Troponin T

04491963001V6
Troponin T
Troponin T, CARDIAC T
200 testów
190
• Wskazuje analizatory, w których można stosować poniższy zestaw
REF 04491815
Elecsys 2010
MODULAR
ANALYTICS
E170
cobas e 411
•
•
•
cobas e 601 cobas e 602
•
•
Polski
Zastosowanie
Zestaw do ilościowego oznaczania in vitro stężenia troponiny T w surowicy
ludzkiej lub osoczu. Elecsys Troponin T może być stosowany pomocniczo
w diagnostyce różnicowej ostrego zespołu wieńcowego w celu wykrycia
martwicy, np. ostrego zawału mięśnia sercowego. Wskazaniem do
wykonania testu może być także stratyfikacja ryzyka u pacjentów z ostrym
zespołem wieńcowym oraz stratyfikacja ryzyka chorób serca u pacjentów
z przewlekłą niewydolnością nerek. Test może być również pomocny w
podjęciu decyzji o bardziej intensywnej terapii oraz interwencji u pacjentów
z podwyższonym poziomem sercowej troponiny T.
Metoda elektrochemiluminescencji “ECLIA” przeznaczona jest do
zastosowania w analizatorach Elecsys i cobas e.
Podsumowanie
Troponina T (TnT) wchodzi w skład aparatu kurczliwego mięśni prążkowanych.
Jej funkcja jest taka sama we wszystkich rodzajach mięśni prążkowanych,
jednak TnT pochodząca z mięśnia sercowego (sercowa TnT, masa
cząsteczkowa 39.7 kD) wyraźnie różni się od TnT pochodzącej z mięśni
szkieletowych. Wysoka swoistość tkankowa sprawia, że troponina T sercowa
(cTnT) jest swoistym, wysoce czułym markerem uszkodzenia mięśnia
sercowego. W ostrym zawale mięśnia sercowego (AMI) stężenie troponiny
T w surowicy wzrasta 3 - 4 godziny po wystąpieniu objawów klinicznych.
Podwyższony poziom może utrzymywać się do 14 dni.1,2
Troponina T jest niezależnym markerem pozwalającym przewidzieć
krótko-, średnio- a nawet długoterminowe rokowanie u pacjentów z
ostrym zespołem wieńcowym (ACS).3,4,5,6,7
Dodatkowo, w badaniach przeprowadzanych w wielu ośrodkach klinicznych na
ponad 7000 pacjentów wykazano, że troponina T jest również przydatna w
wyznaczeniu grup pacjentów kwalifikujących się do terapii przeciwzakrzepowej
(inhibitory BPIIb/IIIa, heparyna o niskiej masie cząsteczkowej)8,9,10,11,12
Udowodniono, że troponina sercowa jest niezależnym markerem, dającym
najbardziej wiarygodne rokowania w stosunku do pacjentów z ACS i jest
również przydatna w ustalaniu wytycznych terapii przeciwzakrzepowej.
W związku z powyższym komisja, w skład której wchodzi Europejskie
Stowarzyszenie Kardiologiczne (European Society of Cardiology (ESC))
i Amerykański Instytut Kardiologii (American College of Cardiology
(ACC)) opracowała nową definicję zawału mięśnia sercowego (MI).
Zgodnie z nową definicją zawał mięśnia sercowego rozpoznaje się, gdy
stężenie troponiny sercowej we krwi przekracza 99 percentyl zakresu
wartości referencyjnych dla zdrowej populacji. Współczynnik zmienności
dla 99 percentyla powinien być mniejszy niż 10 %. 13
U pacjentów z ostrym zespołem wieńcowym i podwyższonym
stężeniem troponiny sercowej i/lub CK-MB rozpoznaje się zawał mięśnia
sercowego bez uniesienia odcinka ST (NSTEMI). W przypadku gdy
stężenie troponiny sercowej i CK-MB mieści się w zakresie wartości
referencyjnych, rozpoznaje się niestabilną dusznicę. Nowa definicja
jest obecnie częścią wytycznych ACC/AHA dotyczących traktowania
pacjentów z niestabilną dusznicą i NSTEMI.14
W oparciu o nową definicję zawału mięśnia sercowego opublikowano
liczne zalecenia dotyczące roli oznaczania troponin u pacjentów
z ostrymi zespołami wieńcowym.15,16
Uszkodzenie komórek mięśnia sercowego prowadzące do wzrostu stężenia
troponiny T we krwi może również wystąpić w innych stanach klinicznych,
takich jak: zastoinowa niewydolność serca,17 kardiomiopatia,18 zapalenie
mięśnia sercowego,19 urazy serca,20 niewydolność nerek,21 zator płuc,22
udar,23 dysfunkcja lewej komory w przebiegu wstrząsu septycznego.24
Do podwyższenia poziomu troponiny może dojść także po operacjach
takich jak operacje serca,25 operacje nie związane z sercem,26 przezskórna
2012-04, V 6 Polski
angioplastyka naczyń wieńcowych PTCA,27 oraz z powodu kardiotoksyczności
narkotyków.28 W wielu z tych przypadków, szczególnie zaś u pacjentów z
niewydolnością nerek, podwyższony poziom sercowej troponiny T pozwala
wskazać pacjentów o gorszych rokowaniach.29,30,31,32,33,34
Podwyższone stężenie troponiny świadczy więc o uszkodzeniu mięśnia
sercowego, lecz nie zawsze wskazuje na niedokrwienie. Pojęcie
"zawał mięśnia sercowego" należy stosować więc, gdy istnieją dowody
uszkodzenia serca, potwierdzone przez marker białkowy, u pacjenta
z objawami niedokrwiennej choroby serca. Jeżeli objawy kliniczne nie
wskazują na niedokrwienie, należy wykonać badania mające na celu
wykrycie innych przyczyn uszkodzenia serca.15
W teście Elecsys Troponin T zastosowano dwa przeciwciała monoklonalne
skierowane swoiście przeciwko ludzkiej sercowej troponinie T.35,36
Przeciwciała te rozpoznają dwa epitopy (AA 125-131 i 136-147)
zlokalizowane w środkowej części cząsteczki sercowej troponiny T
składającej się z 288 aminokwasów. Test Elecsys Troponin T wykrywa
wolną troponinę T, jak również kompleksy troponiny.37
Kalibrator Elecsys Troponin T (Elecsys Troponin T CalSet) zawiera
rekombinowaną ludzką sercową troponinę T (hcTnT). Rekombinowana
ludzka sercowa TnT jest wyodrębnionia z hodowli tkankowej E.coli BL21
zawierającej nośnik pET z 3 genem izoformy ludzkiej sercowej troponiny T.
