R.M., Perseilin, R.H., J.Rheumatol.279
Pepys M.B., Dash A.C., Ashley M.J., Clin.Exp.Immunol,
30,32-37 (1977)
Warworth, E. Wadsworth, Ch Clin. Chim. Acta 138 (1984)
= Ważny do;
= numer serii;
= Przechowywać w temp.
= numer artykułu
= ten produkt jest zgodny z dyrektywą 98/79EG z dnia 27.10.1998;
:
STAMAR
41-300 Dąbrowa Górnicza ul.Perla 5
tel : 32 2617720; fax : 32 2617760 ;
e-mail : [email protected]
Ul 96.641-CRP_Latex-v0407