Po fermentacji komórki są rozdzielane na drodze sonikacji, a rekombinowana
hcTnT oczyszczana jest metodą chromatografii jonowymiennej. Oczyszczona
rekombinowana hcTnT jest następnie charakteryzowana przez SDS PAGE,
Western blotting, aktywność immunologiczną i zawartość białek.38
Zasada testu
Sandwicz. Całkowity czas oznaczenia: 18 min.
• 1 inkubacja: Na kompleks sandwich składa się antygen z 15 µL
próbki, biotynylowane przeciwciało monoklonalne swoiste dla
troponiny T oraz przeciwciało monoklonalne swoiste dla troponiny
T znakowane kompleksem rutenu.a
• 2 inkubacja: Po dodaniu mikrocząstek opłaszczonych streptawidyną
kompleks wiąże się z fazą stałą dzięki powinowactwu
biotyny i streptawidyny.
• Mieszanina reakcyjna przenoszona jest do komory pomiarowej,
gdzie mikrocząstki przyciągane są do powierzchni elektrody za
pomocą magnesu. Następnie niezwiązane substancje usuwane
są za pomocą buforu ProCell. Napięcie przyłożone do elektrody
indukuje reakcję chemiluminescencji i emisję fotonu, która jest
mierzona za pomocą fotopowielacza.
• Wyniki odczytywane są z krzywej kalibracyjnej przygotowanej dla danego
analizatora w oparciu o kalibrację dwupunktową oraz krzywą wzorcową
(kalibracja 5-punktowa) zawartą w kodzie kreskowym odczynnika.
a) Tri( (2,2-bipyridyl)ruten(II)-kompleks (Ru(bpy)2+
3 )
Odczynniki - roztwory robocze
M
Mikrocząstki opłaszczone streptawidyną (przezroczysty
korek), 1 pojemnik, 12 mL:
Mikrocząstki opłaszczone streptawidyną 0.72 mg/mL; konserwant.
R1
Przeciwciała przeciwko troponinie T znakowane biotyną
(szary korek), 1 pojemnik, 18 mL:
Biotynylowane monoklonalne przeciwciała mysie przeciwko troponinie
T 1.5 mg/L; bufor fosforanowy 100 mmol/L, pH 6.0; konserwant.
R2
Przeciwciała przeciwko troponinie T znakowane Ru (bpy)2+
3
(czarny korek), 1 pojemnik, 17 mL:
Monoklonalne przeciwciała mysie przeciwko troponinie T,
znakowane kompleksem rutenu 1.2 mg/L; bufor fosforanowy
100 mmol/L, pH 6.0; konserwant.
Zalecenia i środki ostrożności
Przeznaczone do celów diagnostyki in vitro.
Należy stosować standardowe procedury postępowania z odczynnikami.
Wszelkie odpady należy usuwać zgodnie z lokalnymi przepisami.
Karta charakterystyki produktu dostępna na życzenie.
Unikać spienienia odczynników i próbek (materiału od pacjentów,
kalibratorów i kontroli).
1/5
Analizatory Elecsys i cobas e
Troponin T
Troponin T, CARDIAC T
Postępowanie z odczynnikami
Odczynniki w zestawie stanowią gotową do użycia całość
i nie można ich rozdzielać.
Wszystkie informacje niezbędne do przeprowadzenia oznaczenia zapisane
są w postaci kodów kreskowych dla danego odczynnika.
Przechowywanie i trwałość
Przechowywać w temp. 2-8 °C.
Zestaw odczynnikowy Elecsys należy przechowywać w pozycji
pionowej tak, aby podczas automatycznego mieszania przed użyciem
dostępne były wszystkie mikrocząstki.
Stabilność:
zamknięte przechowywać w temp. 2-8 °C
po otwarciu w temp. 2-8 °C
na pokładzie analizatora
do daty ważności
12 tyg.
8 tyg.
Pobieranie i przygotowanie materiału
Sprawdzono i zaakceptowano możliwość stosowania jedynie materiałów
biologicznych wymienionych poniżej.
Surowica pobrana przy użyciu standardowych probówek lub
probówek zawierających żel separujący.
Osocze krwi pobranej na heparynę litową, K2-EDTA, K3-EDTA
lub cytrynian sodowy.
Kryterium: Odzysk w granicach 90-110 % wartości surowicy lub
nachylenie krzywej 0.9 - 1.1 + przesunięcie <± 2 x czułość analityczna
(LDL) + współczynnik korelacji > 0.95.
Nie stosować osocza pobranego na szczawiany/fluorki.
Materiał trwały 24 godz. w temp. 2-8 °C, 12 mies. w temp. -20 °C.
Można zamrażać jednokrotnie.
Podane rodzaje próbek oznaczono przy użyciu wybranych probówek do
pobierania materiału, dostępnych na rynku w czasie wykonywania oznaczeń.
Oznacza to, że nie przetestowano probówek od wszystkich producentów.
Systemy pobierania próbek pochodzące od różnych producentów mogą
zawierać różniące się materiały, co w pewnych przypadkach może mieć
wpływ na wynik oznaczeń. W przypadku stosowania probówek pierwotnych
(systemów pobierania krwi) należy ściśle przestrzegać zaleceń ich producenta.
Przed oznaczeniem odwirować próbki z widocznym zmętnieniem
lub obecnością strątów. Nie używać próbek ani surowic kontrolnych
stablizowanych azydkiem.
Przed oznaczeniem należy upewnić się, że próbki od pacjentów, kalibratory
oraz surowice kontrolne doprowadzone zostały do temp. 20-25 °C.
Z powodu możliwości parowania próbki, kalibratory oraz surowice kontrolne
umieszczone w analizatorze należy oznaczyć w ciągu 2 godzin.
Materiały dostarczone w zestawie
Patrz "Odczynniki - roztwory robocze" w części o odczynnikach
Niezbędne materiały dodatkowe (nie dostarczone w zestawie)
• REF 04856627190, Troponin T CalSet, do sporządzenia 4 x 1 mL
• REF 03530469190, PreciControl Troponin T, do sporządzenia
2 x 2 mL PreciControl Troponin T 1 i 2
• REF 11732277122, Diluent Universal, 2 x 16 mL rozcieńczalnika lub
REF 03183971122, Diluent Universal, 2 x 36 mL rozcieńczalnika
• Ogólne wyposażenie laboratoryjne
• Analizatory Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 lub cobas e
Akcesoria do analizatorów Elecsys 2010 i cobas e 411:
• REF 11662988122, ProCell, 6 x 380 mL bufor systemowy
• REF 11662970122, CleanCell, 6 x 380 mL płyn płuczący
• REF 11930346122, Elecsys SysWash, 1 x 500 mL dodatek
do wody przeznaczonej do mycia
• REF 11933159001, Adapter dla SysClean
• REF 11706802001, Elecsys 2010 Assay Cup, 60 x 60 naczynka reakcyjne
• REF 11706799001, Elecsys 2010 Assay Tip, 30 x 120 końcówki
Akcesoria do analizatorów MODULAR ANALYTICS E170,
cobas e 601 i cobas e 602:
• REF 04880340190, ProCell M, 2 x 2 L bufor systemowy
• REF 04880293190, CleanCell M, 2 x 2 L płyn płuczący
Analizatory Elecsys i cobas e
REF 03023141001, PC/CC-Cups, 12 pojemników do wstępnego
podgrzania ProCell M i CleanCell M przed użyciem
• REF 03005712190, ProbeWash M, 12 x 70 mL roztwór myjący do
płukania podczas finalizacji i zmiany odczynnika
• REF 12102137001, AssayCups/AssayTips Combimagazine M, 48 x 84
naczynka reakcyjne/końcówki, torby na zużyte materiały
• REF 03023150001, WasteLiner, torby na zużyte materiały
• REF 03027651001, SysClean Adapter M
Akcesoria do wszystkich analizatorów:
• REF 11298500316, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL płyn czyszczący
• REF 11298500160, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL płyn
czyszczący (dla USA)
•
Oznaczenie
W celu optymalnego działania testu należy stosować się do zaleceń
zawartych w niniejszej ulotce dotyczących konkretnego analizatora. Należy
postępować zgodnie z instrukcją obsługi analizatora.
Wymieszanie mikrocząstek odbywa się automatycznie przed użyciem.
Informacje niezbędne do przeprowadzenia oznaczenia wczytywane są z kodu
kreskowego odczynnika. W przypadku trudności z odczytem kodu kreskowego
należy wprowadzić manualnie 15-cyfrowy numer podany na opakowaniu testu.
Odczynniki wyjęte z lodówki należy doprowadzić do temp. ok. 20 °C i
umieścić je w rotorze odczynnikowym analizatora w temp. 20 °C. Unikać
tworzenia się piany. Analizator automatycznie kontroluje temperaturę
odczynników oraz ich otwieranie i zamykanie.
Kalibracja
Spójność pomiarowa: Test Elecsys Troponin T (4 generacja, REF 04491815)
jest standaryzowany wobec Elecsys Troponin T STAT
(4 generacja, REF 04660307). Ten z kolei jest standaryzowany wobec
Enzymun-Test Troponin T (CARDIAC T).
Wszystkie dane kalibracyjne danej serii odczynnika Elecsys Troponin T
w każdym zestawie zapisane są w postaci kodu kreskowego. Wcześniej
ustalona krzywa wzorcowa wprowadzana jest do analizatora przy
pomocy Elecsys Troponin T CalSet.
Częstotliwość kalibracji: Kalibrację należy przeprowadzić zawsze dla nowej
serii odczynnika (w ciągu 24 godz. od umieszczenia go w analizatorze).
Ponowną kalibrację sugeruje się w sposób następujący:
• po 1 miesiącu (28 dni) jeżeli stosowana jest ta sama seria odczynnika
• po 7 dniach (jeżeli w analizatorze stosowany jest ten sam
zestaw odczynnikowy)
• jeśli to konieczne, np. wyniki kontroli jakości wykraczają
poza ustalone zakresy
Kontrola jakości
Do kontroli jakości stosować Elecsys PreciControl Troponin T 1 i 2.
Dodatkowo można stosować inny odpowiedni materiał kontrolny.
Kontrole dla różnych zakresów stężeń powinny być oznaczane równolegle
do próbek badanych, co najmniej co 24 godziny, raz dla każdego
zestawu odczynnikowego oraz po każdej kalibracji. Częstotliwość
i zakres przeprowadzania kontroli muszą być dostosowane do
indywidualnych wymogów danego laboratorium. Uzyskane wartości
winny zawierać się w wyznaczonych granicach.
Wskazane jest, by każde laboratorium opracowało procedury naprawcze,
które należy wdrożyć, gdy wyniki uzyskane dla materiałów kontrolnych
znajdą się poza podanym zakresem.
Kontrolę jakości należy wykonywać zgodnie z właściwymi zaleceniami
organów państwowych oraz lokalnymi wytycznymi.
Obliczanie wyników
Analizatory automatycznie dokonują obliczenia stężenia badanej substancji
w materiale i podają wyniki wyrażone w µg/L lub ng/mL.
Ograniczenia - substancje interferujące
Brak interferencji ze strony żółtaczki
(bilirubina < 462 µmol/L lub < 27 mg/dL),
hemolizy (Hb < 0.062 mmol/L lub < 0.1 g/dL; próbki z widocznymi
oznakami hemolizy mogą powodować interferencje), lipemii (Intralipid
< 1500 mg/dL) i biotyny < 205 nmol/L lub < 50 ng/mL.
2/5
2012-04, V 6 Polski
04491963001V6
Troponin T
Troponin T, CARDIAC T
Fałszywie zaniżone wyniki uzyskuje się w przypadku użycia próbek
o stężeniu hemoglobiny > 0.1 g/dL.
Kryterium: Odzysk w granicach ± 20 % wartości początkowej przy
stężeniu troponiny T < 0.1 µg/L lub ng/mL (± 10 % przy stężeniu
troponiny T ≥ 0.1 µg/L lub ng/mL).
Od osób leczonych wysokimi dawkami biotyny (tj. > 5 mg/dzień)
materiał do oznaczenia należy pobierać dopiero co najmniej po
8 godz. od ostatniego podania biotyny.
Brak interferencji ze strony czynnika reumatoidalnego do stężenia 2000 IU/mL.
Nie stwierdzono efektu nadmiaru antygenu przy stężeniu
troponiny T do 400 µg/L (ng/mL).
Przeprowadzono testy in vitro dla 50 najczęściej stosowanych
leków. Nie stwierdzono interferencji.
W osoczu pobranym do probówek ze szczawianami/fluorkami
wykazano, zależne od próbki, niskie wartości troponiny T w porównaniu
z wynikami uzyskanymi w surowicy. Dlatego nie należy stosować
osocza pobranego na szczawiany/fluorki.
W rzadkich przypadkach może wystąpić interferencja spowodowana bardzo
wysokim mianem przeciwciał swoistych dla substancji analizowanej,
przeciw streptawidynie lub rutenowi. Test został przygotowany w
taki sposób, aby efekt ten zminimalizować.
Dla celów diagnostycznych wyniki powinny być interpretowane
z uwzględnieniem historii choroby, badań klinicznych oraz
innych danych o pacjencie.
Granice i zakresy
Zakres pomiarowy
0.010-25.0 µg/L lub ng/mL (wyznaczone przez dolną granicę wykrywalności
oraz najwyższy punkt krzywej wzorcowej). Wartości poniżej dolnej granicy
wykrywalności podawane są jako < 0.010 µg/L (ng/mL). Wartości powyżej
zakresu pomiarowego podawane są jako > 25.0 µg/L (ng/mL) (lub do
250 µg/L (ng/mL) dla 10-krotnie rozcieńczonych próbek).
Dolna granica pomiaru
Dolna granica wykrywalności
Dolna granica wykrywalności: 0.010 µg/L (ng/mL)
Za dolną granicę wykrywalności przyjmuje się najniższe stężenie,
które można odróżnić od zera. Oblicza się je jako stężenie powyżej
3 odchyleń standardowych najniższego wzorca (kalibrator wzorcowy,
wzorzec 1 + 3 OS, badanie powtarzalności, n = 21).
Stężenie troponiny T, mierzone w powtórnych oznaczeniach ze
współczynnikiem zmienności precyzji pośredniej wynoszącym 10 %
(patrz wykres poniżej) wynosi ≥ 0.030 µg/L (ng/mL).
Wartości oczekiwane
W badaniach testem Elecsys Troponin T przeprowadzonych na 1951
zdrowych ochotnikach, górny zakres referencyjny (99 percentyl) dla
troponiny T wyniósł < 0.010 µg/L (ng/mL).
Dane (stan na lipiec 1999) otrzymano z: Wieloośrodkowego oznaczenia
troponiny T (3 generacji), kwiecień 1999 oraz międzynarodowego badania
Elecsys 1010, markery sercowe, marzec 1999.
Najniższe stężenie uzyskane testem Elecsys Troponin T z WZ
mniejszym lub równym 10 % wyniosło 0.030 µg/L (ng/mL) (precyzja
pośrednia w obrębie jednego numeru serii) lub 0.060 µg/L (ng/mL)
(precyzja pośrednia dla różnych numerów serii).
W oparciu o kryteria WHO (definicja zawału z lat siedemdziesiątych)
przyjmuje się wartość punktu odcięcia (do różnicowania klinicznego) dla
troponiny T na poziomie 0.100 µg/L (ng/mL) (analiza ROC).39,40
W związku z kinetyką uwalniania troponiny T, na podstawie ujemnego
wyniku uzyskanego w ciągu pierwszych godzin od momentu wystąpienia
objawów, nie można wykluczyć zawału mięśnia sercowego z całą
pewnością. W przypadku podejrzenia zawału, oznaczenie należy
powtórzyć po upływie odpowiedniego czasu.
Czynniki powodujące podwyższone wyniki 41,42,43,44,45,46,47
W opublikowanych badaniach klinicznych wykazano wzrost stężenia
troponiny T u pacjentów z uszkodzeniem mięśnia sercowego w
przypadku dusznicy bolesnej, urazu serca i po przeszczepach
serca. Podwyższony poziom zaobserwowano również u pacjentów z
rabdomiolizą oraz zapaleniem wielomięśniowym.
W oparciu o populację pacjentów każde laboratorium powinno określić poziom
wartości oczekiwanych lub wyznaczyć własne zakresy wartości referencyjnych.
Szczegółowe dane o teście
Dane uzyskane przy użyciu analizatorów podano poniżej. Wyniki uzyskane
w poszczególnych laboratoriach mogą się różnić.
Precyzja
Precyzję określono w oparciu o odczynniki Elecsys, pulowaną surowicę
ludzką oraz próbki kontrolne zgodnie z modyfikowanym protokołem
(EP5-A) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 6 razy
dziennie przez 10 dni (n = 60); powtarzalność w analizatorze MODULAR
ANALYTICS E170, n = 21. Otrzymano następujące wyniki:
Analizatory Elecsys 2010 i cobas e 411
Precyzja pośrednia
Powtarzalnośćb
Próbka
Wart. śr.
OS
WZ
OS
WZ
µg/L
µg/L
µg/L
%
%
(ng/mL) (ng/mL)
(ng/mL)
0.040
0.001
3.4
0.002
5.6
Surowica ludzka 1
0.647
0.010
1.6
0.018
2.8
Surowica ludzka 2
6.04
0.088
1.5
0.159
2.6
Surowica ludzka 3
0.134
0.002
1.6
0.003
2.3
PreciControl TNT1
2.96
0.033
0.051
1.1
1.7
PreciControl TNT2
b) Powtarzalność = precyzja w serii
x: Stężenie (ng/mL)
y: WZ (%)
Biorąc pod uwagę zmienność pomiędzy seriami, przy stężeniu 0.030 ng/mL,
zostaje osiągnięty 18 % WZ, a przy stężeniu 0.060 ng/mL, WZ wyniosi 10 %.
Rozcieńczenie
Próbki o stężeniu troponiny T powyżej zakresu pomiarowego należy
rozcieńczyć za pomocą Elecsys Diluent Universal. Zalecane rozcieńczenie
to 1:10 (albo automatyczne w analizatorach MODULAR ANALYTICS E170,
Elecsys 2010 i cobas e, albo manualne). Stężenie rozcieńczonej próbki
musi przekraczać 1.00 µg/L (ng/mL). Przy rozcieńczaniu manualnym
uzyskany wynik należy pomnożyć przez współczynnik rozcieńczenia.
Przy rozcieńczaniu przez analizator, oprogramowanie MODULAR
ANALYTICS E170, Elecsys 2010 i cobas e automatycznie uwzględnia
rozcieńczenie przy wyliczaniu stężenia próbki.
2012-04, V 6 Polski
Analizatory MODULAR ANALYTICS E170, cobas e 601 i cobas e 602
Precyzja pośrednia
Powtarzalność
Próbka
Wart. śr. OS
WZ Wart. śr.
OS
WZ
µg/L
µg/L
µg/L
µg/L
%
%
(ng/mL) (ng/mL)
(ng/mL) (ng/mL)
0.045 0.001 2.4 0.038
0.002
5.0
Surowica ludzka 1
0.624 0.006 0.9 0.600
0.014
2.3
Surowica ludzka 2
5.96
0.068 1.2
5.68
0.131
2.3
Surowica ludzka 3
0.141 0.002 1.2
0.133
0.002
1.7
PreciControl TNT1
3.00
0.023 0.8
2.93
0.058
2.0
PreciControl TNT2
3/5
Analizatory Elecsys i cobas e
Troponin T
Troponin T, CARDIAC T
Porównanie metod
W wyniku porównania metody Elecsys Troponin T (y) z metodą
Elecsys Troponin T STAT (x) przy zastosowaniu próbek klinicznych
uzyskano następującą korelację:
Liczba oznaczanych próbek: 60
Regresja liniowa
Passing/Bablok48
y = 0.98x + 0.01
y = 0.99x - 0.01
τ = 0.974
r = 0.999
Stężenia próbek mieściły się w zakresie od 0.06 do 19 µg/L (ng/mL).
Swoistość analityczna
Wykryto następujące reakcje krzyżowe dla zastosowanych
przeciwciał monoklonalnych:
Troponina T mięśni szkieletowych 0.001 %, troponina I sercowa 0.002 %,
tropomiozyna mięśni szkieletowych 0.001 %, tropomiozyna sercowa
0.1 % oraz łańcuchy lekkie 1 miozyny sercowej 0.003 %.
Czułość i swoistość diagnostyczna40
Dane w oparciu o próbki krwi pobrane od 294 pacjentów z bólami
w klatce piersiowej i z podejrzeniem zapalenia mięśnia sercowego,
przyjętych na ostry dyżur w okresie 10 tygodni.
154 pacjentów (171 próbek) nie było leczonych szpitalnie, ponieważ
wykluczono zawał i inne poważne choroby (np. zator płucny). 58 pacjentów
(576 próbek) z ostrym zawałem mięśnia sercowego (AMI) sklasyfikowanych
wg. standardów WHO, 50 pacjentów (396 próbek) z niestabilną dusznicą
bolesną oraz 32 pacjentów (212 próbek) bez ostrych zespołów.
Próbki pobrano w 0, 3, 6, 12, 24, 48, 72 i 96 godzinie od przyjęcia do szpitala
lub aż do czasu wypisania i oznaczano je następującymi metodami:
• Elecsys Troponin T 2nd gen
• Enzymun-Test Troponin T
• Elecsys CK-MB mass
• Stratus CK-MB mass
• Aktywność CK całkowitego w analizatorze CHEM 1
Czułość i swoistość kliniczna testu Elecsys i porównywanych metod w
wykryciu zawału mięśnia sercowego przy przyjęciu pacjenta do szpitala były
porównywalne - patrz tabela poniżej. Trzy godziny po przyjęciu do szpitala
większość z pacjentów z zawałem poddana była skutecznej reperfuzji, która
po części ma wpływ na wysoką czułość w pobranych następnie próbkach krwi.
Przyczyną niskiej swoistości dla troponiny T w zawale, w porównaniu z
CK-MB jest w znacznej mierze minimalne uszkodzenie mięśnia sercowego
u pacjentów z niestabilną dusznicą bolesną. Wyłączenie wyników tych
pacjentów z obliczeń prowadzi do uzyskania niemalże 100 % swoistości
dla troponiny T w wykrywaniu zawału. Na przykład: 6 godzin po przyjęciu
pacjenta do szpitala swoistość testu Elecsys Troponin T wynosi 97.5 %, a
po 24 godzinach 100 %. Swoistość dla testu CK-MB mass po 6 godzinach
od przyjęcia wynosi 92.9 %, po 24 godzinach 91.7 %, po wyłączeniu z
obliczeń wyników pacjentów z niestabilną dusznicą bolesną.
Analizatory Elecsys i cobas e
Czas (w godzinach) po
przyjęciu do szpitala
Elecsys Troponin T,
2 gen.
Czułość†
Swoistość†
0
3
6
12
24
48
72
96
60.7 96.0 98.0 100.0 100.0 97.7 95.7 97.7
96.5 86.6 82.5 83.3 83.9 86.9 82.7 87.8
Enzymun-Test Troponin T
Czułość†
Swoistość†
Elecsys CK-MB
Czułość†
Swoistość†
Stratus CK-MB
Czułość†
Swoistość†
Aktywność całkowitego CK
Czułość†
Swoistość†
Całkowita liczba pacjentów
60.7 96.0 98.0 100.0 100.0 97.3 95.7 97.7
95.8 84.4 80.3 82.4 85.3 88.2 82.8 88.9
69.6 98.0 100.0 95.7 89.4 75.0 34.8 18.6
94.1 86.7 84.5 85.3 89.7 94.1 100.0 100.0
63.0 98.0 100.0 95.7 87.2 77.3 37.0 11.6
94.4 87.5 85.7 84.9 90.6 95.5 100.0 100.0
56.9 86.1 93.3 92.9 83.7 69.2 58.5 31.6
86.6 84.2 84.9 86.7 88.1 93.4 98.1 97.9
294 140 121 115 115 112 104 97
† Przy obliczaniu czułości i swoistości do grupy kontrolnej włączono
pacjentów z niestabilną dusznicą bolesną.
Literatura
1. Katus HA, Remppis A, Looser S, et al. Enzyme linked immunoassay
of cardiac troponin T for the detection of acute myocardial infarction
in patients. Mol Cell Cardiol 1989;21(7):1349-1353.
2. Katus HA, Scheffold T, Remppis A, Zehelein J. Proteins of the troponin
complex. Laboratory Medicine 1992;23(5):311-317.
3. Hamm CW, Ravkilde J, Gerhardt W, Jorgensen P, Peheim E,
Ljungdahl L, et al. The prognostic value of serum troponin T in
unstable angina. N Engl J Med 1992;327(3):146-150.
4. Ohmann EM, et al. Risk stratification with admission cardiac troponin T
levels in acute myocardial ischemia. N Engl J Med 1996;335:1333-1334.
5. Christenson RH, Duh SH, Newby LK, Ohman EM, Califf RM,
Granger CB, et al. Cardiac troponin T and cardiac troponin I: relative
values in short-term risk stratification of patients with acute coronary
syndromes. Clin Chem 1998;44(3):494-501.
6. Lindahl B, Diderholm E, Lagerqvist B, Venge P, Wallentin L, and
the FRISC II investigators. Mechanisms behind the prognostic
value of Troponin T in unstable coronary artery disease: a FRISC
II substudy. J Am Coll Card 2001;38:979-986.
7. Aviles RJ, Askari AT, Lindahl B, Wallentin L, Jia G, Ohman EM,
Mahaffey KW, Newby LK, Califf RM, Simoons ML, Topol EJ, Lauer MS.
Troponin T levels in patients with acute coronary syndromes, with or
without renal dysfunction. N Engl J Med 2002;346:2047-2052.
8. Lindahl B, Venge P, Wallentin L. Troponin T Identifies Patients With
Unstable Coronary Artery Disease Who Benefit From Long-Term
Antithrombotic Protection. J Am Coll Cardiol 1997;29(1):43-48.
9. Hamm CW, Heeschen C, Goldmann B, Vahanian A, Adgey J, Miguel MC,
et al. Benefit of abciximab in patients with refractory unstable angina in
relation to serum troponin T levels. N Engl J Med 1999;340(21):1623-1629.
10. Heeschen C, Hamm CW, Goldmann BU, et al. for PRISM study
investigators. Troponin concentrations for stratification of patients
with acute coronary syndromes in relation to therapeutic efficacy
of tirofiban. Lancet 1999;354:1757-1762.
11. Lindahl B, Diderholm E, Lagerquist B, Venge P, Wallentin L.
Effects on mortality of long-term treatment with l.m.w. heparin
in relation to troponin T level and ECG findings - a FRISC 2
substudy. Eur Heart J 2000;21(Suppl.):521.
12. Newby LK, Ohman EM, Christenson RH, Moliterno DJ, Harrington RA,
White HD, et al. Benefit of Glycoprotein IIb/IIa Inhibition in Patients
With Acute Coronary Syndromes and Troponin T-Positive Status: The
PARAGON-B Troponin T Substudy. Circulation 2001;103:2891-2896.
13. Alpert JS and Thygesen K. Myocardial Infarction redefined - A consensus
document of the joint European Society of Cardiology/American
4/5
2012-04, V 6 Polski
04491963001V6
Troponin T
Troponin T, CARDIAC T
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
College of Cardiology committee for the redefinition of myocardial
infarction. JACC 2000;36:959-969.
Braunwald E, Antman EM, Beasley JW, Califf RM, Cheitlin MD,
Hochman JS, et al. ACC/AHA guidelines for the management of patients
with unstable angina and non-ST-elevation myocardial infarction: Executive
summary and recommendations. Circulation 2000;102:1193-1209.
Jaffe AS, Ravkilde J, Roberts R, Naslund U, Apple FS, Galvani M,
and Katus H. It’s time for a change to a troponin standard.
Circulation 2000;102:1216-1220.
Apple FS, Wu AHB. Myocardial infarction redefined: Role of cardiac
troponin Testing. Clin Chem 2001;47:377-379.
Setsuta K, Seino Y, Takahashi N, Ogawa T, Sasaki K, Harada A, et al.
Clinical significance of elevated levels of cardiac troponin T in patients
with chronic heart failure. Am J Cardiol 1999;84:608-611.
Sato Y, Kataoka K, Matsumori A, Sasayama S, Yamada T, Ito H, Takatsu Y.
Measuring serum aminoterminal type III procollagen peptide, 7S domain of
type IV collagen, and cardiac troponin T in patients with idiopathic dilated
cardiomyopathy and secondary cardiomyopathy. Heart 1997;78:505-508.
Lauer B, Niederau C, Kühl U, Schannwell M, Pauschinger M,
Strauer BE, Schultheiss HP. Cardiac troponin T in patients with clinically
suspected myocarditis. JACC 1997;30:1354-1359.
Swaanenburg JCJM, Klaase JM, DeJongste MJL, Zimmerman KW,
ten Duis HJ. Troponin I, troponin T, CK-MB-activity and CK-MB mass
as markers for the detection of myocardial contusion in patients who
experienced blunt trauma. Clin Chim Acta 1998;272:171-181.
Dierkes J, Domrose U, Westphal S, Ambrosch A, Bosselmann HP,
Neumann KH, Luley C. Cardiac troponin T predicts mortality in patients
with renal disease. Circulation 2000;102:1964-1969.
Giannitsis E, Müller-Bardorff M, Kurowski V, Weidtmann B,
Wiegand U, Kampmann M, Katus HA. Independent prognostic
value of cardiac troponin T in patients with confirmed pulmonary
embolism. Circulation 2000;102:211-217.
James P, Ellis CJ, Whitlock RML, McNeil AR, Henley J, Anderson NE.
Relation between troponin T concentration and mortality in patients
presenting with an acute stroke: observational study. BMJ 320:1502-1504.
ver Elst KM, Spapen HD, Nguyen DN, Garbar C, Huyghens LP, Gorus FK.
Cardiac troponin I and T are biological markers of left ventricular
dysfunction in septic shock. Clin Chem 2000:46:650-657.
Jenkins DP, Pugsley WB, Alkhulaifi AM, Kemp M, Hooper J,
Yellon DM. Ischaemic preconditioning in patients undergoing coronary
artery bypass surgery. Heart 1997;77:314-318.
Lopez-Jimenez F, Goldman L, Sacks DB, Thomas EJ, Johnson PA,
Cook EF, Lee TH. Prognostic value of cardiac troponin T after non-cardiac
surgery: 6 month follow up data. JACC 1997;29:1241-1245.
Johansen O, Brekke M, Stromme JH, Valen V, Seljeflot I,
Skjaeggestad O, Arensen H. Myocardial damage during percutaneous
transluminal coronary angioplasty as evidenced by troponin T
measurements. Eur Heart J 1998;19:112-117.
Herman EH, Lipshultz SE, Rifai N, Zhang J, Papoian T, Yu ZX, et al.
Use of cardiac troponin T levels as an indicator of doxorubicin-induced
cardiotoxicity. Cancer Res 1998;58:195-197.
Ooi DS, Zimmerman D, Graham J, Wells GA. Cardiac troponin T predicts
long-term outcomes in hemodialysis patients. Clin Chem 2001;47:412-417.
Apple FS, Murakami MM, Pearce LA, Herzog CA. Predictive value
of cardiac troponin I and T for subsequent death in end-stage
renal disease. Circulation 2002;106:2941-2945.
deFilippi C, Wasserman S, Rosanio S, Tiblier W, Sperger H, Tocchi M.
Christenson R, Uretsky B, Smiley M, Gold J, Muniz H, Badalamenti J,
Herzog C, Henrich W. Cardiac Troponin T and C-reactive protein for
predicting prognosis, coronary atherosclerosis, and cardiomyopathy in
patients undergoing long term hemodialysis. JAMA 2003;290:353-359.
Iliou MC, Fumeron C, Benoit MO, Tuppin P, Calonge VM, Moatti N,
Buisson C, Jacquot C. Prognostic value of cardiac Markers in
ESRD: Chronic Hemodialysis and New Cardiac markers Evaluation
(CHANCE) study. Am J Kidney Dis 2003;42:513-523.
Choy JB, Armstrong PW, Ulan RA, Campbell PM, Gourishankar S,
Prosser CI, Tymchak W. Do cardiac troponins provide prognostic insight
in hemodialysis patients? Can J Cardiol 2003;19:907-911.
2012-04, V 6 Polski
34. Scott B, Deman A, Peeters P, Van den Branden C, Stolear JC, Van Camp G,
Verbeelen D. Cardiac Troponin T and malondialdehyde modified plasma
lipids in haemodialysis patients. Neprhol Dial Transplant 2003;18:737-742.
35. Davis GK, Labugger R, Van Eyk JE, Apple FS. Cardiac
troponin T is not detected in western blots of diseased renal
tissue. Clin Chem 2001;47:782-783.
36. Ricchiuti V, Voss EM, Ney A, Odland M, Anderson PAW, Apple FS.
Cardiac Troponin T isoforms expressed in renal diseased skeletal muscle
will not cause false positive results by the second generation cTnT assay
by Boehringer Mannheim; Clin Chem 1998;44(9):1919-1924.
37. Wu AHB, Feng Y-J, Moore R, et al. Characterisation of cardiac troponin
subunit release into serum after acute myocardial infarction and
comparison of assays for troponin T and I. Clin Chem 1998;44:1198-1208.
38. Hallermayer K, Klenner D and Vogel R. Use of recombinant human
cardiac troponin T for standardization of third generation troponin T
methods. Scand J Clin Invest 1999;59(Suppl 230):128-131.
39. Müller-Bardorff M, et al. Improved troponin T ELISA specific for
cardiac troponin T isoform: assay development and analytical
validation. Clin Chem 1997;43(3):458-466.
40. Kampmann M, Rauscher T, Müller-Bardorff M, Münch M, Klein G, Katus H.
Clinical Evaluation of Troponin T and CK-MB Mass on the Elecsys® 2010
Analyzer. Poster presented at Medlab 97, 12th IFCC European Congress
of Clinical Chemistry, August 17-22, 1997, Basel, Switzerland.
41. Kobayashii S, Tanaka M, Tamura N, Hashimoto H, Hirose S-I.
Serum cardiac troponin T in polymyositis/dermatomyositis.
Lancet 1992;340(8821):726.
42. Mair J, Dienstl F, Puschendorf B. Cardiac Troponin T in the Diagnosis of
Myocardial Injury. Critical Reviews in Clin Lab Sci 1992;29(1):31-57.
43. Carrier M, Solymoss BC, Raymond C, Leclerc Y, Pelletier LC. Cardiac
Troponin T and Creatine Kinase MB Isoenzyme as Biochemical
Markers of Ischemia after Heart Preservation and Transplantation.
J Heart Lung Transplant 1994;13(4):696-700.
44. Löfberg M, Tähtelä R, Härkönen M, Somer H. Myosin
Heavy-Chain Fragments and Cardiac Troponins in the Serum
in Rhabdomyolysis. Diagnostic Specificity of New Biochemical
Markers. Arch Neurol 1995;52:1210-1214.
45. Anderson JR, Hossein-Nia M, Brown P, Holt DW, Murday A. Donor
Cardiac Troponin T Predicts Subsequent Inotrope Requirements
Following Cardiac Transplantation. Brief Communications in
Transplant 1994;58(9):1056-1057.
46. Franz WM, Remppis A, Kandolf R, Kübler W, Katus HA. Serum
Troponin T: Diagnostic Marker for Acute Myocarditis. Letter to
the Editor in Clin Chem 1996;42(2):340-341.
47. Mair P, Mair J, Koller J, Wieser C, Artner-Dworzak E, Puschendorf
B. Cardiac troponin T in the diagnosis of heart contusion.
Lancet 1991;338:693.
48. Passing H, Bablok W, et al. A General Regression Procedure for Method
Transformation. J Clin Chem Clin Biochem 1988;26:783-790.
W celu uzyskania dalszych informacji należy zapoznać się z dokumentacją
dla danego analizatora, instrukcją obsługi, ulotką aplikacyjną, informacją o
produkcie lub ulotkami produktowymi dołączonymi do opakowań.
Istotne dodatki oraz zmiany zostały oznaczone na marginesie. Zmiany dotyczące parametrów testu zawarte w
kodzie kreskowym odczynnika, który został już wprowadzony do analizatora należy nanieść ręcznie.
© 2010, Roche Diagnostics
Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D-68305 Mannheim
www.roche.com
5/5
Analizatory Elecsys i cobas e